科研产出
基于MySQL和Perl Fcgi的上海市农业专家网的建立
《上海农业学报 》 2003 CSCD
摘要：搜集整理了1996年以来有关出版著作中的上海市农业专家资料,通过问卷调查的方式,对部分专家的资料进行了添加和更新,采用MySQL-NT工具,建立了上海市农业专家数据库和数据更新维护方法,结合Perl Fcgi技术,最后建立了上海市农业专家网。该项工作初步建立了可让社会通过网络了解上海市农业专家的途径,为农业专题信息网络化的实现提供了一个范例。
关键词： 上海农业专家网 MySQL-NT数据库 Perl Fcgi技术
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中国(大陆)蔬菜流通市场研究
《上海农业学报 》 2003 CSCD
摘要：蔬菜是我国人民生活消费中的重要副食品 ,中国大陆各地把发展蔬菜生产作为调整农业结构、应对加入世贸组织挑战的战略措施之一 ,蔬菜生产规模全面扩大。我国蔬菜年产量已达 4亿多t,蔬菜产值已达2 80 0亿元人民币 ,仅次于粮食的 460 0亿元人民币 ,位居农产品第二位 ,蔬菜的种类、产量、人均消费量和出口量均居世界前列。因此 ,研究蔬菜市场有着特别重要的意义。本文着重报道蔬菜产业概况 ;流通体制 ;“菜篮子工程”建设 ;批发市场 ;上海市蔬菜生产和流通 ;蔬菜市场的发展展望。以供各级蔬菜主管部门和蔬菜科研机构参考
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信号肽序列对毕赤酵母表达外源蛋白质的影响
《生物化学与生物物理学报 》 2003 SCI 北大核心 CSCD
摘要：乙醇氧化酶启动子被分离、克隆 ,并建立了转化方法后 ,毕赤酵母已被发展成为一种高效的外源蛋白表达宿主。为了进一步提高外源蛋白质的分泌表达 ,对信号肽序列进行了研究。首先按毕赤酵母的偏爱密码合成了酿酒酵母的α因子信号肽序列MF4I,随后在MF4I信号肽序列的N端分别引入 1～ 10个毕赤酵母Aox1蛋白质的N端氨基酸 ,构成 10种不同的分泌信号肽序列 ,10种不同的分泌信号肽序列被用于植酸酶基因的毕赤酵母分泌表达。以上新的信号肽序列都可使植酸酶的分泌表达量增加 ,而以N端增加A、I、P三个氨基酸的信号肽序列引起的提高最大 ;和野生型的酿酒酵母α因子信号肽序列相比 ,使植酸酶分泌表达量增加 5倍 ,摇瓶中植酸酶的分泌表达量为 90mg/L。此外在MF4I信号肽的引导序列和内切蛋白酶间增加了EEAEAEAEP和K共 10个氨基酸 ,进一步提高信号肽的分泌效率 ,使表达又提高约 35 % ,使得摇瓶中酸性植酸酶的表达量达到 12 0mg/L ,是pPCI9K表达量的 8倍。
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大肠杆菌热不稳定肠毒素无毒突变体LTR72基因重组质粒的构建
《上海农业学报 》 2003 CSCD
摘要：用PCR方法扩增大肠杆菌LT基因 ,将LT基因重组入pET32a质粒载体 ,对构建的重组质粒pET LT进行酶切、核苷酸序列分析 ,结果表明 ,插入片段LT的核苷酸序列与预期一致 ,且阅读框正确。并在影响LT毒性的关键氨基酸位点 ,用PCR方法引入点突变 (丙氨酸→精氨酸 ) ,成功构建了含有LTR72突变体基因的重组质粒pET LTR72。
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口蹄疫病毒非结构蛋白3B真核表达载体的构建及表达
《中国预防兽医学报 》 2003 北大核心 CSCD
摘要：设计、合成FMDV非结构蛋白 3B基因的PCR引物 ,并在引物 5’端和 3’端分别加入含BamHI和HindⅢ限制性酶切位点序列。以FMDV基因组RNA为模板 ,利用RT_PCR技术扩增 3B基因 ,得到的基因片段经BamHI/HindⅢ双酶切后与转座载体pFASTBACHTa连接 ,转化宿主菌DH10BAC ,在含庆大霉素、卡那霉素、X_gal、IPTG的LB平板上 37℃培养 2 4h ,提取白色菌落 ,从中提取重组穿梭载体Bacmid 3B ,与脂质体共同转染昆虫细胞sf9,得到重组杆状病毒 ,病毒经传代扩增后感染High 5细胞 ,表达目的蛋白———FMDV非结构蛋白 3B。SDS_PAGE及WesternBlot结果显示 ,本研究成功构建了Bacmid_3B重组表达载体 ,并在昆虫细胞中表达了NSP_3B蛋白 ,该表达产物可与FMDV感染的猪、牛血清产生免疫反应。
淡剑夜蛾的生物学特性及防治研究
《上海农业学报 》 2003 CSCD
摘要：淡剑夜蛾[Sidemia depravata(Butler)]在上海地区年发生4-5代,世代重叠,以老熟幼虫和蛹在土中越冬;整个世代历期(第3代)33.3d(卵3.5d,幼虫18.9d,蛹5.7d,成虫5.2d);3龄前幼虫食量小,4龄后食量大增,特别是6龄期食量占总食量的91.3％。每年7、8、9三个月为幼虫危害高峰期,以高羊茅草坪受害最重。田间防治试验表明,10％除尽(Chlorfenapyr)SC、24％米满(Tebufenozide)SC、40％毒丝本(Chlorpyrifos)EC、5％卡死克(Flufenoxuron)EC和5％抑太保(Chlorfluazuron)EC1000-1500倍均有良好的防治效果。
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西瓜体细胞无性系变异初探
《上海农业学报 》 2003 CSCD
摘要：对西瓜体细胞无性系变异进行了初步研究,结果表明:西瓜未成熟子叶和幼苗子叶的再生植株中存在明显的变异,其中以四倍体变异最为普遍,再生植株叶片气孔大小和保卫细胞内叶绿体数目可以作为从再生植株中早期鉴别四倍体植株的可靠指标。此外再生植株中还出现无权、浅裂刻叶和板叶变异类型,且有嵌合变异现象。RAPD分析结果表明,西瓜再生植株的基因组DNA在供试的部分引物上表现出DNA多态性。
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信号转导抑制剂对囊素刺激杂交瘤细胞抗体分泌及其mRNA表达的影响
《南京农业大学学报 》 2003 北大核心 CSCD
摘要：以杂交瘤细胞为模型 ,在培养液中加入不同的信号转导抑制剂和囊素 ,用间接ELISA法测定抗体分泌水平 ,用定量RT PCR法检测抗体mRNA的表达水平。结果表明 ,加入Gα 蛋白选择性抑制剂NF 0 2 3、蛋白激酶C抑制剂GF10 92 0 3X、磷脂酰肌醇 3激酶抑制剂heparin、Ca2 + /calmodulin依赖蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN 6 2、磷脂酶C抑制剂U 7312 2和蛋白激酶G抑制剂后 ,囊素对杂交瘤细胞抗体分泌速度的影响明显 (P <0 0 1)。而加入蛋白激酶A抑制剂 4 Cyano 3 M thylisoquinoline、酪氨酸蛋白激酶抑制剂 genistein和丝裂原活化的蛋白激酶抑制剂PD 980 5 9后 ,囊素对杂交瘤细胞抗体分泌速度的影响不明显 (P >0 0 5 ) ,这 3种抑制剂对杂交瘤细胞抗体分泌速度的抑制率分别为 74 5 5 % ,91 13%和80 6 9%。加入 4 Cyano 3 M thylisoquinoline、genistein和PD 980 5 9后 ,囊素处理组与对照组γ1mRNA的表达水平差异不显著 (P >0 0 5 ) ,说明这 3种抑制剂阻断了囊素刺激的杂交瘤细胞抗体mRNA的表达。以上结果表明 ,蛋白激酶A、酪氨酸蛋白激酶和丝裂原活化的蛋白激酶参与了囊素在杂交瘤细胞中的信号转导。
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