大豆DNA导入引起大麦籽粒蛋白含量及氨基酸含量变异的遗传稳定性分析

毛万霞; 许燕; 张国荣; 李建粤; 吕英海; 陆雪琴; 《种子 》 2003 北大核心 CSCD

摘要：采用花粉管通道法和两种不同压力基因枪法将大豆总DNA导入大麦,提高了大麦后代籽粒的蛋白质含量和必需氨基酸含量。四代大麦籽粒蛋白质含量追踪分析及第四代籽粒氨基酸含量分析结果表明,部分大麦籽粒的高蛋白含量及质量变异性状能够稳定遗传。本试验还分析比较了两种DNA导入法,采用基因枪法比花粉管通道法在保持后代高蛋白遗传稳定性方面效果更好。在两种不同压力基因枪处理中,1300psi压力处理比1500psi压力处理更适合大豆总DNA的导入。在本试验中我们还获得了两个高蛋白性状较稳定的穗行,它们的蛋白质平均含量分别比对照提高20.67%和7.991%。

关键词： 大麦 大豆 外源DNA导入 蛋白质含量 氨基酸含量 遗传稳定性

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通过根癌农杆菌介导的共转化获得具有蜡质基因反义片段的转基因水稻

沈革志; 殷丽青; 王新其; 蔡秀玲; 王宗阳; 《植物生理与分子生物学学报 》 2003 北大核心 CSCD

摘要：在构建剔除潮霉素抗性基因的反义蜡质基因重组质粒p1 3W8的基础上 ,用分别携带p1 3W8质粒和有潮霉素抗性基因的pCAMBIA1 3 0 0质粒的根癌农杆菌 ,在不同处理条件下对粳稻 3个品种进行共转化。试验结果显示 ,共感染混合液中pCAMBIA1 3 0 0菌液比例高 ,抗性愈伤组织的转化频率也较高 ;抗性愈伤组织的PCR检测结果表明 ,潮霉素抗性基因的阳性检测率为 98% ,反义蜡质基因的阳性检测率为68%。在 1 0 5株转基因植株中 ,反义蜡质基因阳性株为 3 0株 ,占转基因植株的 2 8.6%。乙酰丁香酮处理组的平均转化频率略高于未处理组 ;在乙酰丁香酮的各种处理中 ,直接浸泡愈伤组织的转化频率稍高于其它处理方式。

关键词： 反义蜡质基因 共转化 根癌农杆菌 转基因水稻

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鲨烯合酶的研究进展

赵明文; 钟家禹; 王南; 梁婉琪; 潘迎捷; 《微生物学报 》 2003 北大核心 CSCD

关键词： 鲨烯合酶 灵芝酸 三萜 萜烯类化合物

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不同烘干时间对丸粒化青菜种子含水率与发芽出苗率之影响

李明; 周志疆; 王文娟; 范林华; 《上海农业学报 》 2003 CSCD

摘要：采用保湿培养法测定丸粒化种子的发芽率,穴盘播种法测试丸粒化种子的出苗率,结果表明: 35℃、5.5h的恒温烘干处理种子可使丸粒化种子的水分含量降到国家规定的范围之内,并且不影响种子出苗。

关键词： 丸粒化种子 青菜 含水率

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基于MySQL和Perl Fcgi的上海市农业专家网的建立

袁小华; 高秀梅; 马桂莲; 张琴; 尹金明; 王遗宝; 朱裕梅; 《上海农业学报 》 2003 CSCD

摘要：搜集整理了1996年以来有关出版著作中的上海市农业专家资料,通过问卷调查的方式,对部分专家的资料进行了添加和更新,采用MySQL-NT工具,建立了上海市农业专家数据库和数据更新维护方法,结合Perl Fcgi技术,最后建立了上海市农业专家网。该项工作初步建立了可让社会通过网络了解上海市农业专家的途径,为农业专题信息网络化的实现提供了一个范例。

关键词： 上海农业专家网 MySQL-NT数据库 Perl Fcgi技术

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中国(大陆)蔬菜流通市场研究

俞菊生; 《上海农业学报 》 2003 CSCD

摘要：蔬菜是我国人民生活消费中的重要副食品 ,中国大陆各地把发展蔬菜生产作为调整农业结构、应对加入世贸组织挑战的战略措施之一 ,蔬菜生产规模全面扩大。我国蔬菜年产量已达 4亿多t,蔬菜产值已达2 80 0亿元人民币 ,仅次于粮食的 460 0亿元人民币 ,位居农产品第二位 ,蔬菜的种类、产量、人均消费量和出口量均居世界前列。因此 ,研究蔬菜市场有着特别重要的意义。本文着重报道蔬菜产业概况 ;流通体制 ;“菜篮子工程”建设 ;批发市场 ;上海市蔬菜生产和流通 ;蔬菜市场的发展展望。以供各级蔬菜主管部门和蔬菜科研机构参考

关键词： 中国 蔬菜 流通 市场

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转基因抗草甘膦油菜的实用PCR检测方法

潘爱虎; 张大兵; 潘良文; 陈家华; 袁政; 梁婉琪; 《中国农业科学 》 2003 北大核心 CSCD

摘要：利用定性PCR技术 ,建立了检测孟山都公司培育的转基因抗草甘膦油菜中的epsps、gox和fmv35s的方法 ,同时设立了阳性内对照napin。该方法的检测灵敏度为 0 .0 5 %。利用复合PCR可以在一个PCR反应中同时检测出epsps、gox、fmv35s和napin基因。这种方法可以有效地用于转基因抗草甘膦油菜中的外源基因的检测。

关键词： 转基因油菜 聚合酶链式反应 复合PCR 检测方法 草甘膦抗性

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信号肽序列对毕赤酵母表达外源蛋白质的影响

熊爱生; 彭日荷; 李贤; 范惠琴; 姚泉洪; 郭美锦; 张嗣良; 《生物化学与生物物理学报 》 2003 SCI 北大核心 CSCD

摘要：乙醇氧化酶启动子被分离、克隆 ,并建立了转化方法后 ,毕赤酵母已被发展成为一种高效的外源蛋白表达宿主。为了进一步提高外源蛋白质的分泌表达 ,对信号肽序列进行了研究。首先按毕赤酵母的偏爱密码合成了酿酒酵母的α因子信号肽序列MF4I,随后在MF4I信号肽序列的N端分别引入 1～ 10个毕赤酵母Aox1蛋白质的N端氨基酸 ,构成 10种不同的分泌信号肽序列 ,10种不同的分泌信号肽序列被用于植酸酶基因的毕赤酵母分泌表达。以上新的信号肽序列都可使植酸酶的分泌表达量增加 ,而以N端增加A、I、P三个氨基酸的信号肽序列引起的提高最大 ;和野生型的酿酒酵母α因子信号肽序列相比 ,使植酸酶分泌表达量增加 5倍 ,摇瓶中植酸酶的分泌表达量为 90mg/L。此外在MF4I信号肽的引导序列和内切蛋白酶间增加了EEAEAEAEP和K共 10个氨基酸 ,进一步提高信号肽的分泌效率 ,使表达又提高约 35 % ,使得摇瓶中酸性植酸酶的表达量达到 12 0mg/L ,是pPCI9K表达量的 8倍。

关键词： 毕赤酵母 信号肽序列 表达载体 高效表达

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大肠杆菌热不稳定肠毒素无毒突变体LTR72基因重组质粒的构建

葛艳; 尤永进; 徐泉兴; 陈波; 饶忠; 《上海农业学报 》 2003 CSCD

摘要：用PCR方法扩增大肠杆菌LT基因 ,将LT基因重组入pET32a质粒载体 ,对构建的重组质粒pET LT进行酶切、核苷酸序列分析 ,结果表明 ,插入片段LT的核苷酸序列与预期一致 ,且阅读框正确。并在影响LT毒性的关键氨基酸位点 ,用PCR方法引入点突变 (丙氨酸→精氨酸 ) ,成功构建了含有LTR72突变体基因的重组质粒pET LTR72。

关键词： 大肠杆菌 热不稳定肠毒素 突变体LTR72

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解决“陈化粮”问题的对策研究

俞菊生; 王勇; 《上海农业学报 》 2003 CSCD

摘要：和国内其它地方一样,上海市也因建立地方粮食储备及粮食收储企业的库存周转等原因产生了“陈化粮”,它给地方财政、银行、粮食企业所造成的压力,急待消除。本研究项目围绕“陈化粮”形成的原因及克服的办法开展调研,主要研究了“陈化粮”的成因、危害、处理难点和对策措施。为领导和粮食流通部门研究解决“陈化粮”问题提供了抉择参考。

关键词： 陈化粮 危害 流通体制 对策措施

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