科研产出
利用分子标记辅助选育油菜隐性上位互作核不育临保系
《浙江大学学报(农业与生命科学版) 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以湘油15、沪油15、优88和沪油17分别与临保系HYZ1-TAM杂交,在其F2利用与不育基因Bnms3和隐性上位基因Bnrf连锁的分子标记对临保系基因型单株进行筛选,并对筛选获得的单株进行测交验证确定是否为临保系基因型.结果表明:在4个品种的转育F2群体共355个单株中,利用分子标记辅助选择获得了62个标记基因型为临保系的单株,这些单株经测交证实有57株为真实临保系,分子标记辅助选择的准确率为91.94%.根据实验结果推测,本研究所用的4个甘蓝型油菜品种在Bnms4基因位点未出现显性可育等位基因.实验结果验证了分子标记辅助选择具有较高的准确率,对开展该不育系统的转育工作具有很好的借鉴意义.
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植物类脂褐素的研究现状和展望
《中国食品学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：类脂褐素是由膜脂过氧化作用产物与细胞内的蛋白质、核酸和磷脂交联形成的一种荧光性化合物,通常与细胞的衰老密切相关。以往的研究工作证实植物器官中也存在脂褐素类似物,其与植物衰老和果实成熟有密切关系。在植物中,许多其它物质都与类脂褐素(LFLP)有着密切的关系:对LFLP的形成起促进作用的物质主要有丙二醛、脱落酸、脂肪氧合酶;谷胱甘肽、超氧化物歧化酶以及α-生育酚等抗氧化物质均能抑制LFLP的积累。除此之外,LFLP的含量还与温度、时间、光照、空气等外界条件有一定的关系。本文概述了植物中类脂褐素的形成及相关研究现状,并对该领域的研究前景和类脂褐素与农产品质量控制之间的关系进行了探讨。
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枇杷果实DHN基因克隆及其在低温胁迫下的表达分析
《园艺学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以白沙枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.)‘宁海白’幼果为试材,通过RT-PCR与RACE扩增,获得两个具有脱水素基因典型结构域特征的cDNA序列。其中DHN1(GenBank登录号:FJ472835)全长639bp,编码188个氨基酸,属于Y2SK3类型;DHN2(GenBank登录号:FJ472836)全长858bp,编码273个氨基酸,属于SK3类型。用低温胁迫处理枇杷幼果,-3℃处理24h后电导率明显升高,表明细胞膜开始受到破坏,-6℃处理24h后电导率显著高于-3℃处理。半定量RT-PCR和Western-blotting分析结果表明这两个DHN基因在低温胁迫下的枇杷幼果中都上调表达,表明其与枇杷抗低温胁迫有一定关系。
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利用抑制性消减杂交技术分离草莓抗炭疽病相关基因
《中国农学通报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：利用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),比较接种炭疽病菌与未接菌草莓之间的基因表达差异,筛选抗草莓炭疽病菌的差异表达基因片段,为草莓抗炭疽病遗传育种提供理论依据。分别提取接种草莓与未接种草莓叶片的总RNA,分离mRNA,逆转录成cDNA,利用RsaI进行酶切,然后以接种叶片酶切cDNA为试验方(tester),以未接菌草莓叶片酶切cDNA为驱动方(driver),构建了草莓抗炭疽病基因消减文库。菌落PCR结果表明,插入片段大部分在100～1000bp之间,文库质量好。对文库中1500个阳性克隆进行测序,共得到了1377个有效的ESTs序列。利用NCBI数据库进行Blast同源性比较发现,这些ESTs可能与胁迫反应、信号转导、蛋白合成、蛋白相互作用、物质代谢、跨膜通道、转录因子、金属转运及未知或假定蛋白等有关,ESTs序列的获得为后续草莓抗炭疽病相关基因的克隆、表达和转基因研究提供了参考。
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兔类胚胎干细胞的体外培养
《浙江农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为了确立兔类胚胎干细胞(ESCs-like)体外培养方法,研究探讨了兔囊胚形成环境与饲养层细胞对内细胞团(ICM)增殖、ICM原代集落形成以及集落碱性磷酸酶(AKP)阳性率的影响,并在MEF和REF饲养层上进行了兔ESCs-like的体外培养。结果显示,去除透明带桑葚胚在体外具有较高的囊胚发育率和囊胚贴壁率(P<0.05),体外发育囊胚ICM原代集落的AKP阳性率却显著低于体内发育囊胚(P<0.05);与MEF饲养层相比,REF饲养层上ICM原代集落的形成率显著偏低(P>0.05),但原代集落的AKP阳性率却显著高于其余各组(P<0.05);MEF饲养层与REF饲养层均支持兔ESCs-like的传代培养,但F3代后MEF组中ESCs-like的集落形成率显著高于REF组(P<0.05)。
关键词： 类胚胎干细胞(ESCs-like) 内细胞团(ICM) 集落 饲养层 兔
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不同温度下吡虫啉对B型烟粉虱毒杀活性的研究
《环境昆虫学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：分别采用浸卵法、浸渍法和浸叶法测定了22、25、28、31和34℃下吡虫啉对B型烟粉虱Bemisia tabaci B-biotype不同虫态的控制效果。结果表明,随着温度的升高,吡虫啉对B型烟粉虱不同虫态的控制效果也逐渐上升,当温度上升至34℃时,60mg/L浓度药液处理下卵、低龄若虫、高龄若虫及成虫死亡率分别较22℃时升高了20.89%、33.52%、33.37%及17.86%。因此,温度提高对吡虫啉防治B型烟粉虱起到了正面效应。
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Ⅰ型鸭肝炎病毒VP3基因的原核表达及其抗原性
《浙江农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：参考GenBank中的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)全基因序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增了DHV-ⅠVP3基因,将VP3基因与pET-28a(+)表达载体连接后,转化宿主BL21(DE3),用0.1 mmol·L-1的IPTG诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,Western-blotting分析蛋白免疫原性。电泳结果表明,VP3在大肠杆菌中表达量较高,表达产物的分子量约为27 kD。免疫印迹试验表明Ⅰ型鸭肝炎病毒VP3蛋白在大肠杆菌中表达产物具有免疫原性。
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单叶铁线莲Clematis henryi愈伤组织诱导与植株再生
《浙江农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以单叶铁线莲老枝、嫩茎、叶片和叶柄为外植体,在附加各种激素的MS培养基上进行诱导培养,以探讨愈伤组织诱导和植株再生的条件。结果表明,嫩茎为最佳外植体,适用于愈伤组织的诱导,在MS+1.2 mg.L-16-BA+0.35 mg.L-1NAA培养基中,嫩茎的出愈率为88.6%;MS+4.0 mg.L-1KT+0.4 mg.L-1NAA为最佳不定芽诱导培养基,不定芽发生率为90.0%;MS+0.04 mg.L-1NAA为最佳生根培养基,生根率达95.0%。
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杭州市粮油类农产品真菌毒素快速检测与安全性评估
《浙江农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：在真菌毒素传统检测方法基础上,建立并完善4类真菌毒素免疫亲和净化与荧光法(或HPLC)快速检测技术。应用真菌毒素快速检测技术对杭州市粮油类农产品进行抽样检测并作安全性评估。黄曲霉毒素总量和黄曲霉毒素B1的检测样本数为28个,检出率为25%;赭曲霉毒素A的检测样本数为48个,检出率为22.9%;玉米赤霉烯酮的检测样本数为49个,检出率为42.9%;呕吐毒素的检测样本数为39个,检出率为15.4%。4类真菌毒素的平均检出率约为30%左右。4类真菌毒素安全性评估结果为:黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮超标率最高,呕吐毒素安全性较好。检测结果表明,杭州市粮油类农产品真菌毒素污染广泛,部分真菌毒素超标比较严重,应该进一步加强对谷物及油料类农产品真菌毒素安全性监控工作。
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