科研产出
大棚耐热结球白菜新品种筛选及综合栽培技术初报
《上海农业学报 》 2001 CSCD
摘要：利用培育出的优良早熟耐热结球白菜 (BrassicacampestrisL .)新组合进行保护地栽培品比试验 ,筛选出了适合大棚设施栽培的结球白菜新品种C3;比较了不同栽培基质、各种营养液配方对结球白菜生长的影响 ,筛选出了适于结球白菜生长、成本较低的基质和营养液 ;根据结球白菜的生长特点 ,为了抵御高温 ,经比较试验 ,得出了早期覆盖遮阳网能够促进生长而获得高产的结球白菜耐热栽培技术
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反向PCR克隆转基因水稻的外源基因旁侧序列
《上海农业学报 》 2001 CSCD
摘要：以反向PCR(IPCR)为基础建立了适合于处理大量材料的克隆转基因水稻中外源基因旁侧序列的技术体系。该方法中用小量法提取转基因水稻总DNA ;总DNA用 10倍过量的限制性内切酶在 50 μL反应体积中进行过夜酶切 ;酶切片段在 2 0 μL体积中进行自连接 ,之后进行套式PCR(nested PCR)扩增旁侧序列。在套式PCR中结合了热启动PCR和降落PCR技术以增强PCR反应的特异性。用这种方法 ,本实验室在一周内克隆了 35个转基因水稻株系中外源基因的旁侧序列 ,长度在 30 0～ 750bp之间 ,PCR产物的特异性用Southern杂交进行了证明。实验结果表明这个方法具有快速、稳定和高效的优点。
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拮抗青枯病90B4-2-2菌株模拟生产发酵工艺研究
《上海农业学报 》 2001 CSCD
摘要：90B4 2 2菌株的培养及最大菌落数产生的发酵模拟生产工艺条件 ,正交试验得到最适培养基碳、氮源组成为 ( % ) :黄豆饼粉 1.0 ,淀粉 1.5,酵母粉 0 .8;最适生长温度为 30℃ ;pH7.0 ,接种量 4 % ,在 2 50mL三角瓶中装 70mL培养基 ,2 0 0r/min摇床上培养 35h ,菌落数为 6.69×10 9CFU/mL ;上罐 ( 1～ 2t)发酵 2 2h ,终点总的菌落数为 ( 1.85～ 2 .50 )× 10 10 CFU/mL。
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影响小鼠转基因原核胚体外发育的若干因素
《中国兽医学报 》 2001 北大核心 CSCD
摘要：探讨了显微注射不同浓度的外源 DNA以及温度、培养基等对小鼠原核胚体外培养发育能力的影响。显微注射 1 .5、1 5、3 0 mg/L的衰变加速因子 ( CD55)、膜反应溶解因子 ( CD59)基因后 ,小鼠原核胚发育到囊胚的比率随 DNA质量浓度的升高而依次降低为 57.7%、3 6.6%、1 0 .4 % ,差异极显著 ( P <0 .0 1 )。注射 1 .5mg/L外源 DNA,原核胚的囊胚率 ( 57.7% )比对照组 ( 54.5% )稍有提高 ,但差异不显著 ( P >0 .0 5)。 1 .5mg/L为本试验最佳外源 DNA注射质量浓度。 3 7℃、CZB培养液或改进的 Whitten氏培养液 ,可取得较好的体外培养效果。
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0～6周龄蛋雏鸡钙需要量的研究
《上海农业学报 》 2001 CSCD
摘要：为了研究 0～ 6周龄蛋雏鸡适宜钙需要量 ,试验设计了不同日粮钙水平 (0 .7,0 .8,0 .9,1.0 ,1.1,1.2 % )对该阶段蛋雏鸡的生长性能、骨骼质量和血清有关指标的影响。结果表明 ,在 0～ 6周龄期间 ,钙水平为 0 .9%和 1.0 %的处理组全程增重最大 ,分别为 4 4 6 .4 4± 39.2 2 g和4 55.96± 39.4 9g ,两者间差异不显著。 1.0 %处理组增重显著高于其它 4组 (P <0 .0 5) ;0 .9%的处理组增重显著高于 1.1%和 1.2 %处理组 (P <0 .0 5) ,和 0 .7%和 0 .8%处理组相比尽管差异不明显 ,但也表现出较优的增重性能。 0 .7%和 0 .8%的处理组增重明显优于 1.1%和 1.2 %处理组(P <0 .0 5)。料重比也表现出类似的规律 ,即 0 .9%～ 1.0 %处理组最低 ,0 .7%～ 0 .8%其次 ,1.1%～ 1.2 %最高。从统计学角度考察 ,骨钙、骨磷和血清钙、磷在各处理组并无明显差异 ,粪钙检测结果表明排出体外的粪钙量随钙水平的升高而增加。上述结果说明 0～ 6周龄蛋雏鸡日粮中钙的适宜水平应为 0 .9%～ 1.0 %。
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产肠毒素性大肠杆菌K99菌毛蛋白抗原基因的克隆与表达
《中国兽医学报 》 2001 北大核心 CSCD
摘要：应用 PCR从产肠毒素性大肠杆菌 ( ETEC)中扩增出不含信号肽序列的 K99菌毛蛋白基因片段 ,克隆测序后 ,将该片段连接到 E.coli表达载体 p ET2 8a( + )中 ,转化 E.coli表达菌株 BL2 1 ( DE3) ,筛选得到可诱导表达 K99抗原的工程菌株。经 IPTG诱导 ,分离纯化 K99重组蛋白 ,以其免疫新西兰大白兔 ,获得重组蛋白的兔抗血清 ;免疫印迹分析表明 ,此重组蛋白制备的抗血清能与标准的 K99强毒株发生明显的抗原抗体反应
关键词： 产肠毒素性大肠杆菌 K99 基因克隆 K99菌毛蛋白抗血清
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