科研产出
β-伴大豆球蛋白诱导杂交黄颡鱼肠道上皮细胞内质网应激模型的建立
《水生生物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：实验旨在利用β-伴大豆球蛋白构建黄颡鱼上皮细胞内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)模型.利用酶消化法分离得到黄颡鱼肠道上皮细胞,通过细胞形态、角蛋白18(Cytokeratin-18,CK-18)免疫荧光染色和碱性磷酸酶染色法鉴定.利用不同浓度β-伴大豆球蛋白刺激24h后,RT-qPCR检测相关基因转录表达水平,筛选最合适刺激浓度.在此浓度下分别刺激黄颡鱼肠道上皮细胞0、12h、24h和36h,使用RT-qPCR、CCK8、透射电镜和免疫荧光染色等方法检测相关指标,筛选最适刺激时间.结果表明:(1)成功分离培养黄颡鱼肠道上皮细胞,细胞呈铺路石状,CK-18和碱性磷酸酶染色呈阳性;(2)成功筛选到4 mg/mL β-伴大豆球蛋白为最佳刺激浓度.在该浓度下,除grp78、jnk、il-10、atf6外,内质网应激、自噬、凋亡、炎症等相关基因表达水平均显著最高(P<0.05);成功筛选24h为最适刺激时间.4 mg/mL β-伴大豆球蛋白刺激细胞24h显著降低细胞活力,同时引起内质网显著肿胀,GRP78、LC3、Caspase3蛋白表达和Tunel信号显著升高(P<0.01),perk、atf6、beclin1、lc3a、bcl2、caspase3、caspase9和il-12mRNA表达水平显著最高(P<0.05).综上,实验成功分离得到黄颡鱼肠道上皮细胞,构建了黄颡鱼肠道上皮细胞内质网应激模型.实验为进一步研究未折叠反应信号通路在黄颡鱼豆粕诱导肠炎发生发展中的作用奠定基础.
关键词： β-伴大豆球蛋白 肠道上皮细胞 内质网应激 黄颡鱼
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一株野生桑黄菌的分离鉴定及活性成分分析
《北方园艺 》 2024 北大核心
摘要：以采自河南省南阳市西峡县的野生桑黄为试材,采用形态学鉴定、系统发育分析及单因素试验法,研究了该菌的分类地位和生物学特性.同时,对比了桑树桑黄、杨树桑黄及粗毛纤孔菌3种子实体中多糖、黄酮、多酚及皂苷4种活性成分含量,以期丰富桑树桑黄种质资源.结果表明:该菌为桑黄孔菌属的桑树桑黄(Sanghuangporus sanghuang).在纯培养条件下,该菌的最适温度为26~28℃,最适生长pH为6,最适碳源为麦芽糖和葡萄糖,最适氮源为酵母浸粉和胰蛋白胨.桑树桑黄、杨树桑黄及粗毛纤孔菌3种桑黄的活性成分含量差异显著,其中,桑树桑黄中黄酮和总酚含量最高,粗毛纤孔菌中多糖和皂苷含量最高.综上所述,采自河南省的野生桑黄为桑树桑黄,且该菌在桑黄类真菌中具备较高的药用价值.
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补灌条件下增施有机肥对小麦-玉米产量及水分利用效率的影响
《节水灌溉 》 2024 北大核心
摘要：探讨补灌条件下增施有机肥对小麦、玉米产量、耗水量和水分利用效率的影响，为豫中补灌区合理利用水肥资源、小麦-玉米高产高效生产提供理论依据和技术支撑。2018-2020年进行田间定位试验，设3个灌水水平：不灌溉（W0），补灌1次（W1）(拔节期)、补灌2次（W2）(拔节期，抽穗-扬花期)，每次灌水450 m3/hm2。设5个施肥模式：不施肥（N0）、纯氮210 kg/hm2（N1）、纯氮300 kg/hm2（N2）、纯氮210 kg/hm2+有机肥1 500 kg/hm2（N3）、纯氮300 kg/hm2+有机肥1 500 kg/hm2（N4）。（1）连续2 a灌水措施（W）、施肥模式（N）和灌水×施肥交互作用对小麦、玉米产量和全生育期耗水量均具有极显著影响，且低氮（N1）条件下增施有机肥有利于提高小麦、玉米产量和水分利用效率，其中小麦产量增加了1.75%～17.11%，玉米产量增加了2.42%～12.66%。（2）连续2 a 3种灌水水平条件下，N0处理小麦、玉米产量和水分利用效率低于或显著低于其他处理。（3）2019年小麦、玉米产量均以W1N4最高，分别为11 865.53 kg/hm2和11 662.82 kg/hm2;2020年W2N4小麦处理产量最高，W1N3处理玉米产量最高。（4）小麦全生育期耗水量差异显著，连续2 a补灌2次处理的小麦、玉米全生育期耗水量均高于不灌溉相应处理。（5）2019年小麦、玉米水分利用效率均以W2N0最低，2020年W1N0小麦水分利用效率处理最低，W2N0处理次之，W2N0处理玉米水分利用效率最低。补灌或增施有机肥对小麦、玉米产量具有极显著影响，对小麦、玉米水分利用效率有一定积极影响。豫中补灌区推荐适宜小麦-玉米灌溉施肥模式为：小麦、玉米拔节期各补灌1次，施用纯氮300 kg/hm2+有机肥1 500 kg/hm2（氮肥底追比为底施∶拔节肥=7∶3）。
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凡纳滨对虾不同养殖模式下微生物群落结构分析
《江苏农业科学 》 2024 北大核心
摘要：为了解不同养殖模式对凡纳滨对虾养殖环境微生物多样性和群落结构的影响，利用高通量测序技术，结合生物信息学分析，比较凡纳滨对虾主养模式和鱼-虾混养模式中水体、底泥以及虾肠道微生物的多样性和群落结构。结果显示，无论是物种的多样性水平还是丰富性水平，均是底泥＞水＞虾肠道，主养池塘底泥和虾肠道样品的物种多样性和丰富性均高于混养池塘。不同样品微生物群落的菌群分布于59个门，其中10个门的丰度＞1%,变形菌门（Proteobacteria）和拟杆菌门（Bacteroidetes）属于绝对优势菌群，在混养池塘和主养池塘中均＞10%。主养池塘的微生物标志物共有8个类群，分别为双歧杆菌目（Bifidobacteriales）、双歧杆菌科（Bifidobacteriaceae）、双歧杆菌属（Bifidobacterium）等，混养池塘的微生物标志物共有18个类群，分别为蓝色芽殖杆菌属（Gemmobacter）、外硫红螺菌科（Ectothiorhodospiraceae）、外硫红螺菌属（Ectothiorhodospira）等。通过功能预测及其相对丰度比较，发现主养模式在这些代谢通路中基因注释的相对丰度值均高于混养模式。以上研究表明，在凡纳滨对虾主养模式中添加的益生菌，有效提高了水体、虾肠道和底泥的微生物多样性，塑造了更健康、多元化、功能更强大的微生物群落，提高了养殖系统的物质循环能力和能量利用效率，更有利于虾体的健康成长。
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黄河河南段浮游生物群落结构特征
《中国水产科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了揭示黄河河南段浮游生物的群落结构特征,于2023年5月、2023年10月和2024年2月对黄河河南段15个点位进行了3次浮游生物采样,并对样品中的浮游生物进行了定性、定量检测。从浮游生物的种类组成、密度、生物量、优势种及生物多样性5个方面进行了分析。结果表明,该15个点位共检出浮游植物8门134种(属),以绿藻门和硅藻门为主,蓝藻门次之;浮游动物共检出4大类66种(属),其中轮虫种类最多,原生动物次之。浮游植物的丰度值变化范围为6.02×10～4～11.71×10～6 cells/L,均值为10.92×10～5 cells/L,生物量为0.06～5.83 mg/L,均值为0.66 mg/L;浮游动物丰度变化范围为3～2180 ind/L,均值为164.03 ind/L,生物量为0.001～3.363 mg/L,均值为0.33 mg/L。单因素方差分析显示浮游植物密度5月与10月有显著差异(P<0.05),与2月差异不显著(P>0.05),浮游动物密度5月与10月、2月有显著差异(P<0.05)。浮游植物和浮游动物生物量5月与10月、2月有显著差异(P<0.05)。小球藻属(Chlorella)、绿球藻属(Chlorocaccam)、纤维藻属(Ankistrodesmus)、衣藻属(Chlamydomonas)、卵囊藻属(Oocystis)、颗粒直链藻(Melosira granulata)、尖针杆藻(Synedra acus)、小环藻属(Cyclotella)、脆杆藻属(Fragilaria)为浮游植物不同时期的共同优势种;萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus)、盖氏晶囊轮虫(Asplanchna girodi)、象鼻溞属(Bosmina)、秀体溞属(Diaphanosoma)、溞属(Daphnia)、猛水蚤属(Harpacticoida)、桡足类无节幼体为浮游动物不同时期的共同优势种。浮游植物Shannon-Wiener指数变化范围为0.66～4.38,均值为2.70;Margalef物种丰富度指数为1.32～4.68,均值为2.70;Pielou物种均匀度指数为0.16～0.97,均值为0.63。浮游动物Shannon-Wiener指数变化范围为0.50～3.02,均值为1.70;Margalef物种丰富度指数为0.32～2.33,均值为1.14;Pielou物种均匀度指数为0.39～1,均值为0.84。根据生物多样性指数评价标准,黄河河南段近期水质级别为轻度污染。
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核桃花粉饼干研制及品质分析
《粮食与饲料工业 》 2024 北大核心
摘要：为研究核桃花粉在饼干中的较优配比，分析了核桃花粉的总膳食纤维和可溶性膳食纤维含量等。以饼干的质构、延展因子、感官评分为评价指标，探究了核桃花粉、山茶油、水和泡打粉添加量对饼干品质的影响，通过正交试验优化了核桃花粉饼干的配方。结果表明，核桃花粉富含膳食纤维含量高达18.6 g/100 g,可溶性膳食纤维含量高达2.48 g/100 g。核桃花粉饼干的较优配方为：核桃花粉添加量3.5%,山茶油添加量14%,水添加量24%,泡打粉添加量3%。此研究为进一步开发核桃花粉功能性饼干提供了借鉴。
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水淹胁迫对美洲黑杨嫁接苗叶片色素及光合特性的影响
《上海农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：以‘全红杨’‘中红杨’和‘2025杨’3个品种嫁接苗为试验材料,采用随机区组设计,盆栽模拟水淹环境,以正常浇水条件为对照,研究不同胁迫处理时间下,3个杨树品种的叶片色素含量、光合特性的响应变化及各指标间的相关性。结果表明:水淹胁迫期间,3个杨树品种叶片色素含量及气孔导度（Gs）、净光合速率（P_n）、蒸腾速率（Tr）和胞间CO2浓度（Ci）均极显著下降。胁迫后期,叶绿素a含量下降幅度大于叶绿素b,同时叶片Ci升高,羧化效率（CE）下降,Ci与P_n的相关性由正变为负,三者P_n的再次下降主要是由非气孔限制所致。对P_n的相关性分析表明,花色素苷含量与‘全红杨’叶片P_n呈正相关,而‘2025杨’花色素苷含量与P_n呈负相关。水淹胁迫70 d,3个杨树品种叶片P_n均始终为正值,水分利用效率（WUE）大幅提高,表现出稳定的耐涝遗传特质,其中‘全红杨’耐水淹能力相对较弱。
关键词： 杨树品种 水淹胁迫 色素含量 光合特性 相关性分析 耐涝性
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LED绿光对小贯小绿叶蝉取食行为的干扰
《浙江农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：小贯小绿叶蝉是我国茶区普遍发生的害虫之一，其为害严重影响了茶叶的产量和品质。为减少化学农药带来的残留，探索茶园叶蝉防治新方法，采用LED绿光(波长520～525 nm)干扰其取食过程，并通过刺吸电位图谱(EPG)仪记录分析不同光照强度和照射时间对小贯小绿叶蝉取食行为的影响。结果表明，小贯小绿叶蝉取食过程中所产生的波型有NP波、A波、C波、E波、S波、F波和R波，其中NP波占比最大。与自然光(对照)相比，LED绿光对小贯小绿叶蝉取食行为有明显的抑制作用，相同时间内，光照强度越大，刺吸百分比越低，刺吸次数越多，对小贯小绿叶蝉取食行为的干扰越明显。该研究结果可为灯光防治茶园叶蝉的应用提供技术支持。
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不同果锈程度的阳光玫瑰葡萄果皮的代谢组学分析
《果树学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探明阳光玫瑰葡萄果锈形成的机制，为其有效防治提供科学的指导建议。【方法】以6年生阳光玫瑰葡萄植株为试材，在果实进入软化期后，采集有果锈和无果锈的果粒样品，按照果锈发生程度分成无果锈、轻度果锈和重度果锈3个等级，研究不同果锈等级的果皮相关物质含量、酶活性及代谢组的变化。【结果】随着果锈程度的增加，阳光玫瑰葡萄果皮的叶绿素、纤维素、半纤维素和总果胶含量逐渐降低，木质素、总黄酮和总酚含量逐渐升高；果皮中过氧化物酶、多酚氧化酶、苯丙氨酸解氨酶、肉桂醇脱氢酶和4-香豆酸：辅酶A连接酶的活性逐渐升高，过氧化氢酶活性先升高后降低，肉桂酸-4-羟基化酶活性先降低后升高。不同果锈程度的果皮中共鉴定到1372种代谢物，差异代谢物有485种，3组果锈等级的果皮之间共有的差异代谢物有110种，其中，有105种差异代谢物在3组中均上调表达，占所有差异代谢物的95.45%，包括37种酚酸类、31种黄酮、17种芪类和5种醌类等；2种差异代谢物在3组中均下调表达，包括1种脂质和1种核苷酸及其衍生物。上述差异代谢物质主要分布在17条代谢途径中，包括山柰酚苷元Ⅱ的生物合成、山柰酚苷元Ⅰ的生物合成和次生代谢物的生物合成等。【结论】酚酸类和黄酮类物质对阳光玫瑰葡萄果锈的发生影响最大，且山柰酚苷元Ⅱ的生物合成途径可能在果锈的形成中发挥重要作用。
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马立克病病毒meq基因缺失毒株HN302Δmeq的构建及致病性分析
《畜牧与兽医 》 2024 北大核心
摘要：马立克病(MD)是由马立克病病毒(MDV)感染引起的一种重要的家禽免疫抑制病与肿瘤病，严重危害世界养禽业。随着MDV持续进化及毒力增强，急需研发新型高效的MD疫苗以加强该病的有效防控。本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，以MDV变异株HN302为亲本毒株，成功构建了meq基因缺失的毒株HN302Δmeq,经过PCR扩增鉴定及测序分析，证实meq基因缺失且传代稳定。间接免疫荧光试验(IFA)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析均证实HN302Δmeq感染鸡胚成纤维细胞(CEF)中无meq基因表达，并且meq基因的缺失不影响其他病毒基因的表达。利用RT-qPCR分析HN302Δmeq在CEF中的体外增殖曲线，结果显示meq基因的缺失不影响MDV体外复制。1日龄SPF鸡攻毒试验结果显示，与亲本毒株HN302相比，HN302Δmeq对宿主无致病性，其诱导的MD发病率、死亡率和肿瘤发生率均为0,且未观察到明显的免疫器官萎缩。上述数据表明，HN302Δmeq的毒力明显丧失，具备继续作为疫苗候选株开展相关研究的可能性。本研究成功构建了MDV变异株HN302的meq基因缺失毒株，为后续MDV的致病机制及新型疫苗研究奠定了基础。
关键词： 鸡 马立克病病毒 meq基因 CRISPR/Cas9 基因编辑 致病性
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