科研产出
猪肺炎支原体通过抑制SPLUNC1功能破坏呼吸道炎性反应平衡
《中国农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【背景】猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp）通过定植猪呼吸道黏膜层，破坏呼吸道炎性反应平衡，引起炎性损伤和持续性感染。短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白（short palate lung and nasal epithelial clone1,SPLUNC1）是呼吸道黏膜分泌的具有重要抗菌和抗炎功能的蛋白，被认为是呼吸道黏膜面对危险信号时的“信号传感器”。【目的】从Mhp和SPLUNC1相互作用入手，分析Mhp感染对SPLUNC1表达的影响以及SPLUNC1对Mhp引起的炎性反应的调控作用，揭示Mhp引起炎性损伤的新机制，为解决Mhp持续性感染问题提供参考。【方法】利用猪肺炎支原体对猪支气管上皮细胞（porcine bronchial epithelial cells,PBECs）感染模型和猪体感染模型，通过荧光定量PCR、间接免疫荧光和Western-blotting等方法，分别检测Mhp感染后对肺脏中SPLUNC1以及体外PBECs中SPLUNC1转录和表达的影响。克隆并扩增猪源SPLUNC1基因通过酶切鉴定，构建成功SPLUNC1真核和原核表达重组质粒pCDNA3.1-SPLUNC1以及pET28a-SPLUNC1。与此同时，设计靶向SPLUNC1的siRNA干扰片段。利用体外SPLUNC1蛋白孵育、体内呼吸道黏膜SPLUNC1抗体封闭，通过Mhp CCU50检测明确SPLUNC1对Mhp体内外生长的影响。在猪支气管上皮细胞中，通过过表达或siRNA干扰SPLUNC1基因，后感染Mhp，利用Western-blotting、间接免疫荧光以及酶联免疫吸附方法，明确SPLUNC1对Mhp的黏附作用、诱导炎性因子表达以及MAPK信号通路活化的影响。【结果】Mhp感染猪后可引起肺脏实变，主要组织病理表现为肺脏炎性损伤，同时显著上调肺泡灌洗液中趋化因子CXCL8和炎性因子TNFα和IL-1β分泌。Mhp体内外感染后，体内肺脏和体外猪支气管上皮细胞中SPLUNC1的转录和表达均显著下调。以上研究表明，Mhp可诱导肺脏炎性反应，抑制SPLUNC1表达。另一方面，体外PBECs中过表达SPLUNC1后，Mhp感染引起的CXCL8表达显著减少；siRNA干扰SPLUNC1后，Mhp感染引起的CXCL8表达显著增加，表明SPLUNC1负调控Mhp感染引起的CXCL8表达。基于Mhp感染入侵呼吸道过程，本研究进一步解析SPLUNC1负调控CXCL8表达的机制。结果表明：无论是SPLUNC1和Mhp体外孵育，还是SPLUNC1抗体体内封闭，Mhp的体内外生长均未受影响；SPLUNC1的过表达或siRNA干扰对Mhp体外黏附PBECs的能力也无显著影响；过表达SPLUNC1可抑制pERK和IκBα的激活，相反SPLUNC1 siRNA干扰后，可促进pERK和IκBα的激活。以上研究证明SPLUNC1不是通过调控Mhp的生长和黏附，而是通过负调控MAPK-ERK通路的活化来调控CXCL8的表达。【结论】SPLUNC1可通过MAPK-ERK信号通路来调控炎性因子的过度表达，维护宿主炎性平衡；与此同时，Mhp感染后可通过抑制SPLUNC1的表达来破坏宿主炎性反应的平衡调控，进而引起炎性损伤。本研究为解析Mhp感染损伤机制提供依据。
关键词： 猪肺炎支原体 支原体-宿主相互作用 炎性反应 SPLUNC1
全文链接
请求原文
基于PMMS-Net和叶绿素荧光成像的绿豆叶斑病抗性鉴定方法
《中国农机化学报 》 2024 北大核心
摘要：考虑到相近发病指数的绿豆叶片病斑区域特征区分不明显，在检测类似大小的病斑时，使用固定尺度的卷积核检测效果不是很好，故设计一种并行多分支多尺度卷积神经网络（PMMS-Net）模型。该模型先使用并行多分支多尺度特征融合模块获取丰富的病斑特征；然后采用坐标注意力机制，使模型能更好地定位到病变区域，实现对感兴趣区域的选择性强调；最后使用特征充分提取模块，将深度可分离卷积与普通卷积结合，实现对特征的充分提取，进一步优化特征提取效果。试验数据集由绿豆叶斑病的叶绿素荧光图像构成，其中包含五种抗性类型的绿豆叶斑病图像。结果表明，本文提出的方法在试验数据集上训练迭代1 000次，所耗费时间仅比AlexNet多0.8倍，验证准确率却比AlexNet高出18.9%，本模型在该数据集上的验证准确率为87.8%，平均特异度为96.92%，参数内存仅为0.54 MB。本文提出的方法有利于将该模型部署在移动终端等资源受限的嵌入式设备上，为绿豆叶斑病的抗性鉴定提供一种新方法。
关键词： 绿豆叶斑病 抗性鉴定 叶绿素荧光图像 坐标注意力机制 深度可分离卷积
全文链接
请求原文
洋葱转录组测序及黄酮类化合物合成相关基因的分析
《分子植物育种 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：洋葱是世界范围内种植的重要蔬菜作物，其鳞茎颜色是洋葱选育和食用的重要性状。本研究对紫皮洋葱和黄皮洋葱进行高通量转录组测序，挖掘黄酮类化合物合成的基因，探讨不同皮色形成的分子基础。本研究共获得5 809个差异表达基因，包括2 991个上调表达基因，2 818个下调表达基因。差异基因GO功能富集分析显示，差异基因主要参与细胞组分、生物过程和分子功能3大类。KEGG显著富集分析显示，差异表达基因主要富集在3条代谢途径上。黄酮类化合物合成相关的通路有类黄酮合成途径、花青素合成途径、异黄酮合成途径、黄酮和黄酮醇合成途径，并筛选出了F3’H、FLS、CHI和DFR等黄酮类合成相关的结构基因。本研究为进一步探讨洋葱皮色相关的代谢合成途径关键酶的功能及其调控机制提供了基础。
全文链接
请求原文
绿色草莓再生体系的建立
《江苏农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：建立高效、稳定的绿色草莓再生体系是构建其遗传转化体系的基础.本研究以绿色草莓匍匐茎茎尖为外植体,置于不同培养基中进行初代培养获得试管苗.在含有不同配比植物生长调节剂的培养基中对叶龄为 30d的试管苗叶盘进行脱分化处理.以叶盘诱导产生的愈伤组织为试验材料,探究不同植物生长调节剂对愈伤组织产生不定芽的影响.结果表明,最适用于绿色草莓初代培养的培养基是MS+0.2 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.2 mg/L赤霉素(GA3),在此培养基中绿色草莓离体茎尖成活率最高,生长状况最好;诱导叶盘脱分化、愈伤组织再分化和诱导不定芽生根的适宜培养基分别是MS+1.5 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+2.0 mg/L 噻苯隆(TDZ)、1/2 MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L吲哚丁酸(IBA)和1/2 MS+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/L吲哚乙酸(IAA),其出愈率、再分化率和生根率分别为100%、91.0%、100%.本研究建立了以绿色草莓匍匐茎茎尖为试验材料获得试管苗的组织快繁体系和以叶盘为外植体经脱分化、愈伤组织再分化2个阶段的再生体系,为建立其遗传转化体系奠定了技术基础.
全文链接
请求原文
导入巴克夏血统苏紫猪生长曲线拟合研究
《中国畜牧杂志 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了解导入巴克夏血统后苏紫猪（后称苏紫猪）的生长发育规律，从而提高苏紫猪的生长性能和饲养管理水平，本研究选取62头苏紫猪进行体重监测，并对产生的40 700条有效数据进行生长性能分析。利用3种非线性模型（Gompertz、Logistic和Bertalanffy）对苏紫猪进行生长曲线拟合分析。结果发现：在100日龄之前公猪和母猪群体的体重差异不显著，100日龄以后公猪的体重显著大于母猪，且差距逐渐变大，在160日龄后差异极显著；Gompertz模型对苏紫猪的拟合效果均优于Bertalanffy和Logistic模型；在Gompertz模型下，苏紫猪公猪和母猪的拐点日龄及拐点体重分别是140.36 d、80.41 kg和123.3 d、56.61 kg。本研究结果表明运用Gompertz模型可预测苏紫猪的生长拐点，为其精准饲养和选育提供参考依据。
全文链接
请求原文
玉米赤霉烯酮毒素生物降解酶研究进展
《核农学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：玉米赤霉烯酮（ZEN）及其衍生物是由镰刀菌产生的具有类雌激素效应及细胞毒性的次级代谢产物，广泛存在于受镰刀菌侵染的谷物及其制品中。ZEN不仅影响粮食的品质和产量，也会对人畜生命健康造成威胁。ZEN脱毒方法主要包括物理法、化学法和生物法。生物法特别是生物酶法因反应条件温和、特异性好、脱毒效率高、环保、便捷等优势而具有较高的应用价值。本研究对近年来报道的ZEN降解酶的挖掘、鉴定及其实际应用等方面进行了综述，旨在为ZEN的生物酶法脱毒研究提供参考。
全文链接
请求原文
土壤修复剂对淋洗尾土土壤功能修复的研究
《江西农业学报 》 2024
摘要：为了研究土壤修复剂对淋洗尾土土壤功能的恢复效果,通过盆栽试验,分析了在添加土壤修复剂后淋洗尾土中种植甜高粱的生长状况,以及土壤pH值、EC值、容重、持水孔隙度、有机质含量、微生物群落结构、多样性等指标的变化.结果表明:与淋洗尾土处理相比,添加土壤修复剂后土壤的pH值、容重下降,EC值、持水孔隙度、有机质含量则增加,土壤微生物多样性增加,其中以添加5%土壤修复剂后甜高粱的生长状况最好,土壤微生物多样性相对较好.综合来看,添加5%土壤修复剂能够恢复淋洗尾土的土壤功能,促进了甜高粱的生长,能满足甜高粱苗期生长的需求.
全文链接
请求原文
