科研产出
不同连作年限草莓根际细菌和真菌多样性变化
《微生物学通报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要:【目的】以不同连作年限草莓根际土壤为材料,探讨不同连作年限土壤细菌、真菌多样性的变化,以期为草莓连作障碍调控提供理论依据。【方法】将没有连作(CK)、连作1年(1Y)、连作8年(8Y)的土壤分别与珍珠岩以3:1的体积充分混匀装盆,"宁玉"草莓苗于2016年9月10日定植于盆栽土壤中,定植后50 d时(开花前)进行土壤取样,提取基因组DNA,通过PCR扩增建立文库,利用Mi Seq平台Illumina第二代高通量测序技术并结合相关生物信息学方法,分析土壤细菌16S rRNA基因V4+V5区域和真菌ITS1+ITS2区域的丰富度和多样性指数以及群落结构。【结果】从9个草莓根际土壤样本中获得3 192个细菌分类操作单元OTU和762个真菌OTU,其中,变形菌门、厚壁菌门、放线菌门、拟杆菌门和蓝藻门为草莓根际土壤的优势菌种,在CK、1Y、8Y草莓根际土壤中分别占细菌总数的87.86%、64.83%和61.79%;子囊菌门和担子菌门为优势真菌,在CK、1Y、8Y草莓根际土壤中分别占真菌群落的69.17%、69.06%和76.18%。从门的分类水平看,酸杆菌门、放线菌门、拟杆菌门、厚壁菌门、绿弯菌门、蓝菌门、浮霉菌门、芽单胞菌门、变形菌门以及真菌担子菌门、接合菌门、壶菌门的比例在不同连作年限的草莓根际土壤中显著改变(P<0.05)。属水平的分析也表明,共有29个细菌属和19个真菌属的比例发生改变(P<0.05)。【结论】随连作年限的延长,草莓根际土壤生态系统中细菌和真菌群落各门类组成的比例会发生显著变化。
关键词: 草莓 根际土壤 Illumina高通量测序 土壤细菌 土壤真菌
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沿海滩涂盐碱地甘薯高产高效生产技术规程
《江苏农业科学 》 2017 北大核心
摘要:甘薯适应性强、产量高、营养丰富且用途广泛,已经成为重要的特色经济作物,同时也是我国重要的能源作物之一。江苏省沿海滩涂资源丰富,利用滩涂发展甘薯产业,既能缓解区域人地矛盾,又能产生环境生态效益。建立甘薯规模化、标准化种植基地,还可以逐步增加滩涂植被面积,改良土壤结构,从而为滩涂农业的加快发展打好基础。在江苏省沿海滩涂盐碱地多年开展甘薯栽培技术试验和生产示范的基础上,结合江苏省滩涂盐碱地生产实际情况,总结提出了沿海滩涂盐碱地甘薯种植各个环节的生产技术规程。
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重组猪肺表面活性蛋白A在昆虫杆状病毒表达系统的表达及体外抗PRRSV活性初步鉴定
《中国农业大学学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要:为研究重组猪肺表面活性蛋白A(RpSP-A)的抗病毒活性,采用Bac-to-Bac系统对RpSP-A蛋白进行表达。首先PCR扩增目的基因并将其克隆至pFastBac1转移载体获得pFast-SP-A,通过转化DH10Bac感受态细胞获得重组Bacmid,然后转染sf9细胞获得重组杆状病毒rBV-SP-A,在sf9细胞上进行目的蛋白的表达,经镍柱纯化、脱盐柱处理后,采用蚀斑减少方法评价RpSP-A对PRRSV感染Marc-145细胞的抑制作用。结果显示RpSP-A在sf9细胞中得到正确表达,并且能够降低PRRSV在Marc-145细胞上的感染,补加Ca~(2+)时30μg/mL RpSP-A抑制率高达77%,15μg/mL RpSP-A抑制率为43%,未补加Ca~(2+)时RpSP-A没有表现出抑制作用。上述结果表明利用Bac-to-Bac系统可以稳定获得大量具有抗PRRSV作用的可溶性RpSP-A。
关键词: 猪 表面活性蛋白A 杆状病毒表达 猪繁殖与呼吸综合征病毒 抗病毒活性
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小麦赤霉病原菌拮抗菌Bacillus amyloliquefaciens 7M1产抗菌素的研究
《微生物学通报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:【目的】从小麦根际土壤分离鉴定一株赤霉病拮抗菌,对该菌产的抗菌素进行生物学性质研究、种类鉴定和抑菌实验。【方法】利用牛津杯法和光照培养箱实验对其抑菌活性进行测定,通过16S r RNA基因序列分析对目标菌株的种属进行初步鉴定,根据抗菌素相关基因进行PCR扩增和测序,利用在线软件Pro Param tool和TMHMM对编码蛋白进行生物信息学分析。【结果】7M1菌体和抗菌素对禾谷镰刀菌的抑菌圈直径分别为16.33±0.13 mm和15.43±0.21 mm,16S r RNA基因序列分析结果显示其为芽孢杆菌,并与解淀粉芽孢杆菌具有较近的亲缘关系,菌株7M1抗菌素对小麦赤霉病的温室防治效果为76.41%,而且热稳定性好,可被蛋白酶K、胰蛋白酶、胃蛋白酶降解,在p H 5.0-10.0有较好的抑菌活性,但是紫外线辐射会降低其抑菌活性。菌株7M1含有bac AB、itu C、bam D 3种基因,通过与Gen Bank中相关的抗菌素基因进行比对,发现其编码的氨基酸序列与Gen Bank库中的芽孢杆菌溶素、伊枯草菌素和杆菌抗霉素D等抗菌素的相似性达到99%。bac AB编码蛋白和itu C编码蛋白是稳定蛋白,bam D编码蛋白是不稳定蛋白,此外,3种基因的编码产物不具有明显的跨膜结构。【结论】从该菌发酵液提取的抗菌素有很好的抗禾谷镰刀菌活性而且性质稳定,因而在小麦赤霉病的生物防治中具有潜在的应用价值。
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山楂叶提取物不同极性组分的体外抗氧化作用
《食品工业 》 2016 北大核心
摘要:使用有机溶剂并采用液-液萃取法按极性大小对山楂叶提取物进行萃取分离,分别得到石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相以及水相4个不同的极性组分,测定了各组分提取物的多酚和黄酮的含量,并探讨了其体外抗氧化能力。结果表明,山楂叶提取物各极性组分中多酚和黄酮含量由多到少依次是:正丁醇相>乙酸乙酯相>水相>石油醚相。其中正丁醇相的总还原力最好,其IC50为0.31±0.004 mg·m L-1;水相表现出最好的Fe2+螯合能力,其IC50为0.04±0.003 mg·m L-1;而乙酸乙酯相对DPPH自由基、超氧自由基(O2-·)的清除能力最好,其IC50分别为0.09±0.001 mg·m L-1和0.01±0.006 mg·m L-1。山楂叶提取物各极性组分都具有良好的抗氧化能力,但是抗氧化效果因反应体系的不同而不同,试验结果为山楂叶的综合利用提供了一定的理论依据。
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秸秆集中沟埋还田对土壤氮素分布及微生物群落的影响
《农业环境科学学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:秸秆集中沟埋还田(DB-SR)是一种新型土壤耕作方式,能够形成特殊的"秸秆层"结构。通过研究秸秆层及其界面土壤的氮素含量和微生物群落结构,以期阐明秸秆层对土壤氮素分布以及微生物群落的影响。设置秸秆沟埋还田深度为20 cm、40 cm以及对照(秸秆不还田)3个处理,测定秸秆层及其界面土层(±5 cm)的NH~+_4-N与NO~-_3-N含量,分析微生物量碳(MBC)及群落结构特征。研究发现,"秸秆层"对氮素具有滞留作用,并能够持续60个月。在20 cm埋深下,秸秆层提高了其界面上下土层的MBC,但对多样性指数的影响不显著;在40 cm埋深下,水稻秸秆层界面土壤MBC随时间先减小后增大,多样性指数随时间延长而增加;小麦秸秆层界面土壤MBC随时间先增大后减小,多样性指数随时间先减小后增大。微生物群落碳源利用主成分分析表明,秸秆层微生物能很好地利用各类碳源,其界面土壤的微生物代谢活性也比CK处理有所提高。对应分析表明,小麦秸秆在20 cm埋深下,NH~+_4-N、NO~-_3-N与界面土层微生物群落具有相关性,MBC与秸秆层微生物群落显著相关;在40 cm埋深下,NH~+_4-N、NO~-_3-N和MBC与秸秆层微生物群落变异显著相关。综上可知,"秸秆层"能有效滞留氮素,减少土壤氮素淋失,增加土壤微生物群落功能多样性。
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NaCl胁迫和采摘期对枸杞幼苗生物量及品质的影响
《江苏农业科学 》 2016 北大核心
摘要:研究盆栽试验条件下采摘1次、2次处理及0、0.3、0.6、0.9 g/kg NaCl 4个胁迫水平(分别以S_0,S_1,S_2,S_3表示)对中华枸杞和黑枸杞幼苗生物量、维生素C、还原糖和氨基酸含量的影响。结果发现,不同采摘措施下,中华枸杞均以S_0、S_1水平下幼苗生物量较高、品质较优。采摘2次与采摘1次中华枸杞幼苗生物量均以S_0、S_1处理显著高于S_2、S_3处理,增加量分别为0.97~2.91,0.91~1.42、3.85~6.07 g/盆;维生素C含量都以S_1处理最高,分别为456、366、371 mg/kg;还原糖含量则分别以S_1、S_0处理最高,为3.16%、2.81%、4.41%;氨基酸含量均以处理S_2﹥S_1﹥S_0﹥S_3。黑枸杞采摘2次处理幼苗生物量分别以S_1、S_3处理最高,为6.24、6.02 g/盆;采摘1次处理仍以S_1处理生物量较高,为9.32 g/盆;其幼苗维生素C、氨基酸含量均以S_2﹥S_1﹥S_0﹥S_3或S_3﹥S_2﹥S_1﹥S_0;还原糖含量分别以S_0和S_3水平下最高,为3.35%、4.25%、4.02%。结果表明,采摘期与盐胁迫对黑枸杞幼苗生物量及品质的影响规律性不明显,但总体而言,高盐胁迫(S_2、S_3水平)对二者的影响要小于中华枸杞。
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一株大豆内生拮抗细菌XZ-2的分离和分子鉴定
《大豆科学 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:从大豆植株中分离到一株具有广谱抗菌活性的拮抗细菌,命名为XZ-2。抑菌活性测定显示XZ-2对甘薯黑斑病菌、大蒜叶枯病菌等8种植物病原真菌均具有较强的抑菌活性,抑菌直径均在20 mm以上。采用分光光度法绘制了XZ-2的生长曲线,结果显示该菌株在LB液体摇培12 h时基本达到对数生长期,该生长曲线的绘制为后期XZ-2的活性物质发酵条件优化奠定了基础。通过PCR扩增16Sr DNA片段并采用MEGA 6.0构建系统发育进化树,初步将该菌株鉴定为多粘类芽孢杆菌。
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