科研产出
猪极体的排出与退化规律及其活性保存
《江苏农业学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：哺乳动物卵母细胞二次减数分裂分别产生第一极体(PbⅠ)和第二极体(PbⅡ),极体(Pb)含有与卵母细胞相似的遗传物质。为探索猪Pb的排出与退化规律,并建立有效的Pb保存方法,从屠宰后的母猪卵巢中采集卵母细胞进行体外成熟培养及体外受精,分别对PbⅠ和PbⅡ的排出与退化规律及其在不同保存温度下的存活情况进行研究。结果表明:PbⅠ在卵泡卵母细胞体外培养40 h时排出率最高,PbⅠ在39℃条件下保存6 h形态正常率为85.5%,但存活率只有18.2%,4℃保存40 h存活率为85.0%,-20℃保存168 h存活率为95.0%,-196℃超低温保存1 344 h存活率和形态正常率分别达89.1%和97.8%。PbⅡ在卵母细胞受精后20 h排出率最高,PbⅡ在39℃条件下保存16 h形态正常率为69.0%,但存活率只有34.5%,4℃保存30 h存活率为87.5%,-20℃保存240h存活率为84.6%,-196℃超低温保存1 344 h存活率和形态正常率分别达87.0%和95.7%。
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4种叶菜对强力霉素的吸收与富集特征
《江苏农业学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：通过水培试验,对畜牧业中广泛使用的典型兽药强力霉素,开展了4种叶菜(绿罗莎、苦苣、绿箭和绿直立)的吸附富集特征及去除规律研究,评价抗生素环境污染的植物修复能力.结果表明:强力霉素在有蔬菜种植的培养液中降解速度明显快于无蔬菜种植的培养液,空白对照组中去除率37. 8%,而在叶菜处理组中去除率超过95%,在空白对照培养液以及绿罗莎、苦苣、绿箭和绿直立的培养液中强力霉素去除半衰期分别为22. 1 d、1. 4 d、1. 5 d、2. 3 d和2. 8 d,与空白对照相比差异极显著(P<0. 01);在吸收富集能力上,绿罗莎和苦苣茎叶部分对强力霉素具有较强的累积作用,富集系数分别为7. 20和4. 95,而绿箭和绿直立的富集系数分别为0. 76和0. 49,累积作用相对较弱.说明富集能力较强的蔬菜作物可作为降低抗生素环境污染的备选植物.
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NDM-5阳性大肠杆菌裂解性噬菌体的生物学特性
《江苏农业学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：NDM-5基因是在动物源细菌尤其是鸡源大肠杆菌中主要流行的碳青霉烯类耐药基因,携带该基因的菌株呈现多重耐药性,传播能力强,被称为"超级细菌"。本研究以携带NDM-5基因的鸡源大肠杆菌SQ-C-E5为宿主菌,从污水中分离了对该细菌具有裂解作用的噬菌体,命名为vB_EcoM_Bp5。通过透射电镜观察,最佳感染复数测定,一步生长曲线绘制,杀菌试验,热稳定性及酸碱稳定性测定等试验分析该噬菌体的生物学特性。结果表明,该噬菌体为肌尾病毒科,其噬菌斑透亮,无晕圈,最佳感染复数为10,潜伏期为5 min,爆发期为65 min,该噬菌体在温度为30~60℃和pH为5~10时较稳定,并且噬菌体vB_EcoM_Bp5的裂解谱较广,对多株NDM-5阳性和阴性大肠杆菌都具有裂解作用。因此,噬菌体vB_EcoM_Bp5在防治携带NDM-5基因的大肠杆菌方面具有潜在应用价值。
关键词： NDM-5阳性大肠杆菌 噬菌体 生物学特性
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小麦Glu-B1x7沉默基因序列分析及对加工品质的影响
《核农学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：小麦籽粒高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)Glu-B1x7与加工品质密切相关。本研究创制了以宁麦9号为背景的Glu-B1x7亚基缺失系,克隆并分析Glu-B1x基因,评价该基因对弱筋小麦加工品质的影响。结果表明,该基因编码区第514位发生了C/G到T/A转换,相应的第514、第515和第516位碱基组成的三联密码子由CAA替换为终止密码子TAA。与野生型宁麦9号相比,具有Glu-B1x7亚基缺失的品系籽粒硬度和蛋白质含量无显著变化,水溶剂保持力和乳酸溶剂保持力均降低,部分品系降低幅度达显著水平。HMW-GS总量和高分子量谷蛋白/低分子量谷蛋白比显著降低,和面仪和面时间显著降低,糖酥饼干直径显著增加。Glu-B1x7基因沉默在宁麦9号背景下可提高弱筋小麦加工品质,该等位变异可用于优质弱筋小麦培育。
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麻鸭HSP90α基因的原核表达、纯化及磷脂结合活性的鉴定
《食品科学 》 2018 EI 北大核心 CSCD
摘要：为研究麻鸭(Anas platyrhynchas)热休克蛋白HSP90α结合肌内磷脂及抑制磷脂水解的作用机制,采用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术,以麻鸭骨骼肌细胞cDNA为模板扩增HSP90α基因,构建重组表达质粒在大肠杆菌中诱导表达,镍柱亲和层析和凝胶层析纯化可溶性重组蛋白。结果表明,获得的HSP90α开放阅读框全长为2 187 bp,编码728个氨基酸,预测的理论等电点约为5。构建的原核表达载体pCold1-HSP90α在大肠杆菌中成功可溶性表达了麻鸭HSP90α,并获得了高纯度的重组HSP90α蛋白。运用薄层层析证明该重组蛋白具有稳定结合磷脂酰胆碱的活性,并且该蛋白能显著削弱磷脂酶A2对磷脂的水解作用。该研究成功克隆并建立了麻鸭HSP90α基因的原核表达体系,制备了具有磷脂结合活性的重组蛋白,为进一步研究HSP90α与磷脂的相互作用及对肉品加工中磷脂的保护效应提供了理论支持。
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田间药液用量影响农药单位剂量防治效果的原因分析
《中国农业科学 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：【目的】分析药液用量与水稻植株持液量的关系,探索稻田药液用量影响农药单位剂量防治效果的机制,为科学使用农药提供依据。【方法】在喷雾状态下计量水稻单位面积的持液量变化,明确液体在水稻叶片上的流失点和稳定持液量。依照国家标准GB/T 5549~(-2)010测定液体表面张力,利用表面活性溶液的表面张力随表面活性剂浓度变化的规律,测定表面活性剂溶液的临界胶束浓度;用Zisman的方法测定水稻叶片的临界表面张力,分析影响水稻叶片持液量的关键因子。在喷雾塔内模拟用氯虫苯甲酰胺防治稻纵卷叶螟、用吡蚜酮和毒死蜱防治褐飞虱的试验,分析药液用量与雾滴密度的关系及农药单位剂量对防治效果的影响。【结果】随着喷液量的增加,水稻叶片的持液量经历增加、达到最大值后开始流失、随之下降到稳定值并不再随喷液量而变化,与最大值比,稳定值减少持液量约50%。供试水稻的临界表面张力为29.90—31.22 m N·m~(-1),为低能表面,清水的表面张力为71.8m N·m~(-1),大于水稻的临界表面张力,限制了水稻叶片的持液量;助剂TX~(-1)0和Silwet-408可使液体的表面张力小于水稻临界表面张力,增加水稻叶片的持液量,当助剂达到临界胶束浓度时,增加持液量的效果最好;喷液量影响雾滴密度,从而影响农药单位剂量的防治效果。雾滴体积中径为200μm时,药液量150 L·hm~(-2)的雾滴少于10滴/cm2,20、25和30 g 3个有效剂量的氯虫苯甲酰胺对稻纵卷叶螟的防治效果不足60%;药液量450 L·hm~(-2)的雾滴少于40滴/cm2,氯虫苯甲酰胺3个有效剂量对稻纵卷叶螟的防治效果分别为56.92%、62.86%和65.07%;药液量900 L·hm~(-2)的雾滴为82滴/cm2,氯虫苯甲酰胺3个有效剂量对水稻纵卷叶螟的防治效果最好,达到70%以上。减小雾滴体积中径,增加单位体积液体的雾滴数量,可以适量减少喷液量。雾滴体积中径为75μm、药液量450 L·hm~(-2)时,雾滴为140滴/cm2,氯虫苯甲酰胺防治稻纵卷叶螟的效果与雾滴体积中径为200μm、药液量900 L·hm~(-2)的防治效果无显著差异。由于水稻冠层的阻挡,叶面喷雾时冠层下的雾滴极少,雾滴体积中径200μm喷药液量900 L·hm~(-2)和雾滴体积中径75μm喷药液量450 L·hm~(-2),冠层下的雾滴不足20滴/cm2,农药对褐飞虱防治效果差。冠层下喷雾,直接将农药喷洒到褐飞虱栖息危害的部位,显著提高了吡蚜酮和毒死蜱单位剂量对褐飞虱的防治效果。【结论】药液用量影响农药在水稻植株上的沉积量和水稻单位面积上的雾滴密度,从而影响农药单位剂量对害虫的防治效果。当稻田药液用量在450 L·hm~(-2)(雾滴体积中径75μm)或900 L·hm~(-2)(雾滴体积中径200μm),冠层上下喷雾均匀,能确保药液在水稻最大持液量范围内并使植株表面有足够的雾滴密度,可取得良好的防治效果。
关键词： 农药 药液用量 流失点 持液量 雾滴密度 防治效果
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绣球属植物种质资源分析及其花色可调性和叶斑病抗性比较
《植物资源与环境学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：对收集的绣球属(Hydrangea Linn.)植物68个品种(品系)的株型、叶色、花序类型、花期和花色进行了观察,并对其花色可调性和叶斑病抗性进行了比较.结果表明:在收集的68个品种(品系)中,53个品种(品系)属于大花绣球[H. macrophylla ssp. macrophylla (Thunb.) Ser.],3个品种(品系)属于山绣球(H. macrophylla var. normalis Wils.),6个品种属于圆锥绣球(H. paniculata Sieb.),而粗齿绣球(H. macrophylla ssp. serrata Ser.)、栎叶绣球(H.quercifolia Bartr.)、马桑绣球(H. aspera D. Don)、乔木绣球(H. arborescens Linn.)、藤绣球(H. petiolaris D. Don)和银边绣球(H. macrophylla var. thunbergii Makino)分别只有1个品种(品系);其中,47个品种来自欧美国家,17个品种来自日本,4个品系来自中国.67个品种(品系)在南京地区能够正常开花,花序类型包括近球型、平盘型和圆锥型,分别有37、22和8个品种(品系).41个品种(品系)花色可调,在酸性且含Al3+的土壤中呈蓝色或紫色; 26个品种(品系)花色不可调.根据病情指数,将绣球属植物对叶斑病的抗性分成抗病、中等抗病、中等感病和感病4个等级,分别有11、26、21和10个品种(品系).研究结果显示:绣球属植物花色多样且可人工调控,部分品种(品系)的抗叶斑病能力较强,应根据实际需要种植适宜品种(品系).
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紫山药淀粉酶解工艺优化及动力学模型研究
《中国粮油学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：以还原糖释放率(DE)为考察指标,考察酶添加量、pH值、温度、时间对紫山药淀粉酶解效果的影响,并采用响应面法对酶解过程中的工艺参数进行优化。通过Lineweaver-Burk和Wilkinson统计法求解米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm),建立相应动力学模型。结果表明,紫山药淀粉的最佳酶解工艺条件是α-淀粉酶添加量为23 U/g,酶解温度75℃,酶解p H为5.5,酶解时间77 min,在此条件下,DE值为27.17%;在pH 5.5,75℃条件下,V_m=4.141 mg/(mL·min),K_m=4.329 mg/m L,酶解动力学方程为:v=6.98[S]/(7.94+[S]),R~2=0.996 6。
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MiR-222对山羊副流感病毒3型复制的影响
《畜牧兽医学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：为探讨miR-222对山羊副流感病毒3型(CPIV3)复制的影响及其机制。本研究将miR-222模拟体转染MDBK细胞,接种CPIV3病毒液,收集上清和细胞,测定病毒效价和干扰素(IFN)含量;通过Target Scan和miRanda等生物信息学软件预测miR-222调控的靶基因,用双荧光素酶报告系统验证其靶基因,RNA干扰技术研究靶基因对CPIV3复制的影响。结果显示,miR-222模拟体能抑制CPIV3复制,转染miR-222组IFN的表达水平较高,且病毒复制效价(10~(2. 5)TCID_(50)·0. 1 mL~(-1))显著低于miRNA阴性对照组(10~(3. 3)TCID_(50)·0. 1 mL~(-1));双荧光素酶报告系统验证和qPCR检测得出,miR-222可靶向结合IRF2的3'-UTR,并降解IRF2的mRNA和抑制IRF2蛋白表达;敲除IRF2的MDBK细胞感染CPIV3后,病毒复制效价(10~(2. 0)TCID_(50)·0. 1 mL~(-1))低于正常MDBK细胞组(10~(3. 2)TCID_(50)·0. 1 mL~(-1))。本研究表明,miR-222通过靶向降解IRF2 mRNA提高IFN表达水平来抑制CPIV3复制,为基于miR-222研制潜在抗病毒药物提供基础资料。
关键词： 山羊副流感病毒3型 miR-222 MDBK细胞 IRF2
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H_2O_2诱导ARPE-19细胞损伤模型的建立及蓝莓花青素的保护作用
《中国药理学通报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：目的建立H_2O_2诱导视网膜色素上皮细胞ARPE~(-1)9(acute retinal pigment epithelial~(-1)9)细胞损伤模型,研究蓝莓花青素对细胞的保护作用。方法采用MTT法测定细胞存活率,免疫荧光法测定细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。以浓度0~3 200μmol·L~(-1)的H_2O_2为诱导剂,刺激细胞2、6、24 h,用1、5、10 mg·L~(-1)花青素提取物(blueberry anthocyanin extract,BAE)预处理细胞6、24 h,比较对细胞的保护作用,确定H_2O_2的浓度及诱导时间。通过ARPE~(-1)9细胞损伤模型的建立,研究蓝莓花青素对细胞的保护作用。结果以800μmol·L~(-1)H_2O_2刺激2 h为条件,建立ARPE~(-1)9细胞损伤模型,细胞存活率为63.69%。5 mg·L~(-1)蓝莓花青素提取物、锦葵色素(malvidin,Mv)及其葡萄糖苷(malvidin-3-glucoside,Mv-3-glc)和半乳糖苷(malvidin-3-galactoside,Mv-3-gal)预处理6 h后,细胞存活率明显提高(P<0.01),分别达到86.57%、115.72%、98.15%、127.97%;细胞中ROS水平明显下降(P<0.05),依次减少52.38%、95.38%、77.55%、116.09%。结论蓝莓花青素可以有效抑制H_2O_2诱导产生的视网膜细胞氧化损伤,其中主成分锦葵色素及其糖苷发挥重要作用。
关键词： 花青素 ARPE-19细胞 H2O2 氧化损伤 模型建立 保护作用
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