科研产出
猪流行性腹泻病毒荧光RT-RAA检测方法的建立及初步应用
《福建农业学报 》 2024 CSCD
摘要：【目的】建立一种快捷、灵敏、简便检测猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）的RT-RAA检测方法，以提高猪流行性腹泻病毒临床检测效率。【方法】针对PEDV S基因片段保守区设计引物和探针，构建标准质粒PEDV-S，通过特异性、敏感性、重复性测定及条件优化，建立检测PEDV重组酶介导链置换核酸扩增荧光法（RT-RAA）。【结果】在42℃恒温作用20 min的条件下，建立的检测方法对检测猪传染性胃肠炎病毒（porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV）、猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）、伪狂犬病病毒（porcine pseudorabies virus,PRV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）和猪轮状病毒（porcine rotavirus,PoRV）等猪源病毒均为阴性，猪流行性腹泻病毒（PEDV）为阳性；最低检出限为4.43×10～2拷贝·μL-1的标准质粒；重复性结果显示，相同浓度标准质粒的差异性很小；利用建立的RT-RAA方法检测40份猪病毒样本，阳性率为7.5%（3/40），与实时荧光定量PCR检测结果相同。【结论】本研究建立的PEDV RT-RAA检测方法具有快速简便、耗时短、特异性高、灵敏度强和重复性好等特点，适用于对PEDV的快速诊断。
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低甲烷排放转基因水稻对土壤微生物群落的影响
《生态学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：低甲烷排放转基因水稻是实现水稻低碳生产的理想材料.土壤微生物驱动了稻田甲烷的产生,低甲烷排放转基因水稻土壤微生物群落组成的变化不仅影响稻田甲烷排放,也关系到土壤微生态系统的稳定性.通过对细菌16S rRNA基因、真菌ITS基因的高通量测序及mcrA、nifH、amoA和nirS等功能基因的荧光定量PCR,分析了低甲烷排放转基因水稻(86R27-3)与野生型水稻(MH86)土壤微生物群落间的差异.结果显示:稻田土壤细菌群落的α-多样性指数在86R27-3与MH86间无明显差异,且仅在水稻分蘖期86R27-3的土壤真菌群落多样性指数Shannon、Simpson及均匀度指数Pielou_e显著高于MH86(P<0.05);β-多样性分析表明土壤细菌或真菌群落组成在86R27-3与MH86间均没有显著差异;但在水稻齐穗期:86R27-3 土壤的放线菌门(Actinobacteria)、罗泽真菌门(Rozellomycota)的相对丰度显著高于MH86(P<0.05),而酸杆菌门(Acidibacteria)、子囊菌门(Ascomycota)的相对丰度显著低于MH86(P<0.05);土壤微生物群落功能预测显示,86R27-3 土壤氮、硫和锰代谢细菌功能群丰度显著低于MH86(P<0.05),如分蘖期的土壤硝酸盐还原、硝酸盐呼吸、硫代硫酸盐呼吸及硫呼吸,齐穗期和成熟期的好氧亚硝酸盐氧化及成熟期的锰氧化等;与MH86相比,86R27-3的土壤真菌功能群丰度有减有增,如在水稻不同生育期内的其未定义腐生物银耳目、嗜热囊菌科、镰刀菌属及韦斯特氏菌功能群丰度显著降低(P<0.05),而其分蘖期的动物内共生体腐生生物毕赤酵母属和未定义腐生物马勃科功能群丰度显著提高(P<0.05).定量PCR分析表明86R27-3 土壤中的产甲烷细菌mcrA基因丰度显著低于MH86(P<0.05),同时,土壤固氮菌nifH基因、氨氧化细菌amoA基因及反硝化细菌nirS基因的丰度在86R27-3土壤中也显著降低(P<0.05).综上所述,低甲烷排放转基因水稻(86R27-3)对土壤细菌或真菌的群落组成没有影响,但可引起主要细菌或真菌种类的相对丰度及某些细菌或真菌功能群丰度发生变化,并显著降低了稻田土壤微生物功能基因丰度.
关键词： 低甲烷排放转基因水稻 微生物群落 功能基因 高通量测序
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密度与播量配置对鲜食大豆光合特性和产量的影响
《大豆科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探索福建省鲜食大豆种植适宜密度与播量，采用双因素裂区试验设计，分别设4个密度水平和4个播量水平，研究不同密度和播量配置对鲜食大豆光合特性和产量的影响。结果表明：随着播量的增加，净光合速率（Pn）为上升趋势，胞间CO2浓度（Ci）为下降趋势；蒸腾速率（Tr）、叶绿素相对含量（SPAD值）及除种植18万和21万株·hm-2处理外的气孔导度（Gs）、胞间CO2浓度与大气CO2浓度（Ca）比（Ci/Ca）呈先升后降趋势，蒸气压亏缺（VPD）呈先降后升趋势。同一播量下，随着密度的增大，Tr和Ci呈上升趋势。相同密度条件下随着播量增加，株高和底荚高度为上升趋势，而主茎节数表现为下降趋势，有效荚数呈逐渐下降趋势，除12万和15万株·hm-2处理外产量均呈先升后降趋势。18万株·hm-2和每穴2株组合鲜荚产量最佳，达11 290.32 kg·hm-2,比12万、15万和21万株·hm-2分别增产0.45%、5.71%和14.15%。综上所述，在福建省鲜食大豆种植以密度为18万株·hm-2和每穴2株的栽培模式最佳。
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小菜蛾UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶基因的克隆、表达及功能研究
《生物安全学报(中英文) 》 2024 CSCD
摘要：【目的】克隆小菜蛾几丁质合成酶基因Px UAP并阐明其功能。【方法】基于小菜蛾基因组信息，利用RT-PCR克隆小菜蛾Px UAP基因的c DNA序列，并应用荧光定量PCR和RNA干扰技术分析该基因的表达模式及功能。【结果】Px UAP (Gen Bank登录号:OR659549)开放阅读框长度为1467 bp，预测编码488个氨基酸，蛋白分子质量为54.985 ku，理论等电点为6.12;与金凤蝶UAP (KPJ20218.1)同源蛋白亲缘关系较近，氨基酸同源性为80.33%。发育表达谱结果表明，Px UAP在小菜蛾各个发育阶段均有表达，在雄成虫期的表达量最高;组织表达谱结果表明，Px UAP在雌成虫足和翅膀的表达量最高。RNAi结果表明，与注射ds GFP对照组相比，注射ds Px UAP显著降低了靶标基因和几丁质合成酶Px CHSA基因的表达量，且Px CHSB基因在24和48 h的表达量也显著下降;注射ds Px UAP的小菜蛾大部分无法化蛹，蛹壳出现皱缩等畸形现象，并在注射后168 h全部死亡。【结论】Px UAP是小菜蛾几丁质合成酶通路中的关键调控基因，对小菜蛾生长发育起至关重要的作用。
关键词： 小菜蛾 RNA干扰 几丁质 UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶 表达谱
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红曲糟抗热肽的制备及其对酿酒酵母热激氧化耐受性的影响
《食品科学 》 2024 EI 北大核心 CSCD
摘要：制备红曲糟抗热肽,研究其对酿酒酵母抵御热激氧化行为的影响.以酿酒酵母热激存活率为指标,筛选蛋白酶,通过抗热肽得率优化酶解条件,对抗热肽进行质谱和抗氧化能力分析,通过磷酸戊糖通路基因表达、胞内辅酶、谷胱甘肽(glutathione,GSH)以及活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)含量分析,从抗氧化角度探索抗热肽对酿酒酵母的热保护作用.结果表明,红曲糟抗热肽最佳酶解工艺为:红曲糟蛋白和水固液比1∶10(m/m)、复合蛋白酶酶解、温度50 ℃、时间3h、加酶量3 000 U/g、pH 8.5,该条件下抗热肽得率62.44%,酿酒酵母热激存活率73.97%,较纯水组提高了22.76%.序列鉴定表明,丰度前20的肽段中16条肽段的疏水氨基酸占比50%以上.抗热肽1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基半数清除量为4.53 mg/mL,2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基半数清除量为1.82 mg/mL,具有抗氧化活性.同时,抗热肽通过上调磷酸戊糖途径的基因表达量,提升NADH激酶活性,促进还原型辅酶Ⅱ的转化,使GSH含量提高4.74倍,胞内ROS水平与热激前酿酒酵母基本保持一致,从而有效提高了酿酒酵母抵御热激氧化胁迫的能力.
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甘薯化肥减量增效结合土壤酸化治理的施肥技术
《福建农业学报 》 2024 CSCD
摘要：【目的】探讨甘薯最佳施肥管理技术，提高甘薯施肥效益，治理土壤酸化现象。【方法】在福建省甘薯主产区开展系列田间试验的基础上，确定有机肥替代化肥的最佳比例和农用氢氧化镁、牡蛎壳粉调理剂的最佳用量，探讨其化肥减量增效和改酸的应用效果，总结提出有机-无机结合土壤酸化调理剂的施肥技术。【结果】有机肥替代化肥比例的试验结果表明，在福建省现有土壤肥力条件下有机肥替代25%化肥相较于其他替代比例，薯块产量最高，净增收达13.5%。进一步田间试验表明，有机肥替代25%化肥的施肥措施在全省不同肥力等级田块上均具有普遍的增产效果，高产田、中产田和低产田甘薯分别增产4.1%、7.2%和18.5%；相较于高产田，中、低产田增产效果更加明显，表明有机肥还可以改良培肥中、低产田，进一步提高土壤生产潜力。土壤酸化调理剂最佳用量试验结果显示，在推荐施肥的基础上添加300 kg·hm-2的农用氢氧化镁或者1 500 kg·hm-2的牡蛎壳粉的增产和改酸效果较好。化肥减量和酸化治理技术的田间试验显示，有机肥替代25%化肥配施300 kg·hm-2农用氢氧化镁调理剂的施肥措施相较于习惯施肥，甘薯产量显著提高4 641.7 kg·hm-2，土壤pH提高0.49个pH单位。【结论】在推荐施肥基础上，有机肥替代25%化肥配施300 kg·hm-2农用氢氧化镁或者1 500 kg·hm-2牡蛎壳粉是甘薯减肥增效和土壤酸化治理的最佳施肥技术。
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1株血清2型鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定、致病性研究及灭活疫苗制备
《中国畜牧兽医 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]本研究拟对从1例死亡雏鸭体内分离获得的鸭疫里默氏杆菌进行生物学特性和疫苗效果分析,旨在为鸭传染性浆膜炎的防治提供指导.[方法]采集送检雏鸭的脑、心脏和肝脏组织进行细菌分离培养,通过菌落形态观察、革兰染色镜检、16S rDNA PCR扩增测序鉴定菌株并分析其遗传进化关系;采用玻片凝集法鉴定菌株血清型,检测菌株对常见抗菌药物的敏感性及致病性;利用分离株制备灭活疫苗,测定其免疫保护效果.[结果]分离株在血平板上呈半透明、露滴状圆形小菌落,革兰染色可见多个丝状排列的阴性短杆菌,瑞氏染色可见两级浓染的短小杆菌.16S rDNA测序结果显示,分离株与鸭疫里默氏杆菌参考株CZ-RA03处于同一分支,相似性>99.9%.血清型鉴定结果显示,分离株为鸭疫里默氏杆菌血清2型.药敏试验结果显示,分离株对氧氟沙星、链霉素、卡那霉素等药物耐药,对氟苯尼考、四环素、多西环素等药物敏感.致病性试验结果显示,分离株对7日龄雏鸭的半数致死量(LD50)为1.51×107 CFU,雏鸭感染后肾脏载菌量最高,为2.15×106 CFU/g.利用分离株制备油乳剂灭活疫苗免疫7日龄雏鸭,其免疫攻毒后存活率为86.67%.[结论]本研究从发病雏鸭中分离鉴定出1株具有较高致病性的血清2型鸭疫里默氏杆菌,以该菌制备的油乳剂灭活疫苗具有良好的免疫保护效果.研究结果为鸭传染性浆膜炎的防治提供了理论基础.
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金线莲新品种'圆叶翠莲'
《园艺学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：‘圆叶翠莲’是从福建省建瓯市野生金线莲种质资源群体经系统选育而成的金线莲新品种。匍匐根状茎,直立茎肉质;叶面绿色或墨绿色具金黄色或黄色绢丝光泽网脉。组培苗栽培180d平均单株质量2.08 g,栽培320 d平均3.54 g,产量较高,品质好。栽培180 d的干品含总黄酮(以水仙苷计)0.52%、金线莲苷16.9%、水仙苷0.219%。较抗炭疽病,适宜福建省海拔400～1000 m林下种植。
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福建地区猕猴桃细菌性溃疡病菌的生物学特征及其杀菌剂筛选
《福建农业学报 》 2024 CSCD
摘要：【目的】由丁香假单胞猕猴桃致病变种（Pseudomonas syringae pv. actinidiae, Psa）侵染引起的猕猴桃细菌性溃疡病是危害猕猴桃生产最重要的病害，明确福建地区Psa生物学特征，筛选防治病害的有效杀菌剂，为该病害的科学防治提供依据。【方法】采用平板菌落测定法和叶片针刺接种法分别研究病菌在不同培养条件下的生长量和致病力，采用叶面喷药法研究9种杀菌剂（商品推荐浓度）对病害的防治效果。【结果】Psa菌株培养48～72 h，菌量处于相对稳定的增长期，菌株生长最适温度为25℃，最适培养基为LBA、NA培养基，用于病菌接种培养的最适培养基为LBA培养基，病菌70℃处理10 min后，不能存活。猕猴桃和番茄叶片接种结果显示不同菌株的致病力均存在差异，大多数菌株表现强致病力。此外，有5种杀菌剂对病害表现出较好的预防或治疗效果，60亿芽孢·mL-1解淀粉芽孢杆菌水剂200倍液+3%中生菌素水剂1 000倍液、52%甲硫·中生可湿性粉剂1000倍液、10%春雷霉素可湿性粉剂500倍液、3%中生菌素水剂1000倍液和18%松酯酸铜乳油500倍液对病害的预防效果分别为82.99%、79.45%、64.92%、58.39%和43.97%，治疗效果分别为76.33%、65.08%、85.80%、52.65%和74.85%，各杀菌剂处理对猕猴桃叶片安全。【结论】明确了福建Psa的生物学特征，筛选出60亿芽孢·mL-1解淀粉芽孢杆菌水剂+3%中生菌素水剂、52%甲硫·中生可湿性粉剂、10%春雷霉素可湿性粉剂等对病害表现出较好防治效果的杀菌剂，防效介于64.92%～85.80%。
关键词： 猕猴桃细菌性溃疡病 猕猴桃细菌性溃疡病菌 生物学特征 致病力 杀菌剂
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不同生境白牡丹茶叶香气特征分析及产地判别
《中国农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】基于香气特征探究小区域白牡丹茶叶产地判别技术，为茶叶原产地溯源及品牌建设提供理论参考。【方法】通过顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术分析产自政和县、松溪县和福安市的白牡丹茶叶香气组成及含量，结合数理统计学方法，筛选特征性化合物，构建白牡丹茶叶产地判别模型。【结果】白牡丹茶叶香气物质包括醛类（24个）、酮类（23个）、醇类（22个）、酯类（14个）、酸类（8个）和其他类（烷、烯、喃、醚、酐、酚、胺、萘等）。白牡丹茶叶香气平均含量为（3 487.93±1 014.04）μg·kg-1，其中政和县样品中香气含量极显著高于松溪县和福安市样品（P<0.01），松溪县和福安市样品的平均总含量无显著性差异（P>0.05）。3个产地白牡丹茶叶含量均以醇类最高，酸类最低，而且3个产地白牡丹茶叶中醇类和酸类的总含量均无显著性差异，政和县样品中酮类、醛类和酯类的总含量分别极显著高于福安市和松溪县样品（P<0.01），但福安市和松溪县样品中酮类、醛类和酯类含量均无显著性差异（P>0.05）；正己醇、1-辛烯-3-醇和苯甲醇等58个香气物质含量在不同产地间存在显著或极显著差异。PLS-DA和OPLS-DA模型均未出现过拟合，模型验证效果较好，2个模型的预测指数分别为0.732和0.728，判别准确率分别为98.89%和96.67%、VIP值≥1的特征性香气物质分别有38个和46个。逐步判别分析模型稳定且可信，其筛选出的特征香气物质有20个，初始和交叉验证的判别准确率均为100.00%。联合OPLS-DA、PLS-DA和逐步判别分析方法筛选出政和县样品中主要特征香气物质为乙基吡咯2-甲醛、香叶醛、8-十一烯醛、苯甲醇、2,6-二甲基环己醇、甲基庚烯酮、反式-3-壬烯-2-酮、环癸酮、壬酸乙酯、乙酸苄酯；松溪县样品中主要特征香气物质为β-紫罗酮；福安市样品中主要特征香气物质为庚醛、正己醇、橙花醇、3-壬烯-5-酮、壬酸乙酯、乙酸香叶酯。【结论】建立了基于香气特征的小区域白牡丹茶叶产地判别技术，其中以逐步判别分析技术最佳。
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