科研产出
普通野生稻胚性愈伤组织诱导体系的建立
《河南农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了建立野生稻的脱分化与分化体系,以普通野生稻为试验材料,通过在N6D、NB基本培养基中添加不同质量浓度激素(IAA、NAA、2,4-D、6-BA、KT),统计野生稻在不同诱导培养基上的出愈率,从而确定最佳诱导培养基,并观察胚性愈伤组织分化成苗的情况。结果发现,以N6D为基本培养基,添加质量浓度分别为6.0mg/L、3.0mg/L、3.0mg/L、1.5mg/L的2,4-D、NAA、IAA、KT,接种7d后出愈率高达56.7%,愈伤组织直径为0.31cm,将其转入MS分化培养基,24d后分化成苗。说明该诱导培养基是培养普通野生稻产生胚性愈伤组织的最佳培养基。
玉米烤烟统筹施肥对烤烟生长发育及品质的影响
《河南农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为探索烤烟轮作前后茬作物的合理施肥方法,研究了玉米-烤烟统筹施肥对烟株生长发育和烟叶质量的影响。结果表明,与常规处理(玉米茬195kg/hm2纯氮)相比,玉米前茬减少氮肥施用量(纯氮120kg/hm2),增加钾肥施用量(K2O 120kg/hm2),不施用含氯肥料,烟叶当季适量施用氮肥(22.5~37.5kg/hm2),烟叶生长发育良好,成熟落黄较好,烤后烟叶外观质量和评吸质量提高,玉米产值虽降低,但烟叶产值提高2 160.5~3 506.0元/hm2,玉米-烤烟总体经济效益5.5万元/hm2左右,与玉米季未减氮处理总体经济效益相当。可见,玉米-烤烟统筹施肥更符合以烤烟为主的种植制度要求。
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不同海拔高度信阳毛尖茶香气成分的GC-MS分析
《河南农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了解不同海拔高度信阳毛尖的香气成分,以白龙潭(高山,海拔670m)和震雷山(低山,海拔200m)信阳群体种为原料,按手工制法加工成信阳毛尖茶,采用气相色谱-质谱法测定茶叶香气成分。结果表明,2种茶叶均以醇类物质为主,但存在明显差别:①高山茶香气物质种类、含量都明显高于低山茶。高山茶检测出35种芳香物质,分属醇类、酯类、醛类、碳氢化合物、酮类及其他化合物6类,含量8.801%;低山茶只有18种芳香物质,分属醇类、酯类、醛类、碳氢化合物4类,含量3.506%;②高山茶萜稀醇类含量更高、种类更丰富。高山茶含有橙花叔醇、香叶醇、芳樟醇、顺-氧化芳樟醇、反-氧化芳樟醇、顺-橙花醇、α-萜品醇7种,含量2.705%,低山茶只含有反-香叶醇、芳樟醇、α-萜品醇3种,含量0.825%。③与高山茶相比,低山茶含有更高比例的具有木香的芳香物质。高山茶检测出具有松木、蒿草等气味的古巴烯、α-荜澄茄油烯、α-法尼烯、3-蒈烯,总量为0.697%,占芳香物质总量的7.92%;低山茶中检测出有木香的丁香烯、β-丁香烯、α-荜澄茄油烯,总量为0.763%,占芳香物质总量的21.76%。
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甘薯褪绿斑病毒外壳蛋白的分子变异及其特异抗血清制备
《植物病理学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：甘薯褪绿斑病毒(Sweet potato chlorotic fleck virus,SPCFV)是侵染甘薯的主要病毒之一。本研究利用RT-PCR方法克隆了SPCFV中国4个分离物的外壳蛋白(CP)基因。序列分析表明,cp基因全长900 bp,编码299个氨基酸残基。4个分离物cp基因的核苷酸序列一致性为78.3%~89.9%,推导的氨基酸序列一致性为91.3%~95.7%,存在较大的分子变异。不同分离物CP氨基酸序列N末端的第3-32位氨基酸为多变区。将四川分离物的cp基因克隆到原核表达载体p ET-28a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,cp基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原免疫家兔,制备了SPCFV CP的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清效价达1∶128 000,可用于田间甘薯样品的检测。
关键词： 甘薯褪绿斑病毒 外壳蛋白 分子变异 原核表达 抗血清制备
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黄曲霉毒素M1人工抗原的制备及鉴定
《中国免疫学杂志 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：目的:合成黄曲霉毒素M1(Aflatoxin M1,AFM1)免疫抗原和检测抗原,并对其进行鉴定。方法:采用肟化法改造AFM1,并用薄层色谱法监测肟化反应进程,对肟化物鉴定。将肟化物分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,得到免疫原AFM1-BSA和检测原AFM1-OVA,然后分别用紫外分光光度法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)对合成抗原进行鉴定。经动物免疫试验获得鼠源多抗血清,用酶联免疫吸附法(ELISA)对多抗血清进行检测,判断抗原是否偶联成功。结果:肟化改造后,肟化物在薄层板上的迁移距离缩短;偶联物AFM1-BSA在274 nm处出现最大吸收峰,且与BSA和AFM1的紫外吸收峰都不重合;AFM1-BSA的泳动速度明显小于BSA;免疫的3只小鼠效价均在1×10-4左右,其中3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50(50%inhibitive concentration,IC50)为359.9 ng/ml。结论:本试验成功制备出AFM1人工抗原,并得到了敏感性好的鼠源多抗血清。
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河南地区猪源性大肠杆菌血清型鉴定与耐药性调查
《河南农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了解河南省规模化猪场大肠杆菌的流行概况,无菌采集疑似大肠杆菌感染的病死猪病料185份,经常规细菌培养、生化试验及致病性试验,分离到86株大肠杆菌;对分离菌株进行血清型鉴定,确定了67株大肠杆菌血清型,分属15个血清型,主要以O8、O9、O161、O107为主。测定了已鉴定血清型的67株大肠杆菌对15种常用抗菌药物的耐药性,结果显示,对阿米卡星、黏菌素、头孢曲松钠、头孢噻呋敏感率高的菌株较多;对环丙沙星、多西环素、阿莫西林、四环素、磺胺甲恶唑耐药的菌株达80%以上,对四环素和磺胺甲恶唑耐药的菌株比例最高,分别为88.1%、89.6%;67株菌株均表现不同程度的多重耐药,每种菌株至少对3种受试药物耐药,53.7%的菌株对9种以上药物耐药。表明河南地区的猪源大肠杆菌耐药现象严重,耐药谱广。
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基质配方和容器对红叶樱花容器苗生长的影响
《河南农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为促进新优园林观赏植物容器苗的培育和应用,以红叶樱花为试验材料,研究基质配方和容器类型对容器苗生长的影响。结果表明:基质配方对容器苗的生长有一定的影响。其中A2基质(泥炭∶珍珠岩∶蛭石=5∶3∶2)容重最小,饱和含水量最大,分别为0.283 0g/cm2和47.243%;植株在此基质中生长表现最佳,其地径、根冠比和根系活力均最大,分别达到4.488mm、5.502 4和71.343 3μg/(g·h)。容器类型对容器苗根系发育的影响较为明显。控根容器最佳,其中植株根冠比最大,达到5.603 3;根系活力为67.379 3μg/(g·h),约为塑料营养钵和无纺布袋的1.3倍,并且根系结构合理,须根数量极多;其次为无纺布袋容器。综合考虑,红叶樱花容器苗的最佳培育基质配方为泥炭∶珍珠岩∶蛭石=5∶3∶2,培育容器为控根容器。
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两种寄主植物对烟夜蛾滞育蛹耐寒性影响
《北方园艺 》 2014 北大核心
摘要：对烟叶和辣椒饲养的烟夜蛾滞育蛹过冷却点、结冰点和低温存活率进行了比较,以探究不同寄主对烟叶蛾滞育蛹耐寒性的影响。结果表明:2日龄时,2种寄主植物饲育下滞育蛹的过冷却点和结冰点差异不显著;5日龄和9日龄时2种寄主植物饲育的滞育蛹的过冷却点和结冰点,除5日龄的雄蛹的结冰点差异不显著外,其它均达显著水平;低温条件下,不同的处理时间滞育蛹存活率变化幅度较大,处理10d和20d,2种寄主植物饲育下滞育蛹存活率差异不显著;处理60d,无论何种寄主、土壤深度以及雌雄蛹,滞育蛹基本上全部死亡;处理30、40、50d,用烟叶饲育的滞育蛹存活率显著高于辣椒,且雌蛹的存活率略高于雄蛹;从耐寒性来考虑,烟叶是较为理想的寄主植物。
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玉米受伤诱导基因Wip1的启动子克隆及表达分析
《中国农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】植物蛋白酶抑制剂是抵抗动物摄食和病原侵染的重要防御蛋白。玉米Wip1(wound-induced protein)基因属于Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)家族,了解Wip1(wound-induced protein)的启动子活性和Wip1组织表达特性、受胁迫诱导表达情况和在不同受伤时间下的表达模式,为抗虫基因在植物中应用提供新信息。【方法】以玉米叶片组织的cDNA为模板,采用克隆测序技术获得Wip1启动子序列和该基因的cDNA序列。将所得启动子与植物表达载体p1300连接,构建重组表达载体p1300-Wip1-GUS,并采用冻融法将其转入农杆菌LBA4404中。利用农杆菌介导的瞬时表达体系在玉米愈伤组织中对Wip1启动子的表达活性进行分析。利用热酚法提取玉米相应组织的总RNA,纯化后于含甲醛的变性胶中电泳分离,并将RNA转移到尼龙膜上,用[α-32P]dCTP标记探针的Northern blot技术对Wip1在玉米不同组织、不同胁迫条件、不同受伤时间下的表达模式进行分析。【结果】获得的启动子序列全长1 737 bp,cDNA全长512 bp。将含有重组质粒p1300-Wip1-GUS的农杆菌侵染玉米愈伤组织,3 d后,GUS染色显示侵染部位变蓝,说明所克隆的启动子在玉米愈伤中能启动GUS正常表达。基于Northern blot技术的植物组织表达结果显示,正常情况下,Wip1仅在胚芽鞘中有一定的表达,在受伤后的胚芽鞘、根、茎、叶、雌穗、雄穗、花丝及苞叶中均大量表达;在所设置的胁迫处理时间(2 h)内,Wip1不受缺氧、低温、脱水、PEG、ABA、NaCL和IAA胁迫诱导,仅受伤害胁迫诱导表达;Wip1在玉米叶片受伤胁迫下,玉米叶片受伤2 h时,检测到了Wip1表达,4—24 h时表达量迅速提高且处于持续增加趋势。【结论】玉米Wip1特异地受机械伤害诱导表达;Wip1启动子是一种有效的伤害诱导特异性启动子。
关键词： 玉米 受伤诱导 Wip1 丝氨酸蛋白酶抑制剂 Bowman-Birk
