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基于流式细胞仪鉴定菊芋倍性方法的建立及应用

西北农林科技大学学报(自然科学版) 2021 北大核心 CSCD

摘要:【目的】利用流式细胞仪检测菊芋种质的染色体倍性,为菊芋的种质鉴定及遗传育种研究提供基础数据。【方法】建立基于流式细胞仪检测菊芋倍性的检测体系,并针对不同电压((340,365.3和422 V))、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)添加与否、取样部位(老叶、嫩叶、块茎和根)对体系进行优化。利用建立的稳定优化体系对302份菊芋种质资源的倍性进行检测。【结果】针对菊芋材料,选取幼嫩叶片,在样品处理时添加PVP溶液消除多酚及多糖物质的干扰,检测电压选用365.3 V,以流式细胞仪进行倍性检测的效果较好,准确性较高。302份菊芋种质资源倍性检测结果表明,整体变异系数在2.17~9.74,二倍体共3份,仅占资源总数的0.99%;四倍体共25份,占资源总数的8.28%;六倍体共274份,占资源总数的90.73%。【结论】基于流式细胞仪建立的菊芋种质资源倍性鉴定方法检测效果较好,准确性较高。

关键词: 菊芋 流式细胞仪 染色体倍性 倍性检测 种质资源

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种植密度对油菜正反交组合产量与倒伏相关性状的影响

作物学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:高产抗倒不协调是油菜生产中最主要的矛盾,严重制约着油菜生产效益的进一步提高。在高密度、机械化生产模式下,这种矛盾尤为突出。受母系遗传的影响,杂交油菜的正、反交组合在产量与倒伏相关性状上常表现出明显差异,但种植密度对不同杂交组合这些关键性状的影响尚不明确。本研究针对浙油50、华航901及其正交(华航901×浙油50)与反交(浙油50×华航901)组合设置5个种植密度,考察其产量及倒伏相关性状并计算其杂种优势,研究种植密度对亲本及正、反交组合产量与倒伏相关性状的影响,为当前高密度直播生产模式下杂交油菜亲本的选配提供依据。结果表明,随种植密度增加,亲本及正、反交组合的实际产量和经济系数均呈先增后降的趋势,且无论正、反交组合,其实际产量的动态变化规律均与父本更为接近;倒伏指数在两点随种植密度的变化规律不同,但无论正、反交组合,其倒伏指数的动态变化规律均与母本相一致。在西宁试点,杂交组合产量均具有明显的平均杂种优势,且正交组合比反交组合具有更大的杂种优势;正交组合具有一定的抗倒性杂种优势,但是反交组合无抗倒性杂种优势。综上所述,高密度直播生产模式下,杂交油菜亲本选配推荐方案以高产品种为父本,抗倒性强的品种为母本进行组配,可以获得高产、抗倒性强且更适宜密植的杂交油菜品种。

关键词: 油菜 正反交组合 种植密度 产量 倒伏

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基于转录组的唐古特白刺密码子偏好性分析

干旱区资源与环境 2021 北大核心 CSCD

摘要:通过分析唐古特白刺转录组测序数据,从中筛选出28614条高质量序列为研究对象,利用CodonW、Excel等软件分析密码子偏好性使用规律。结果表明:唐古特白刺有效密码子数值分布在23.71-61之间,小于35的有94条,密码子的偏好性较弱,GC3S的平均含量为37.53%,说明唐古特白刺密码子第3位主要以A、T结尾。中性绘图、ENc-GC3S分析、偏倚分析结果表明,唐古特白刺转录组密码子偏好性主要受突变压力的影响;以ENc值和RSCU值为参考标准,最终确定28个高频密码子(RSCU>1),其中以AU结尾的有25个,以G结尾的有3个,10个最优密码子中,9个以AU结尾,说明唐古特白刺转录组偏好以A/U结尾的密码子。经过对25种植物最优密码子的偏好性分析,真菌类以G/C结尾,双子叶植物多数以A/U结尾,密码子偏好性没有明显的规律性;15种植物的叶绿体基因组最优密码子的GC3S数值在27-29之间,均以A/U结尾,呈现明显选择限制。研究结果为深入了解白刺转录组编码序列的碱基含量、密码子偏向性等基因序列特征提供信息,为有效的利用野生唐古特白刺资源提供理论基础。

关键词: 唐古特白刺 转录组 密码子使用模式 高频密码子

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青稞黑穗病菌LAMP检测体系的建立

西北农林科技大学学报(自然科学版) 2021 北大核心 CSCD

摘要:【目的】大麦坚黑粉菌(Ustilago hordei)和裸黑粉菌(Ustilago nuda)是引起青藏高原青稞黑穗病的主要病原菌,建立快速、简便、特异性强的大麦坚黑粉菌和裸黑粉菌环介导等温扩增技术(LAMP)检测体系,检测青稞种子的带菌量,再依据带菌程度进行播前种子处理,是控制青稞黑穗病的重要技术手段。【方法】根据大麦坚黑粉菌(Ustilago hordei)和裸黑粉菌(Ustilago nuda)的ITS基因序列与其他对照菌株同源性低的区段设计并获得有效引物1组,建立LAMP检测体系,并选取影响LAMP反应体系的5个主要因素dNTPs、甜菜碱、镁离子、Bst DNA聚合酶及温度进行单因素试验对其进行优化,最后对优化后的LAMP检测体系进行灵敏度和特异性检测。【结果】建立了青稞黑穗病菌的LAMP检测体系,其优化后dNTPs浓度为1.8 mmol/L、甜菜碱浓度为0.8 mmol/L、镁离子浓度为10 mmol/L、Bst DNA聚合酶浓度为320 U/mL,反应温度为65℃。应用该体系在45 min内能检测出2×10-4ng/μL的裸黑粉菌,在60 min内能检测出2×10-4 ng/μL的大麦坚黑粉菌,即在60 min内可检测出2×10-4ng/μL的大麦坚黑粉菌和裸黑粉菌。建立的青稞黑穗病菌LAMP检测体系对大麦坚黑粉菌和祼黑粉菌具有特异性。【结论】建立了青稞黑穗病菌的LAMP检测体系,该体系能在1 h内检测出2×10-4ng/μL的裸黑粉菌和大麦坚黑粉菌。

关键词: 大麦坚黑粉菌 裸黑粉菌 青稞黑穗病 环介导等温扩增技术

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西宁周边山地主要造林树种防火性能评价

林业科学研究 2021 北大核心 CSCD

摘要:[目的 ]通过对青海地区常见树种的理化性质和燃烧特性的研究,综合评价当地主要造林树种的防火性能,为该地的防火树种筛选提供一定的理论依据。[方法 ]选取常见10个树种的树叶、树皮、树枝进行理化性质测定(含水率、燃点、热值)和燃烧试验(燃烧时间、火烧强度),通过因子分析将10个树种的防火性能指标划分为抗燃性因子fa与燃烧性因子fb (包含燃烧表征因子fb1和内在燃烧因子fb2) 2个防火因子,利用Pearson相关分析和偏相关分析建立了理化性质指标与防火因子之间的联系,通过综合分析,最后对10个树种的防火性能进行了排序。[结果 ](1)燃烧表征因子fb2与树叶含水率、树皮燃点和树枝燃点,抗燃性因子fa与燃烧表征因子fb2和树叶热值存在显著的负相关关系;(2)偏相关分析后得出,树叶含水率对燃烧表征因子fb2,燃烧表征因子fb2对fa抗燃性因子有很好的反指作用;(3)分别基于燃烧试验和防火性能综合值的树种防火性能排序相似度为0.64。[结论 ]建立了所测10个树种的综合抗火性评价模型,得出了基于不同权重体系下的防火性能的排序(四翅滨藜>山杏>黄刺玫>柠条>紫丁香>沙枣>沙棘>榆叶梅>砂地柏>青海云杉),该结果对西宁及周边区域的树种栽植时防火性能参考具有实际应用和推广意义。

关键词: 理化性质 防火性能 抗燃性 燃烧性 山地造林树种

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青稞HvnRPS2基因克隆及其在条纹病胁迫下的表达分析

西北植物学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:为探索NBS-LRR类基因RPS2在青稞抗条纹病过程中的作用,该研究以抗条纹病青稞品种'昆仑14号'和感病品种'Z1141'为材料,参照转录组序列设计引物,克隆得到一个差异表达的青稞HvnRPS2基因,进行相应的生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法分析HvnRPS2基因在条纹病侵染下不同抗性青稞品种的表达模式.结果表明:(1)HvnRPS2基因全长3089 bp,无内含子,包含1个2760 bp的开放阅读框,编码919个氨基酸,理论等电点为5.93,预测蛋白分子量为104.2 kD,其编码的蛋白为亲水性蛋白,二级结构主要由无规则卷曲和ɑ-螺旋组成.(2)蛋白质多序列比对及进化树分析表明,HvnRPS2含有高度保守的NB-ARC和LRR结构域,属于NB-ARC蛋白家族成员,与大麦HvRPS2和水稻OsRPS2亲缘关系最近.(3)qRT-PCR分析显示,随着条纹病感病时间的延长,青稞HvnRPS2基因表达量呈先降低后升高再降低的模式;与正常叶片相比,感病叶片的HvnRPS2基因表达量显著下调,且感病品种表达量下调值显著低于抗病品种(P<0.01).研究认为,HvnRPS2在青稞抗条纹病过程中发挥重要的负调控作用.研究结果为进一步探究该基因在青稞抗条纹病中的调控机理奠定基础.

关键词: 青稞;HvnRPS2;基因克隆;条纹病;基因表达

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青藏高原地区马铃薯主栽品种水浸提液的化感抑草作用

江西农业大学学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:【目的】马铃薯田杂草危害给马铃薯生产带来巨大损失。为探索青藏高原地区马铃薯主栽品种的化感抑草潜力,研究青藏高原地区马铃薯主栽品种青薯9号和175号不同器官的化感抑草作用。【方法】以野燕麦(Avena fauta L.)和自生油菜(Brassica napus L)为受体,采用滤纸片生测法,分别测定铃薯青薯9号和175号根、茎、叶部分5个质量浓度水浸提液(6.3,12.5,25,50,100 g/L)的化感抑草作用。【结果】当水浸提液浓度大于25 g/L时,2种马铃薯不同器官水浸提液对受体植物种子萌发和幼苗生长的化感作用明显,总体表现出随着水浸提液浓度的升高而增强的趋势。2种马铃薯不同器官水浸提液对自生油菜的化感作用强于野燕麦,且对受体植物根长的化感作用强于芽长和鲜质量。当水浸提液浓度为100 g/L时,水浸提液对自生油菜种子萌发和幼苗生长的化感指数RI为-1.00,完全抑制自生油菜的种子萌发和幼苗生长。【结论】总体而言,175号化感作用强于青薯9号。就不同器官而言,175号叶部分和青薯9号茎部分化感作用较强。研究结果将为应用马铃薯化感物质进行生防除草剂及其先导化合物的开发提供理论基础。

关键词: 青藏高原地区 马铃薯主栽品种 水浸提液 抑草 化感作用

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不同浓度K+处理下黑果枸杞K+通道相关基因的表达水平分析

分子植物育种 2021 北大核心 CSCD

摘要:本研究利用不同浓度的K+(KCl)溶液对‘青黑杞1号’的组培幼苗进行处理,检测和分析与K+通道相关的基因在黑果枸杞中的表达模式。采用RT-PCR等方法,分析在不同浓度K+条件下,枸杞中K+通道相关基因的表达量的变化情况。结果显示:(1) 100、250和300 mmol/L K+处理后,黑果枸杞中K+通道相关基因的表达水平较低;(2)当外界K+浓度大于300 mmol/L时,部分基因的表达量上升,随着外界K+浓度的继续增加,黑果枸杞的KCO1B基因表达水平先下降后上升,而Cluster-17443.69422的表达水平先上升后下降,TPK1基因、KT1基因、Cluster-17443.10870基因和Cluster-17443.15033基因的表达量则呈下降、上升再下降的趋势。本研究结果为研究黑果枸杞钾盐胁迫调节机制提供了理论基础。

关键词: 黑果枸杞 K+通道基因 表达模式分析

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14份引进菠菜品种(系)在西宁地区温室的适应性

分子植物育种 2021 北大核心 CSCD

摘要:为了筛选适宜青海西宁地区综合表现优良的菠菜品种,为高原地区菠菜的优异品种推广提供科学依据。本研究以14个来自不同地区的参试菠菜品种(系)为材料,在西宁温室内进行品种(系)比较试验,利用相关性分析、主成分分析和隶属函数值法对参试菠菜的主要农艺性状进行比较分析和综合评价。结果表明:与菠菜单株重显著相关的性状依次为株幅、叶长、叶宽。14个菠菜品种(系)按平均隶属函数值排序为Bo3>Bo10>Bo9>Bo12>Bo7>Bo1>Bo11>Bo13>Bo2>Bo4>Bo14>Bo5>Bo6>Bo8;主成分分析将15个指标简化为5个主成分,株高、株幅、叶长、单株重、净菜率为重要的构成因素产量指标,草酸含量以及维生素C含量为重要的构成因素质量指标,在综合评价品种(系)的表现时应着重考察;聚类分析在遗传距离为5时将14个菠菜品种(系)划分为四大类,其中第玉类(Bo1, Bo2, Bo4, Bo5, Bo7, Bo11, Bo12, Bo13, Bo14)综合表现居中,第域类(Bo9, Bo10)综合表现较好,第芋类(Bo6, Bo8)综合表现最差,第郁类(Bo3)综合表现最好。综上所述,14个参试菠菜品种(系)中,Bo3、Bo9和Bo10的综合表现优良,适宜在西宁地区及周边生态环境相似的地区种植推广。

关键词: 菠菜(Spinacia oleracea L.) 品种比较 温室 适应性

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除草活性菌株HL-1产孢发酵条件研究

浙江农业学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:以分离自青海患病刺儿菜中具有除草活性的植物内生真菌HL-1菌株为研究对象,通过单因素试验筛选最适合该菌株生长的碳氮源、固态发酵基质、接种量和固-液发酵条件.结果表明:在供试的材料中最适碳源是葡萄糖,氮源是酵母浸膏;该菌株在PDA培养基中的最大产孢量是5.79×108 CFU·mL-1;而在最适碳源和最适氮源混合培养基中,它的最大产孢量是4.81×109 CFU·mL-1.菜籽饼为HL-1在供试材料中产孢最大的培养基质;在体积分数为40%接种量下,它的产孢量最大.通过正交优化试验发现该菌株在培养温度27.5℃,培养基质含水量37%,发酵时间8 d条件下,产孢量最大.

关键词: 植物内生真菌HL-1;固态发酵基质;固-液发酵条件

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