科研产出
试纸法快速检测果蔬中有机磷及氨基甲酸酯类农药残留
《中国食品学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了快速检测果蔬中的农药残留,研制基于酶抑制法的农药残留速测试纸。该试纸以鸭血浆胆碱酯酶为检测用酶,2,6-二氯靛酚乙酸酯为底物。反应后根据颜色变化目测判断农药残留情况,强阳性、弱阳性和阴性的颜色分别为白色、浅蓝色和蓝色。用该法检测只需13min,对敌敌畏的敏感性最强,对甲胺磷的敏感性较差,对几种常见的有机磷及氨基甲酸酯类农药的检出限在0.001～6mg/kg之间。该法简便、快速,成本低,适合果蔬中部分农药残留的现场监督检测。
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珠芽魔芋“3414”肥料效应试验初报
《湖北农业科学 》 2012 北大核心
摘要：在湖北主要魔芋产区恩施市开展"3414"肥效试验,初步研究了不同氮磷钾配方施肥对珠芽魔芋(Amorphophallus bulbifer)产量的影响,并成功拟合建立了产量三元二次和一元二次肥料效应方程。结果表明,合理的氮磷钾肥施用量可显著提高魔芋产量,施肥量不足或过量施肥会导致魔芋产量降低;在试验地力土壤条件下,珠芽魔芋最高产量为40 863.4 kg/hm2,此时N、P2O5、K2O的施用量分别为295.1、76.5、193.5 kg/hm2;珠芽魔芋最佳经济产量为40 863.0 kg/hm2,N、P2O5、K2O的施用量分别为290.1、75.5、189.0 kg/hm2。
关键词： 珠芽魔芋(Amorphophallus bulbifer) 配方施肥 ”3414”试验 回归分析
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检测miRNA活性的双荧光素酶单载体
《中国生物化学与分子生物学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：本研究报道了微小RNA靶分子鉴定及其活性分析的内参内置型双荧光素酶单载体与其应用.利用非连接酶依赖的基因克隆技术,借助一步式二元搭桥耦联长距离PCR及大肠杆菌体内同源重组方法,将萤火虫荧光素酶基因(Firefly luc)融合到pRL-TK载体的海肾荧光素酶基因(Renillaluc)和氨苄青霉素抗性基因之间,构建为两种荧光素酶基因表达框并置的单载体报告系统,命名为pMiSensor.在海肾荧光素酶基因的3'非翻译区引入多克隆位点Xba I和Apa I,便于克隆目的基因的3'UTR.海肾荧光素酶为报告基因,萤火虫荧光素酶为内参基因.多种哺乳动物细胞系的转染实验证实,pMiSensor可同时有效表达两种报告基因,其酶活显示出宽广的线性范围.通过构建pMiSensor-CCNE1报告载体,证明pMiSensor能够重现miR16对细胞周期蛋白CCNE1的调控作用.通过转染miR16抑制剂,证明pMiSensor-CCNE1可作为一种灵敏的生物感应器,探测细胞内微小RNA的活性变化.该双荧光素酶单载体具有重复性高、操作简便、定量准确的优点,适用于微小RNA靶分子的筛选、鉴定和确认,也适用于在细胞水平定量分析微小RNA的活性变化.
关键词： 微小RNA 荧光素酶 非连接酶依赖 mRNA靶分子 单载体
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