科研产出
两种纤溶酶的酶学性质比较与溶栓机理分析
《中国食品学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：对芽孢杆菌(Bacillus sp.nov.SK006)发酵产生的两种纤溶酶(SPFE-1和SPFE-2)的酶学性质和溶栓机理进行分析比较,并研究其酶促反应动力学参数。试验结果表明:SPFE-1和SPFE-2具有较好的耐热性和pH稳定性;Zn2+能促进SPFE-1的纤溶活力,但强烈抑制SPFE-2;PMSF对SPFE-1h具有强烈的抑制作用;SPFE-1和SPFE-2都可直接降解纤维蛋白,也可激活纤溶酶原,从而间接降解纤维蛋白;SPFE-1最先降解纤维蛋白原的β链,然后是α链,很难降解γ链;SPFE-2顺次降解纤维蛋白原的α、β和γ链;SPFE-1和SPFE-2有较强的酰胺水解活性,最适底物为N-Succ-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA;其作用于最佳底物的特征常数:Km=0.6/0.51mmol/L;kcat=712/154.25/s;kcat/Km=1.19×106/3.02×105L/(mol·s)。
关键词： 芽孢杆菌 纤溶酶SPFE-1和SPFE-2酶学性质 纤溶机理 反应动力学
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亚洲棉中与棕色素合成相关基因GaTT12a的克隆及表达特征
《农业生物技术学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：棕色棉具有典型的自然棕色纤维,在纺织及加工过程中无需漂染,是真正的"生态"、"环保"棉。克隆并了解棉花纤维棕色素合成相关基因对于揭示棉花纤维色素发育的分子机理具有重要的意义。本研究选取亚洲棉(Gossypium arboreum)棕色纤维慈溪紫棉和白棉余姚中棉纤维发育不同阶段RNA,采用Gene Fishing技术,获得1条仅在亚洲棉棕色棉纤维中特异表达的约500bp的PCR扩增产物,根据测序结果和生物信息学分析发现,该基因在核苷酸序列上与拟南芥(Arabidopsis thaliana)种皮棕色素合成TT12基因存在76%的序列同源性。随后利用RT-PCR的方法克隆了该基因,命名为GaTT12a(GenBank登录号:JX013908),该基因编码490个氨基酸残基,分子量约52.7kD,属于MATE超基因家族中的一个成员。利用荧光定量PCR分析了GaTT12a基因在发育不同阶段纤维、种皮的表达特征,结果表明,GaTT12a基因在棕色纤维、白色棉种皮和棕色棉种皮中均优势表达,在白色棉纤维中几乎不表达,说明该基因参与纤维棕色素的形成,结果暗示棉花种皮棕色素和纤维棕色素可能分享相似的合成代谢途径。研究结果为进一步了解GaTT12a基因参与棕色棉纤维色素形成、棕色棉纤维色素与种皮棕色素合成之间的关系提供了基础研究资料。
一步法TaqMan~探针实时荧光定量RT-PCR快速检测PRRSV的建立及初步应用
《浙江农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,设计了1对特异性引物和1条TaqMan探针,建立了一步法检测PRRSV的荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法具有较高的特异性,与PCV,JEV,SFV,PRV,PPV无交叉反应;可以检测到10个拷贝数的模板RNA或1个TCID50的PRRSV,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)<1%,具有较好的重复性。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对72份PRRS疑似病例肺组织进行平行检测,结果荧光定量RT-PCR检出40份阳性,高于常规RT-PCR方法(28份阳性)。建立的荧光定量RT-PCR方法特异性好、灵敏度高,而且快速简便,可用于PRRSV的实验室快速诊断和流行病学调查。
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 实时荧光定量RT-PCR 一步法
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转Bt基因对水稻内生原核微生物定殖数量效应分析
《浙江农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为探讨转Bt基因对水稻内生原核微生物定殖的数量效应,首先确定水稻根、茎、叶表面微生物的消毒时间和条件;其次,在有效排除水稻植株表面微生物干扰的条件下,应用纯培养方法对转Bt基因及其亲本水稻各组织的内生原核微生物定殖数量进行检测分析,初步评估各亲本水稻在引入外源Bt基因后,给水稻植株内生原核微生物数量带来的影响。结果显示,水稻根际微生物以70%乙醇浸泡7 min,茎和叶表面微生物以70%乙醇浸泡2 min,以无菌水漂洗2次,可达到杀灭表面微生物的效果。本次试验中,ZJ-22和明恢63两个水稻品系亲本植株根、茎的内生原核微生物定殖数量,在苗期和分蘖期时均高于对应的转Bt基因植株(ZJ-22Bt和TT51-1);苗期时两个品系亲本水稻叶片内生微生物数量同样高于转Bt基因水稻,分裂期转Bt水稻TT51-1叶片内生原核微生物数量则多于其亲本植株明恢63。以上结果表明,两个品系亲本水稻插入外源基因后,在苗期和分裂期对亲本植株各部位的内生原核微生物定殖情况均产生了一定的影响。
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叶菜类蔬菜对海藻碘的吸收与积累特征
《环境科学学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以叶菜类蔬菜菠菜、大白菜、生菜、香菜、芥菜和雪菜为研究对象,利用海藻固体碘肥和海藻液体碘肥作为外源碘,在露天和大棚栽培条件下进行蔬菜植物碘强化的田间试验,通过分析蔬菜对碘吸收量的动态变化和碘在蔬菜各器官的分布和分配状况,研究了叶菜类蔬菜对外源碘的吸收与积累特征.结果表明,供试叶菜可食部分中碘的含量随着外源碘添加量的增加而增加;随着取样时间的延后,叶菜可食部分中碘的含量呈现出下降的趋势;喷施液体碘肥比土施固体碘肥更有利于叶菜对碘的吸收和积累,前者使吸收的碘大部分积累在叶面,后者则大部分积累在根部.
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不同品系(组合)鸭蛋品质的研究
《浙江农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为比较不同品系鸭及其杂交组合的蛋品质差异,从绍兴鸭、缙云麻鸭、山麻鸭、绍兴鸭×缙云麻鸭和山麻鸭×缙云麻鸭共5个品种(组合)选育出的5个青壳系为研究对象,每个品系随机抽取青壳蛋各30枚,进行蛋品质测定和相关性分析。结果表明:各品系蛋形指数无显著差异(P>0.05),均符合蛋形标准;绍兴鸭×缙云麻鸭的蛋壳厚度最大,与绍兴鸭、山麻鸭、山麻鸭×缙云麻鸭3个品系差异显著(P<0.05);绍兴鸭×缙云麻鸭和山麻鸭的蛋壳强度最大,与绍兴鸭差异显著(P>0.05);绍兴鸭的蛋重最大,显著高于其他品系(P<0.05);蛋白高度绍兴鸭×缙云麻鸭最高,与其他品系差异显著(P<0.05);缙云麻鸭的哈夫单位数值最大,绍兴鸭最小,差异显著(P<0.05)。总体上看,绍兴鸭×缙云麻鸭蛋壳厚度、蛋壳强度和蛋白高度均为最佳,而绍兴鸭的蛋重最大。蛋品质各性状相关分析发现:蛋壳厚度与蛋壳强度呈极显著正相关(P<0.01);哈夫单位与平均蛋重呈负相关(P<0.05),与蛋白高度强正相关(P<0.01)。
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一个水稻金黄色颖壳与节间基因的定位
《核农学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：在粳稻品种浙粳88种子经6 0Coγ射线辐照的后代中,筛选得到1个金黄色颖壳与节间基因突变体,将该突变体命名为浙粳88GH,该突变体的颖壳和茎间与野生型浙粳88相比具较明显的金黄色。遗传分析表明,该突变体性状受1对隐性核基因控制,暂将该突变基因命名为gold hull 6(gh6)。以该突变体与籼稻珍汕97B杂交的F2作为定位群体,采用SSR分子标记和隐性群体分析法,将gh6基因初步定位在第2号染色体短臂端的分子标记RM3732和RM6378之间,遗传距离分别为21.2cM和28cM。然后,进一步扩大F2群体将gh6基因定位在分子标记Indel3和Indel4之间约90kb内。
关键词： 水稻 遗传分析 基因定位 金黄色颖壳与节间基因
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芥子油苷在十字花科植物与昆虫相互关系中的作用
《应用生态学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：芥子油苷(glucosinolate,GS)是十字花科植物重要的次生代谢物,对调节十字花科植物与昆虫间的关系起着重要作用.由于GS及其代谢产物具有一定的毒性,因此它是十字花科植物抵御广食性植食昆虫攻击的有力手段.而寡食十字花科植物的昆虫由于具备多种GS应对机制,因此可通过GS这一十字花科植物特有的次生代谢物进行寄主选择.被植食性昆虫摄入的GS不仅可以影响天敌的生长发育,而且还对天敌有一定的驱避作用.而虫害后十字花科植物释放的GS代谢产物又可作为天敌的寄主选择信息.本文结合该领域的一些最新研究成果,从GS对植食性昆虫的毒性、寡食性害虫的寄主选择、植食性昆虫对GS的适应机制、虫害对GS-黒芥子酶系统的诱导,以及GS对天敌的影响等方面对GS如何影响植物与昆虫间的相互关系进行了综述,并就今后该领域的研究方向、研究方法提出建议.
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