猪圆环病毒2型orf2基因在奶山羊胎儿成纤维细胞中的表达与生物活性鉴定

高珊; 申培磊; 侯书宝; 徐洪龙; 卢清侠; 张勇; 张改平; 《中国兽医学报 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：为获得稳定表达猪圆环病毒2型(PCV-2)orf2基因的奶山羊胎儿成纤维细胞,将PCV-2 orf2基因与筛选基因neo表达框串联插入到pBC1质粒,得到重组的真核表达载体pBC1-orf2-neo。然后采用脂质体介导法将重组质粒转染至奶山羊胎儿成纤维细胞(gFFs),经G418筛选获得具有稳定抗性的阳性gFFs细胞株。RT-PCR分析显示,在获得的阳性gFFs细胞株中能够扩增出689bp的orf2基因和1 953bp的neo表达框,与预期结果相符。Western blot分析显示,获得了约37 000的表达产物,且能够与兔抗PCV-2Cap蛋白抗体发生反应。结果表明,orf2基因成功整合到山羊胎儿成纤维细胞染色体上并能够正确表达,表达产物具有良好的反应原性,这为构建分泌Cap蛋白的奶山羊乳腺生物反应器奠定了理论和物质基础。

关键词： 猪圆环病毒 乳腺表达载体 转染 奶山羊 胎儿成纤维细胞

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金叶复叶槭容器育苗关键技术

王慧娟; 王利民; 李艳敏; 张和臣; 董晓宇; 符真珠; 蒋卉; 高杰; 《江苏农业科学 》 2017 北大核心

摘要：通过对育苗基质和容器类型等育苗关键技术的研究,筛选出金叶复叶槭(Acer negundo ‘Aurea’)最佳容器育苗方案。以金叶复叶槭组培移栽苗为试验材料,采用泥炭、珍珠岩、蛭石等不同配比的配方基质,测定其理化性质,选择控根容器、塑料营养钵、无纺布袋3种容器,进行完全随机试验,观察不同处理对容器苗生长及根系发育的影响。从3种基质配方理化特性的测定结果看出,三者均属于微酸性基质,pH值6.0~6.5;基质S2(草炭∶珍珠岩∶蛭石为5∶3∶2)的容重最小,为0.279 g/cm~3;而总孔隙度适中,为61.02%;饱和含水量最大,为47.372%。表明该基质配方既便于栽培及运输,又有较好的持水性和保水性,利于容器苗的栽培管理。对金叶复叶槭容器苗而言,S2基质中组培苗的株高、地径分别为150.56、14.6 mm,显著优于S1(草炭∶珍珠岩∶蛭石为1∶1∶1)基质,而在根系指标方面3种基质则没有显著差异,表明基质配方对金叶复叶槭组培苗的生长有一定的影响,对根系的生长发育没有明显的作用。在容器类型方面,控根容器、无纺布袋中植株的年生长量表现较好,二者无显著差异;根系及干质量方面,以控根容器中植株的侧根数量最多,达13.1条,根系活力最大,为57.98μg/(g·h),显著优于其他2种容器,营养钵、无纺布袋分别只有28.93、48.47μg/(g·h),并且根冠比最大,毛细根数量也较多,根系结构均衡,利于吸收营养和苗木移栽。试验筛选出金叶复叶槭容器栽培的最佳基质配方为S2,容器类型为控根容器。

关键词： 金叶复叶槭 容器育苗 基质配方 容器

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杜梨根系铁吸收关键基因生物信息学分析及缺铁胁迫对其表达的影响

郭献平; 吴中营; 王东升; 张四普; 牛佳佳; 《河南农业科学 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：为了探究缺铁胁迫对杜梨根系铁吸收关键基因表达的影响,对杜梨根系铁吸收关键基因三价铁还原酶(Pb FRO2)基因和铁转运蛋白(Pb IRT1)基因的氨基酸序列进行了多重序列比对和进化树分析;采用改良的Hoagland营养液水培杜梨的方法,研究了缺铁胁迫对杜梨根系Pb FRO2和Pb IRT1基因相对表达量以及根系铁和锌含量的影响。结果表明,Pb FRO2蛋白具有还原酶特性,Pb IRT1蛋白属于二价金属离子转运蛋白家族—ZIP家族;缺铁胁迫9 d内,杜梨根系Pb FRO2和Pb IRT1的表达量整体上呈现出先升高后降低的趋势,胁迫3 d表达量达到最高点且与对照(加FeEDTA)差异显著;缺铁胁迫30 d,杜梨根系中铁含量比对照降低77.46%,而锌含量提高1 139.40%。综上可知,缺铁胁迫可诱导杜梨根系铁吸收关键基因表达量升高,进而促进二价金属离子转运蛋白的活性提高。

关键词： 杜梨 缺铁胁迫 铁吸收 三价铁还原酶基因 铁转运蛋白基因

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不同成熟度玉米叶片光合生理对高温胁迫的响应特征及其基因型差异

于康珂; 孙宁宁; 齐红志; 詹静; 顾海靖; 刘刚; 潘利文; 刘天学; 《河南农业科学 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：为了探索玉米叶片光合生理对高温胁迫的响应特征,以郑单958(ZD958)和先玉335(XY335)为材料,从第9片叶展开期至抽雄期,每天8:30—17:30进行大田人工模拟增温试验,研究了不同成熟度玉米叶片的光合参数和Ru BP羧化酶、PEP羧化酶、蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性的变化。结果表明,高温胁迫下,叶片的SPAD值除了ZD958幼嫩叶片略高于对照(自然生长)外,其余处理均显著低于对照;净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)均显著下降,且成熟叶片的下降幅度高于幼嫩叶片;胞间CO_2浓度(Ci)增加,幼嫩叶片的增加幅度高于成熟叶片;成熟叶片和幼嫩叶片的PSⅡ最大光化学效率均下降,且幼嫩叶片的下降幅度达到显著水平。高温胁迫下,2个品种成熟叶片和XY335幼嫩叶片的Ru BP羧化酶和SPS活性显著降低,ZD958成熟叶片和2个品种幼嫩叶片的PEP羧化酶活性显著增加。可见,高温胁迫显著降低了玉米叶片的光合性能,且对成熟叶片的影响大于幼嫩叶片,对XY335的影响大于ZD958。

关键词： 玉米 高温胁迫 叶片 光合生理

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多时相GF-1卫星PMS影像提取农作物种植结构

李冰; 梁燕华; 李丹丹; 贺佳; 郭燕; 王来刚; 《中国农业资源与区划 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：[目的]及时准确获取农作物种植结构信息,对农作物种植结构调整具有重要意义。[方法]文章以多期GF-1卫星PMS影像为主要数据源,通过分层分类方法成功提取了朱仙镇一个种植年内秋播蔬菜、冬小麦、春花生、早熟西瓜、夏玉米、夏花生等农作物,并通过叠加分析得到朱仙镇的农作物种植模式。[结果]朱仙镇有10种种植模式,以一年两熟的冬小麦-夏玉米为主要倒茬模式,占比49.7%,其他9种种植模式所占比例之和接近50%;从整体景观的角度对朱仙镇的主要作物种植模式进行衡量,斑块丰富度PR达到9.0,香农多样性指数SHDI达到1.483 6,说明朱仙镇种植模式多样,有利于多元农业种植结构发展;分层分类的方法能够延续最优提取结果的精度,各类作物提取精度均达到了80%以上。[结论]PMS影像的高分辨率能够清晰的表达地块边界,一定程度上呈现了非大宗作物的空间分布,GF-1卫星PMS为多尺度的农业监测提供了更多的选择。

关键词： GF-1种植结构 遥感 多时相 层次分类 种植结构

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河南小麦供给侧结构性改革的思考与对策

张伟; 景丽; 上官彩霞; 孙建军; 《农业经济 》 2017 北大核心

摘要：发展优质小麦是河南省推进农业供给侧改革的首要任务,也是小麦供给侧改革的重点。本文在对河南省发展优质小麦的成效全面总结的基础上,从供给侧角度分析了优质小麦发展重点,比较了加工专用优质麦与质量安全优质麦的生产效益,在此基础上,提出了加快河南小麦供给侧改革应采取"两优提升、两区引领、两端推进、两力支撑"的战略对策。

关键词： 小麦 供给侧结构性改革 思考 对策

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苦参碱与3种化学杀菌剂混配对甘薯长喙壳的联合毒力及防效验证

张德胜; 王永江; 王爽; 田雨婷; 乔奇; 秦艳红; 白瑞英; 张振臣; 《农药 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：[目的]探索苦参碱在甘薯黑斑病防治中的应用。[方法]利用平皿法测定苦参碱与甲基硫菌灵、百菌清和异菌脲3种化学杀菌剂混配对甘薯长喙壳的联合毒力,通过制剂现混处理茎段的方法对增效配比进行防效验证。[结果]苦参碱可有效抑制甘薯长喙壳菌丝生长,EC50值为3.0790 mg/L。苦参碱与甲基硫菌灵混配质量比1∶2、苦参碱与百菌清混配质量比3∶1或1∶1以及苦参碱与异菌脲混配质量比1∶3时表现为增效作用。防效验证结果:苦参碱400 mg/L的防治效果为42.64%,苦参碱与百菌清制剂现混(1∶1)和(3∶1)400 mg/L的防治效果分别为78.25%、70.92%。[结论]苦参碱与百菌清联合使用对甘薯长喙壳的抑制作用优于苦参碱单独使用。

关键词： 甘薯长喙壳 杀菌剂 苦参碱 联合毒力 防治效果

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鸡3种主要DNA病毒多重感染复合PCR检测方法的建立

李学伍; 刘媛; 王丽; 邓瑞广; 赵东; 杨继飞; 柴书军; 《河南农业科学 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：依据Gen Bank中注册的鸡马立克氏病病毒(MDV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡痘病毒(FPV)基因组核苷酸序列中的保守序列设计引物,3种病毒各设计3对引物,共计9对引物,经生物学软件筛选后,得到3对相互匹配较佳的引物。3对匹配引物经单一PCR验证后,优化复合PCR反应条件,确定最佳的退火温度、引物浓度和Taq DNA聚合酶浓度;经特异性、敏感性试验及简化PCR试验,建立简易复合PCR检测方法。复合PCR扩增出的3条带大小与预期一致,即228 bp(MDV)、400 bp(ILTV)、499 bp(FPV);建立的复合PCR方法能同时检测出100 fg MDV、ILTV、FPV的DNA。同时依据PCR技术原理,将经典的三温热循环改进为二温热循环试验,即将退火和延伸合并为一步(62℃),缩短了反应时间。建立的3种病毒的复合PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,可以用于临床病料的快速诊断。

关键词： 马立克氏病病毒 传染性喉气管炎病毒 鸡痘病毒 DNA病毒 复合PCR

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基于表型和SSR分子标记构建芝麻核心种质

刘艳阳; 梅鸿献; 杜振伟; 武轲; 郑永战; 崔向华; 郑磊; 《中国农业科学 》 2017 北大核心 CSCD

摘要：【目的】便于管理、研究和利用芝麻种质资源,为芝麻育种提供优异基因资源。【方法】利用新收集和种质库保存的5 020份芝麻种质资源为基础,首先基于标准化的表型数据按地理来源分组后采用组内比例法聚类抽样构建初级核心种质,然后基于SSR分子标记应用位点优先取样策略逐步聚类,使用t检验检测每次聚类形成的核心种质与初级核心种质的Nei’s基因多样度(He)和Shannon-Wiener指数(I),直到核心种质的遗传多样性与初级核心种质开始有显著差异时,终止多次聚类取样,选择上一个与初级核心资源没有显著差异的核心种质作为最佳核心种质。利用Nei’s多样性指数、Shannon-Wiener多样性指数、多态条带百分率(PB,%)、多态条带保留率(PBR,%)、变异系数符合率(VR)、极差符合率(CR)、方差差异百分率(VD,%)、均值差异百分率(MD,%)等参数进行核心种质代表性检验和评价。【结果】构建了含有816份资源的初级核心种质和含有501份资源的核心种质,分别占全部种质资源的16.25%和9.98%;核心种质包括国内资源442份,国外资源59份;Nei's基因多样度(0.2789)和Shannon-Wiener指数(0.4243)在P<0.05概率条件下与初级核心资源(He=0.2791,I=0.4302)无显著性差异,多态条带百分率(PB,%)、多态条带保留率(PBR,%)、变异系数符合率(VR)、极差符合率(CR)分别为91.25%、95.23%、99.14%、86.85%。方差差异百分率(VD,%)和均值差异百分率(MD,%)均为0。t测验结果表明,核心种质的遗传多样性指数与原始种质差异不显著。位点优先取样策略构建的核心种质比对照随机取样策略丢失的多态性位点数少,且同一遗传距离下位点优先取样策略构建的核心种质具有更高的遗传多样性,更能构建一个具有代表性的核心种质,Shannon-Wiener多样性指数比Nei’s多样性指数检测效率高。【结论】基于地理来源分组,组内按表型数据聚类按比例法抽样构建芝麻初级核心种质,再结合SSR分子标记数据,采用SM相似系数进行UPGMA逐步聚类是构建芝麻核心种质较适宜的方法,所构建的核心种质较好地代表了基础种质的遗传多样性。

关键词： 芝麻 种质资源 核心种质 代表性检验

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豫西山区大白菜育苗春栽高效杂交制种技术

王志勇; 姚秋菊; 张晓伟; 赵艳艳; 原玉香; 魏小春; 张强; 蒋武生; 《中国蔬菜 》 2017 北大核心

摘要：豫西山区利用育苗春栽进行大白菜杂交制种,平均每667 m2种子产量达100 kg,效益达4 000元。近几年,我国大白菜每年种植面积稳定在200万hm2(3 000万亩)左右,按照每667 m2用种量150 g计算,种子年需求量约450万kg。随着大白菜杂交制种技术的进步,豫西山区从以南阳地区露地越冬为主的制种方式,逐渐发展到济源等西部山区的育苗春栽杂交制种方式。济源等西部山区属暖

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