科研产出
降解赤霉病菌毒素Tri101基因的原核表达及抗体制备
《植物病理学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要:采用RT-PCR方法克隆了编码禾谷镰刀菌单端孢酶烯3-O-乙酰转移酶Tri101基因的cDNA序列,并连接到原核表达载体pGEX-4T2上,将获得的重组载体pGEX-4T2/Tri101转化大肠杆菌BL21后用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot分析表明,经IPTG诱导后,Tri101基因在大肠杆菌BL21中获得了高效表达,融合蛋白GST-Tri101分子量为75.45 kDa。将该融合蛋白切胶纯化后免疫家兔,制备兔抗GST-Tri101多克隆抗体。经ELISA法测定抗体效价大于1∶256 000。Western blot分析表明制备的抗体与原核细胞体外表达的Tri101蛋白可以特异性结合,表明该抗体的特异性良好。应用该抗体验证了感赤霉病小麦中Tri101基因的表达。兔抗GST-Tri101抗体的成功制备,为进一步研究Tri101的生物学功能、细胞定位以及在其它植物中的表达等奠定了基础。
关键词: Tri101基因 原核表达 多克隆抗体 Western blot
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土壤改良剂的研究现状、问题与展望
《河南农业科学 》 2010 北大核心
摘要:系统阐述了土壤改良剂的原料、成分、分类、制作原理及其作用机制,探讨了土壤改良剂的研究现状、应用状况和存在的主要问题,展望了今后的研究重点与趋势。
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不同土壤水分条件下保水剂对小麦幼苗生理特性的影响
《河南农业科学 》 2010 北大核心
摘要:采用盆栽试验研究了不同土壤水分条件、不同用量保水剂对小麦幼苗生理特性的影响。结果表明,在严重干旱处理下,保水剂对小麦幼苗产生抑制作用,随保水剂用量增加,小麦幼苗的叶片相对含水量、叶绿素含量、根系活力呈下降趋势,叶片饱和亏缺、可溶性糖含量、脯氨酸含量、丙二醛含量呈上升趋势;在中等干旱处理下,保水剂作用效果最佳,对小麦幼苗的生理代谢有明显的促进作用。不同用量保水剂在不同指标间效果差异表现不同。在充足水分处理下,保水剂对小麦幼苗的生理代谢作用低于中等干旱处理。中度干旱下施用保水剂效果最明显,并以60 kg/hm2用量为最佳。
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征的流行病学调查及防制
《中国畜牧兽医 》 2010 北大核心
摘要:通过对河南省部分不同规模猪场进行调查和实验室检测,获取有关高致病性猪繁殖与呼吸综合征(H-PRRS)流行病学的相关情况。结果表明,河南省很多地区存在H-PRRS,各地区间无明显差异;以20~70日龄仔猪的发病率最高;送检的277份样品H-PRRSV阳性率达23.8%;小型猪场发病率明显高于大型猪场。提示H-PRRSV在河南危害严重,应采取行之有效的措施加以防控。
关键词: 高致病性猪繁殖与呼吸综合征 流行病学 防制
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牛Oct4基因克隆及其逆转录病毒表达载体的构建
《农业生物技术学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要:为了克隆奶牛Oct4基因开放性阅读框全序列,并建立高效、稳定产生逆转录病毒质粒pMSCV-Oct4的包装细胞株。我们以50~60日龄的胎牛原始生殖嵴为材料,用RT-PCR的方法扩增出牛Oct4基因全序列,全长为1083bp与GenBank公布的序列的同源性为99.4%。将其插入到逆转录病毒载体pMSCVneo的多克隆位点,获得重组逆转录病毒质粒pMSCVneo-Oct4。鉴定正确后,通过Lipofectamine2000将其转导入包装细胞PT67,用含有G418的培养液进行抗性筛选,获得阳性细胞克隆。细胞上清经过RT-PCR、透射电镜及病毒滴度测定等方法鉴定,证实所包装病毒存在,其滴度值为8.83×107cfu/mL。试验结果表明我们已获得携带牛Oct4基因的高滴度感染性逆转录病毒。
关键词: Oct4基因 克隆 逆转录病毒载体pMSCV 牛
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黄淮冬麦区小麦品种品质改良现状分析
《麦类作物学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要:为了解近年来黄淮冬麦区小麦品质改良状况,对2000-2009年黄淮冬麦区324个区试品种(系)的容重、蛋白质含量、湿面筋、沉降值、吸水率、稳定时间、拉伸面积和最大抗延阻力等品质性状进行了分析。结果表明,黄淮冬麦区小麦籽粒蛋白质和湿面筋平均含量较高,黄淮南片冬水组、春水组和黄淮北片水地组三组参试品种在这两个指标上都达到强筋小麦国家审定标准,但面筋强度较差,蛋白质质量不高,表现为稳定时间、沉降值、拉伸面积和最大抗延阻力等性状的值都偏低,特别是黄淮北片在这几个性状值上都低于黄淮南片。近年来黄淮冬麦区加强了对这4个性状的改良,各性状值稳中有升。因此,当前黄淮麦区小麦品质改良的重点是加强蛋白质质量的改良,使各性状综合平衡发展。
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玉米干旱诱导表达基因ZmBTF3b的克隆与表达分析
《中国农业科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要:【目的】克隆玉米ZmBTF3b并研究其参与逆境反应的分子机制,为揭示玉米抗逆分子机制奠定基础。【方法】应用生物信息学方法分析ZmBTF3b启动子序列特点;应用酵母单杂交方法验证该基因编码转录因子的转录激活活性;应用实时荧光定量PCR方法分析ZmBTF3b在玉米不同组织中的表达差异及其在非生物胁迫下的表达模式。【结果】从玉米抗旱自交系CN165中克隆得到干旱诱导表达基因ZmBTF3b,该基因编码蛋白含有169个氨基酸,具有新生多肽复合体(nascent polypeptide-associated complex,NAC)保守结构域;酵母单杂交试验证明ZmBTF3b具有转录激活功能;实时荧光定量PCR结果表明,ZmBTF3b在玉米花丝、幼穗、幼胚中表达量较高。ZmBTF3b受脱水干旱胁迫和PEG模拟干旱胁迫诱导根上调表达,而受冷、NaCl、ABA和SA诱导下调表达。【结论】ZmBTF3b编码蛋白具有转录因子的基本特性,在应答逆境胁迫特别是干旱胁迫时起重要作用。
L-肉碱对母猪繁殖性能的影响
《饲料研究 》 2010 北大核心
摘要:随着养猪行业的不断发展和猪群规模的扩大,改善母猪的繁殖性能已成为养猪行业获取更大经济效益的一项重要举措。提高母猪的繁殖性能,让母猪在有限的生产年限内提供更多优良的断奶仔猪是关系养猪业能否持续发展的重要内容。近年来,随着人们对L-肉碱研究的深入,发现L-肉碱不仅
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