科研产出
高产紫杉醇菌株的诱变选育及其差异表达基因消减cDNA文库的构建
《微生物学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：【目的】选育高产紫杉醇菌株,并构建选育到的高产紫杉醇菌株与出发菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库。【方法】分别采用硫酸二乙酯和紫外线与硫酸二乙酯复合诱变处理菌株HD1-3孢子;以选育到的高产紫杉醇菌株为tester,菌株HD1-3为driver,应用抑制性消减杂交技术构建选育到的高产紫杉醇菌株与菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库。【结果】试验确定的Nodulisporium sylviforme紫杉醇产生菌HD1-3孢子复合诱变的适宜条件为:将106 cfu/mL孢子悬液经过8%硫酸二乙酯处理15 min后,在电磁搅拌下,用紫外灯(30 w,距离30 cm)照射处理45 s,获得了1株遗传性状稳定、高产紫杉醇的突变株——UD14-11,其紫杉醇产量从出发菌株HD1-3的232.73±4.61μg/L提高至312.81±7.51μg/L;构建的文库滴度为1.2×107 cfu/mL,阳性克隆率75.3%,片段大小主要集中在300 bp-1.0 kb。【结论】选育到了1株遗传性状稳定、高产紫杉醇突变株;成功地构建了高产紫杉醇菌株UD14-11与菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库,为寻找、分离微生物生物合成紫杉醇相关基因和利用基因工程或代谢工程手段定向设计改造菌株奠定基础。
关键词： 紫杉醇 内生真菌 诱变育种 抑制性消减杂交 cDNA文库
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冷应激后民猪肝素结合性表皮生长因子基因表达研究
《中国畜牧兽医 》 2011 北大核心
摘要：肝素结合性表皮生长因子(hepafin-binding epidermal growth factor-like,HB-EGF)是表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)家族的成员之一。本研究采用Real-time PCR分析了在民猪冷诱导后该基因在骨骼肌内的表达变化情况。结果表明,低温组(-20℃)的HB-EGF基因的表达水平与常温组(10℃)相比出现了极显著下降(P<0.01)。据此推测,冷应激抑制了HB-EGF基因的表达,也间接抑制了民猪的正常生长。
关键词： 民猪 冷应激 HB-EGF Real-timePCR
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肝片吸虫GST真核表达载体构建及重组蛋白活性分析
《中国人兽共患病学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：目的构建肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶(GST)的真核表达载体,研究重组蛋白的免疫原性。方法以构建好的重组质粒pET30a-FhGST为模板,利用PCR技术扩增肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶基因(GST),连接真核表达载体pEGFP-N1,构建重组质粒pEGFP-GST,转染Hela细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光,Western blotting检测重组蛋白表达情况。结果重组质粒pEGFP-GST在Hela细胞中获得了表达,Western blotting结果表明真核表达质粒表达的重组蛋白能与自然感染肝片吸虫的山羊阳性血清发生特异性反应。结论肝片吸虫GST真核表达载体构建成功,真核表达产物可与自然感染的山羊阳性血清发生特异性反应,具有生物学活性,可做为分子疫苗的候选进行进一步的研究。
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黑土长期定位施肥土壤富里酸的荧光特性研究
《光谱学与光谱分析 》 2011 EI SCI 北大核心 CSCD
摘要：选取哈尔滨长期定位施肥对照处理(CK)、施用氮磷钾化肥(NPK)、有机肥马粪(OM)及有机肥与无机肥混施(MNPK)四个不同处理的土壤样品,利用荧光检测技术对土壤富里酸(Fulvic acid,FA)组分进行分析。荧光发射、激发与同步扫描主要特征峰及三维荧光图谱Peak a,b,c均显示:与CK比较,NPK处理均出现明显蓝移,而OM与MNPK出现不同程度红移,表明NPK可使土壤FA结构趋于简单化,OM与MNPK处理则使FA结构趋于复杂。通过对不同处理土壤FA荧光指数f450/500与A1 370~412 nm/A370~600 nm,A4 538~600 nm/A370~600 nm,A4/A1荧光面积积分比值等参数比较分析,进一步说明NPK处理土壤FA芳构化程度较低,而OM与MNPK长期施肥均使FA缩合度与芳构化程度升高。
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东北地区大豆品种脂肪酸组成与含量分析
《大豆科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：采用气相色谱法,对东北三省选育的172个大豆品种的脂肪酸组分进行了测定,并进行了组分间的相关性分析。结果表明:其中软脂酸和油酸分布趋势是黑龙江>吉林>辽宁。硬脂酸和亚油酸表现为辽宁>吉林>黑龙江,而亚麻酸的趋势为吉林>辽宁>黑龙江。共筛选出亚油酸含量高于57.62%的大豆品种10个,亚麻酸含量低于6.62%的品种10个,油酸含量高于29.43%的品种20个。
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野猪YFM复方麻醉剂麻醉效果的研究
《中国农学通报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为了评价YFM复方麻醉剂对野猪的麻醉效果及生理功能的影响,试验将YFM合剂以0.1mL/kg体重对野猪进行颈部肌肉注射实施全身麻醉,通过临床观察和麻醉监护仪监测野猪的麻醉效果和生理功能的变化。结果显示,YFM合剂麻醉野猪的诱导期为3.05±0.22min,麻醉期为60.20±1.72min,苏醒期为30.79±1.53min,并且其对野猪的镇静、镇痛和肌松效果良好;对呼吸和循环系统影响轻微,脉搏血氧饱和度维持在(91.30±0.40)%以上。试验证明,YFM合剂对野猪麻醉效果确实,对机体主要生理功能影响轻微。
关键词： 复方麻醉制剂(YFM合剂) 野猪 麻醉
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猪TLR4基因的变异位点分析
《中国畜牧杂志 》 2011 北大核心
摘要：Toll样受体4(TLR4)主要识别革兰氏阴性菌表面的脂多糖,其基因变异可能改变宿主对脂多糖(LPS)的免疫反应。研究利用克隆、测序的方法在TLR4基因的外显子3寻找变异位点,并利用PCR-SSCP方法对寻找到的部分错义突变进行群体遗传学分析,确定不同基因型在猪种间的分布规律。结果表明:共寻找到11个点突变,其中8个是错义突变,分别导致蛋白质多肽链141、168、204、321、343、516、535、567位氨基酸发生了L/Q、P/L、L/H、R/H、Q/K、F/S、L/F、L/P替代;对其中3个错义突变位点(611 bp、962 bp、1 027 bp)的群体遗传学分析表明,在各多态位点,基因型的分布在野猪、北京黑猪、民猪、杜洛克、长白猪和大白猪6个中外猪种间存在极显著差异(P<0.01)。
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五个品种猪脂蛋白脂酶(LPL)基因PCR-RFLP分析
《黑龙江畜牧兽医 》 2011 北大核心
摘要：为了进一步了解猪脂蛋白脂酶(LPL)基因的遗传变异情况,试验采用PCR-RFLP技术对大白猪、长白猪、杜洛克、民猪和野猪(共346头)LPL基因的第8内含子进行遗传变异研究。结果表明:经限制性内切酶HindⅢ消化后表现为3种基因型,即BB型、AB型、AA型,在该位点上只有国外猪种表现出多态性。
关键词： 猪 脂蛋白脂酶(LPL)基因 PCR-RFLP
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