科研产出
棉花盐胁迫途径中蛋白磷酸化同源基因(GhSOS2)2种剪接体的克隆及表达分析
《中国农业科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：【目的】了解棉花在盐胁迫条件下相关基因的表达,并克隆与抗(耐)盐相关的重要基因。【方法】通过筛选棉花EST数据库,并对目标EST序列进行整合,对中棉所49在非盐胁迫和盐胁迫条件下进行处理并利用RT-PCR的方法克隆了质膜Na+/H+逆向转运蛋白途径中的1个蛋白磷酸化同源基因,命名为GhSOS2,并通过实时荧光定量PCR对其表达特征进行分析。【结果】序列分析表明,该基因成熟mRNA的剪接存在2种可选择性的剪接体,分别命名为GhSOS2a(GenBank登录号:GU188960)和GhSOS2b(GenBank登录号:GU188961),分别编码445和421个氨基酸残基。由于剪接方式的差异,导致GhSOS2a比GhSOS2b多出一个外显子(长度为72bp)。实时荧光定量PCR分析表明,GhSOS2a在非盐胁迫和盐胁迫条件下的根茎组织、叶组织均表达,但GhSOS2b仅在盐胁迫条件下的根茎组织、叶组织表达,且表达量远高于GhSOS2a。【结论】在棉花盐胁迫过程中,GhSOS2存在2种可选择性剪接体,而且可能主要是GhSOS2b参与棉花的质膜Na+/H+逆向转运蛋白途径并发挥一定作用。
沼液农田消解利用对辣椒产量、品质及土壤肥力的影响
《浙江农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：通过田间试验,研究施用沼液对大棚辣椒(Capsicum frutescensL.)产量、品质和土壤肥力的影响,探讨沼液农田消解安全用量。结果表明,沼液可全部替代辣椒生产所需化学肥料,施用相当于2~3倍化肥氮的沼液量可获得与常规化肥处理相近的辣椒产量,且辣椒品质得到改善,省肥节本效益明显;沼液消解利用还明显提高了土壤有机质、全氮、速效氮、磷、钾含量;从充分利用土壤最大限度地消解沼液,同时又能避免过量施用沼液造成二次污染的风险综合考虑,推荐大棚辣椒当季安全消解沼液量为900 t/hm2,可减排N 530.6kg/hm2,P2O537.8 kg/hm2,K2O 311.4 kg/hm2,COD 900 kg/hm2。
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橙皮苷酸催化水解工艺的研究
《食品科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：目的:探讨橙皮苷在碱性有机溶剂辅助下的酸促水解及产物的初步分离,以期通过此法来制备两种水解产物橙皮素-7-葡萄糖苷和橙皮素。方法:对影响水解的主要因素:酸的种类、水解方式、酸浓度、有机溶剂的种类和水解时间进行探讨。结果:水解的较佳条件为:橙皮苷先用氢氧化钠溶液和异丙醇组成的碱性有机溶剂溶解,再在100℃条件下酸水解,盐酸浓度为1.5mol/L,水解时间为15～45min。利用混合产物中3种物质在丙酮及其水溶液中溶解性的差异来分离纯化水解产物也取得了一定的效果。结论:橙皮苷在碱性有机溶剂辅助和一定的盐酸浓度下可以得到较好地水解。
关键词： 橙皮苷 酸水解 橙皮素-7-葡萄糖苷 分离
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诸葛菜OvCYP86MF基因的克隆及其特性分析
《核农学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：为进一步阐明细胞色素P450基因CYP86MF在诸葛菜发育中的分子机理,本文根据已知同源基因保守序列设计特异引物,利用RT-PCR和RACE技术从诸葛菜中获得一个细胞色素P450基因(OvCYP86MF)全长cDNA序列,该序列全长为1876bp,含有1605bp的完整开放阅读框,可编码534个氨基酸,分子量和等电点分别为61.4kDa和6.90,具有细胞色素P450蛋白的典型特征,即保守结构域FNAGPRLCIG;原核表达显示该基因的融合蛋白在体外可以诱导表达;DANSTAR和Clustal W软件分析表明该基因的全长cDNA序列及其编码氨基酸序列与十字花科物种拟南芥相似性很高,达到80%以上,亲缘关系最近;与CYP86C亚家族成员在氨基酸水平上的相似性均高于50%,因此推断该基因属于CYP86C这个亚家族。Northern杂交分析表明该基因在花蕾中特异表达。
关键词： 诸葛菜 OvCYP86MF基因 克隆 表达
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猪伪狂犬病毒浙江株感染性细菌人工染色体克隆的构建
《病毒学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：通过同源重组将携带细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)载体和GFP表达框的pHA2质粒序列插入到PRV病毒的UL23(TK)基因内,获得了重组病毒rPRV-HA2;将该重组病毒的环状基因组电转化到感受态细胞EscherichiacoliDH10B,筛选到病毒的感染性克隆PRV BAC(pPRV)。pPRV转染VeroE6细胞可以重新启动病毒的生产性感染,该拯救病毒的细胞病变和体外增殖特性与rPRV-HA2一致。病毒生长曲线表明TK基因的部分删除和BAC载体的插入不会影响病毒在体外的复制。PRV感染性BAC克隆的成功构建,将方便在大肠杆菌内对病毒基因组进行快速、准确的操作,为进一步开展PRV基因功能和病毒载体研究奠定基础。
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水稻与病原物互作蛋白质组学研究进展
《中国水稻科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：植物与病原物互作的分子机制一直是植物病理学研究的热点。近年来,功能基因组学研究策略,包括蛋白质组学和转录组学,已广泛应用于基因、蛋白的功能鉴定和表达谱研究。蛋白质组学作为转录组学研究的一个互补内容,已成为系统研究植物应答病原物侵染的蛋白质表达谱和翻译后修饰的有力工具。水稻作为已完成基因组测序的单子叶植物,是研究植物与病原物互作分子机理的理想模型。因此,着重介绍了蛋白质组学的研究技术,水稻响应细菌、真菌及病毒等病原物侵染的蛋白质组学研究进展和水稻与病原物互作磷酸化蛋白质组学的概况。
关键词： 水稻 病原物 蛋白质组学 植物与病原物互作 研究技术
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