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重组鸭瘟病毒载体中筛选高效表达鸭坦布苏病毒E蛋白启动子

中国农业科学 2020 北大核心 CSCD

摘要:[背景]鸭瘟和鸭坦布苏病毒是鸭的两种重要传染病,鸭瘟属于疱疹病毒科,具有开发成病毒载体的优势.为了优化鸭坦布苏病毒E基因在重组鸭瘟病毒载体中的表达,之前探讨了不同形式鸭坦布苏病毒E蛋白在重组鸭瘟病毒载体中的表达,发现以鸭为宿主进行密码子优化的E基因C端截短形式(E451-dk,简称为Es)表达量最高.[目的]探讨不同启动子对Es在重组鸭瘟病毒载体中表达的影响,为鸭瘟病毒—坦布苏病毒二联苗的研制奠定基础.[方法]将pCAG、pSV40、pRSV、p1.8k(MDV)和pgB(MDV)启动子通过常规基因克隆的方法替换转移载体pEP-BGH-Es中的pCMV启动子,构建不同启动子调控Es表达的重组表达框pro-Es-BGH-pA.在鸭瘟病毒(DEV)疫苗株细菌人工染色体克隆pDEV-EF1的基础上,将5个重组表达框分别通过"Red E/T两步重组"克隆至pDEV-EF1突变体的US7和US8基因之间,构建了携带不同启动子调控的Es突变体克隆pDEV-pro-Es.用磷酸钙法转染鸡胚成纤维细胞(CEFs)拯救获得相应重组病毒rDEV-pro-Es,并对重组病毒感染细胞蚀斑大小和Es蛋白表达情况进行测定.[结果]将重组突变体克隆转染细胞拯救获得了5株重组病毒rDEV-pro-Es.Western blotting分析表明外源蛋白Es在pRSV调控下表达量最高,其表达量较rDEV-Es提高了169.12%.[结论]完成了Es在重组鸭瘟病毒载体中高效表达启动子的筛选,获得了一种调控Es高效表达的启动子pRSV.同时也获得了一株高效表达鸭坦布苏病毒外源基因Es的重组鸭瘟病毒rDEV-pRSV-Es.

关键词: 鸭瘟病毒 鸭坦布苏病毒 E蛋白 细菌人工染色体 病毒载体 启动子

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有机肥施用对蔬菜及其土壤环境中重金属含量的影响及健康风险评估

浙江农业科学 2020

摘要:为探究有机肥施用对蔬菜及其土壤环境中重金属的影响,采集龙泉市蔬菜及其对应土壤样品共68批次,测定蔬菜及其土壤样品中6种重金属(Cr、Ni、Cu、Zn、Cd和Pb)的分布状况,并通过污染指数评价方法和膳食暴露风险健康评估,分析蔬菜及其土壤中重金属污染状况以及摄入人群的重金属膳食暴露风险.结果表明,极少数土壤样品中重金属铅、镉和锌含量超出农用地土壤污染风险筛选值,但龙泉地区的蔬菜对儿童、中年人和老年人的膳食暴露风险均低于1.0,表明该地区的蔬菜不会对人体健康产生危害,且并无证据表明部分受污染土壤中超标重金属来自有机肥料的使用.

关键词: 有机肥 蔬菜 重金属 污染指数 风险评估

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新时代以组织振兴助推乡村振兴的谢家路模式

浙江农业科学 2020

摘要:组织振兴是"五个振兴"的重要组成部分,治理有效是乡村振兴的组织基础,党的建设是乡村振兴的政治保障.通过深入分析和全面阐述谢家路村以党建引领组织振兴的典型做法,总结了该村在推动乡村组织振兴中形成的可复制推广的创新经验与模式.

关键词: 乡村振兴 组织振兴 谢家路模式

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甘蓝类蔬菜品种(系)苗期根肿病抗性鉴定

植物保护 2020 北大核心 CSCD

摘要:芸薹根肿菌侵染引起的根肿病是影响甘蓝类蔬菜产量和品质的主要病害之一,抗病品种的培育是防治根肿病最经济有效的方法.本研究以根肿菌4号生理小种为菌源,对花椰菜、结球甘蓝、青花菜、芥蓝和苤蓝6个甘蓝变种共306份品种(系)进行苗期根肿病抗性鉴定,结果显示,甘蓝类抗根肿病材料缺乏,仅在青花菜中发现1份高抗(HR)材料,感病(S)和高感(HS)材料比例占65%以上,中抗(MR)材料在松花菜和结球甘蓝中所占比例均在30%以上.对抗病比例和平均病情指数2个指标的联合评价结果显示,结球甘蓝整体抗性水平高于其他变种,芥蓝和苤蓝抗性最差.另外,对结球甘蓝'先甘336'(R)*甘蓝/青花菜杂交后代及花椰菜'托尼'(MR)*青花菜的杂交后代进行苗期根肿病抗性鉴定,结果表明,杂交后代相对于父本病情指数都有所降低,抗性相对提高,且父本病情指数越低,后代表现较高抗性的概率越大.鉴于此,在今后抗病组合的选择与选配过程中,父本和母本最好都具有较高的抗性.本研究将为甘蓝类蔬菜抗根肿病品种培育提供材料支撑和技术参考.

关键词: 甘蓝 根肿病 抗性 苗期 鉴定

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外源增钾缓解铵胁迫下小麦根系受抑

浙江农业学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:分别对硝态氮(NO3--N)和铵态氮(NH4+-N)培养下的小麦幼苗进行不同水平的钾处理(低钾,1 mmol·L-1;正常,3 mmol·L-1;高钾,6 mmol·L-1),探究外源供钾对缓解铵胁迫下小麦根系生长受抑的效果与作用机理.结果表明,NH4+-N条件下,小麦叶片和根系中的NH4+含量较NO3--N条件下显著(P<0.05)增加,根系生长受到抑制,与NO3--N条件下的植株相比,NH4+-N条件下相同钾水平的小麦幼苗总根长、根表面积、根体积均显著(P<0.05)减少.随着施钾水平的升高,根系受抑制的情况得到缓解.NH4+-N条件下,随着施钾水平的升高,小麦幼苗的叶面积、气孔导度、净光合速率显著(P<0.05)升高,叶和根中的可溶性糖含量显著(P<0.05)升高,叶中蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性亦显著(P<0.05)增强,根中生长素(IAA)含量及其与细胞分裂素(CTK)的比值升高.据此推断,在铵胁迫下,增钾处理增强了小麦的光合作用,提高了碳水化合物的合成能力,可为NH4+的同化提供更多的碳架,从而降低体内NH4+的积累;同时,促进了根中植物激素的平衡,最终得以缓解铵胁迫下小麦根系生长受到的抑制.

关键词: 小麦 铵胁迫 植物激素 碳转运

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响应面法优化猴头菇多酚提取工艺

浙江农业科学 2020

摘要:为确定猴头菇多酚提取的最佳工艺参数,选择乙醇浓度、提取温度、料液比三个影响因素,通过Box-Behnken法设计3因素3水平试验,以猴头菇多酚得率为指标确定最佳工艺参数.结果表明,最佳提取工艺条件为乙醇浓度60%,温度55℃,料液比1∶15 (g∶mL),在此条件下,验证试验显示,猴头菇多酚得率为16.701 mg·g-1,与预测值接近,说明响应曲面法建立的模型准确可靠,能合理优化猴头菇多酚的提取工艺.

关键词: 猴头菇 酚类物质 提取工艺 响应面分析法

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菜心BcFLC1的SNP变异与选择性剪接

分子植物育种 2020 北大核心 CSCD

摘要:为探讨菜心极易抽薹开花的分子机制,本研究以早熟类型的'四九菜心'为研究材料,参考大白菜基因组分析了菜心开花抑制基因BcFLC1的转录组SNP情况,鉴定了3个纯合SNP位点.其中一个SNP定位在6号内含子(I6)的剪接供体位点“GT”上,在菜心中突变为“AT”.研究发现菜心BcFLC1剪接位点变异导致其在pre-mRNA加工中发生了选择性剪接,产生了6种剪接异构体,并分析了每种剪接方式的频率.预测了菜心6种BcFLC1剪接异构体的蛋白产物,显示这些蛋白产物均异常,缺失6号或7号外显子以及氨基酸片段的插入.最后比较了大白菜、结球甘蓝以及菜心中FLC1的SNP变异与选择性剪接.本研究分析了菜心BcFLC1的SNP变异及其诱导的选择性剪接的特征,为阐释了菜心极易抽薹开花的分子机制提供了理论依据.

关键词: 菜心(Brassica papachinensis) BcFLC1 SNP变异 选择性剪接

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基于"协同创新"的创意农业课程建设探索与实践

湖北开放职业学院学报 2020

摘要:近年来,我国创意农业蓬勃发展,已成为现代农业适应经济社会发展新阶段的必然方向.然而,作为其核心资源的创意农业人才还相当缺乏,在涉农高校开设相关课程及人才培养已迫在眉睫.本文基于"协同创新"理念,以产教研合作模式开发建设了《江浙创意农业》课程,并在课程团队、课程内容、教学手段及方法、考核评价等多个方面进行了相关探索与实践,对培育乡村振兴本土人才以及涉农院校开设此类课程起到了积极的推动作用.

关键词: 创意农业 协同创新 课程建设

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强化乡村振兴要素支撑的浙江实践与经验启示

浙江农业科学 2020

摘要:浙江通过实施"科技、 资金进乡村,青年、 乡贤回农村"行动,促进各类要素更多向乡村流动,为打通"绿水青山就是金山银山"转化通道创造有利条件.本文在总结"科技、 资金进乡村,青年、 乡贤回农村"行动主要做法的基础上,将其基本经验概括为妥善处理好整体与重点的关系、 政府与市场的关系、 创新与守正的关系、 生态与经济的关系,并提炼出为成果转化增添持久活力、 为三路进财增设顺畅通道、 为双创新锐增累成长沃土、 为乡情反哺增配实践载体等强化乡村振兴要素支撑的主要启示.

关键词: 乡村振兴 城乡融合 绿水青山就是金山银山 理念 两进两回 浙江

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气象因子对红美人柑橘品质的影响

浙江农业学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:为探索气象因子对红美人柑橘品质的影响,连续3a检测红美人柑橘的6个品质指标,并收集整理产地5个主要气象指标数据,采用相关性分析、回归分析,研究果实品质与红美人柑橘不同物候期气象因子的关系.结果表明:红美人柑橘萌芽期降水量与果实蔗糖、总酸含量呈显著正相关;同时期的日照时数与可溶性固形物、总酸含量呈显著负相关,与蔗糖含量呈极显著负相关.生理落果期,平均气温和≥10℃活动积温与果实总酸含量呈显著负相关.果实采收期时,当平均气温在18.5~19.5℃、≥10℃活动积温在565.3~596.7℃,较高的环境温度有助于果实糖分累积.果实固酸比与开花期日照时数呈显著正相关,与采收期日照时数呈显著负相关.平均气温日较差是影响红美人果实风味的关键因素,昼夜温差大,果实风味更佳.因此,做好红美人采收期保温保热,适当提高该时期的环境温度和热量,并采用设施栽培技术调整萌芽期和采收期棚内小气候环境,有助于获得更好的果实品质.

关键词: 气象因子 红美人柑橘 品质 降水量 日照时数

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