科研产出
少动鞘氨醇单胞菌ZX4儿茶酚2，3-双加氧酶基因的克隆与表达
《上海农业学报 》 2007 CSCD
摘要：应用PCR方法克隆了少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)ZX4菌株的儿茶酚2,3-双加氧酶基因(c230-ZX4)。核苷酸序列测定与分析表明,该基因片段全长924 bp且具有一个完整的阅读框,编码306个氨基酸残基。该基因与已报道的来自菌株S.yanoikuyae B1和Sphingomonas sp.KMG425的xylE基因(编码产物均为C230)具有较高的核酸序列同源性,分别为94.37%和94.05%。通过HindⅢ和XhoⅠ两个限制性酶切位点将该基因连接到质粒pET30(a)+上得到重组表达质粒pET-S3,并在E.coli BL21进行了表达,得到了42.3 kD的融合蛋白。酶活测定发现该基因工程菌株的发酵产酶活力明显高于出发菌株。
关键词： 菲降解 少动鞘氨醇单胞菌 儿茶酚2，3-双加氧酶基因
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猪场粪便污水PSB液肥化及其应用研究
《农业环境科学学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：通过光合细菌(Photosyntheticbacteria,简称PSB)培养试验研究了猪粪便污水光合细菌液肥化技术,并对获得的PSB液肥通过无土栽培和田间小区试验在绿豆插条、番茄和青菜上进行了应用研究。结果表明,用猪粪便污水培养光合细菌生产PSB液肥是可行的;猪粪便污水发酵液通过8d培养获得的光合细菌液肥的PSB总数达4.6×108MPN·mL-1。光合细菌液肥能明显促进绿豆插条不定根发生,其中稀释200倍液的绿豆不定根数量、长度和生物量与蒸馏水相比,分别是蒸馏水的124%、157%和173%,而且不定根出现时间一般比蒸馏水提早3d。PSB液肥还能提高番茄叶片和青菜叶绿素含量,提高番茄和青菜Vc含量及产量,降低硝酸盐、亚硝酸盐含量。猪粪便污水光合细菌液肥化技术,可为农业循环经济的实施提供很好的技术支持,有助于禽畜养殖业的可持续发展。
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转拟南芥ATNHX1基因促进烟草对钾吸收的研究
《高技术通讯 》 2007 EI 北大核心 CSCD
摘要：提取拟南芥总RNA,反转录合成NA+/H+逆向转运蛋白基因ATNHX1,构建了植物高效表达载体,用叶盘法将其导入烟草,经筛选获得了抗卡那霉素和GUS染色阳性的转化子38株.应用荧光定量PCR方法对转化材料部分含ATNHX1基因的烟草内源钾通道基因、烟草K+转运蛋白基因和烟草焦磷酸酶基因的转录水平进行了分析.结果表明:在转化烟草中可以检测到ATNHX1基因MRNA,与未转化材料相比,烟草钾离子转运蛋白基因NTHAK1的转录降低,H+-ATPASE基因NHA1转录增加,钾通道基因NKT转录无显著变化,T1代转化烟叶中K+含量显著增加,NA+、CA2+无显著变化,烟叶中总糖含量降低,证明了编码拟南芥ATNHX1基因与植物的K+吸收有关.
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药用真菌桑黄液体深层发酵条件的优化
《微生物学通报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：以菌丝体生物量和多糖产量为主要指标,对桑黄(鲍氏层孔菌)的深层发酵条件进行了优化,通过单因素试验和四因素三水平正交试验筛选出了桑黄液体发酵的培养基,结果表明,最适培养基为:葡萄糖5g/L,玉米粉40g/L,豆饼粉20g/L,KH2PO41.5g/L,MgSO41g/L。进一步通过培养条件的优化,得到最适菌丝体生长的液体发酵条件为:培养温度28℃,摇床转速140r/min,pH值自然,接种量10%,装液量100mL(250mL三角瓶),发酵周期132h。
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不同水平活性肽对肉仔鸡生产性能、免疫能力、T4水平的影响
《上海农业学报 》 2007 CSCD
摘要：试验选用1日龄健康红宝公鸡104只,随机分成4组。1~3组每只在0~14日龄分别给予活性肽1.36 mg/d、1.78 mg/d、2.36 mg/d,第4组为对照组。试验期为8周。结果表明:(1)0~14日龄给予肉鸡活性肽能显著提高肉鸡2、4、6、8周体重(P≤0.05),6周前剂量反应显著;(2)试验2组和3组在第2周、第8周血清中乳酸脱氢酸(LDH)、在第8周肌酸激酶(CK)活性显著降低(P≤0.05);(3)试验的第4、8周,试验2组和3组血清中T4的水平显著升高(P≤0.05);(4)胸肌中水分、脂肪和蛋白质的含量受活性肽的影响不显著。可见,活性肽能影响肉鸡的生产性能、免疫能力和内分泌。
关键词： 肉仔鸡 活性肽 生产性能 乳酸脱氢酶 肌酸激酶 甲状腺素
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核酸探针检测鸡传染性支气管炎病毒方法的建立及应用
《中国兽医学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：以地高辛(DIG)标记鸡传染性支气管炎病毒(IBV)pol基因的保守片段制成核酸探针,与IBV参考株、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、禽流感病毒、正常鸡胚尿囊液及正常鸡肾组织等的RT-PCR产物进行斑点杂交,以检测探针的特异性,结果该探针仅与IBV毒株的RT-PCR产物杂交呈阳性,与对照病毒和组织的RT-PCR产物杂交呈阴性。敏感性试验显示,探针最低能检出约3.4pg的IBVRT-PCR产物。用该方法检测了38份疑似IBV临床病料,31份阳性;而用RT-PCR法扩增IBVS2基因确诊为阳性的只有29份。对人工接种IBV H52弱毒苗鸡咽喉和肛门拭子32份进行检测,检出15份阳性。结果表明,利用DIG探针检测IBV的RT-PCR产物,特异性和敏感性强,可重复,能克服RT-PCR非特异性反应和探针Northern杂交的不稳定性。
关键词： 传染性支气管炎病毒 DIG探针 RT-PCR 检测 鸡
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实验小鼠感染小鼠肝炎病毒后的抗体变化
《上海农业学报 》 2007 CSCD
摘要：采用MHV-A59标准毒株通过3种途径(腹腔、滴鼻、灌胃)对6个品系的实验小鼠(BALB/c、C57、nu/nu、NIH-Ⅲ、IL-4T、IL-10T)进行了病毒感染。通过检测小鼠感染后1个月内不同时段的抗体变化,发现小鼠在感染MHV后,血清转阳一般发生在感染后5-7 d,3周左右特异性IgG水平达到高峰;而特异性IgM水平出现上升时间比IgG早,3 d左右开始升高,7 d到达高峰,3周后开始下降。不同品系小鼠由于遗传背景不同,对MHV的易感性和耐受性存在明显差异。不同感染途径之间也存在着一定的差异,腹腔感染MHV的小鼠抗体转阳时间和IgG、IgM高峰水平出现的时间都较滴鼻和灌胃途径早,而滴鼻感染MHV后小鼠抗体转阳时间出现较晚,但其维持时间较长,认为MHV感染后产生免疫力的持久性在很大程度上取决于免疫途径的选择。
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