小麦转录因子TaARF14基因的克隆及表达分析

连少英; 张修引; 郭灿; 牛吉山; 姜晓君; 李磊; 张庆琛; 齐学礼; 倪永静; 《西南大学学报(自然科学版) 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：生长素响应因子(ARFs)是调控植物各器官发育的重要转录因子，TaARF14是小麦ARF基因家族的成员之一.以小麦栽培品种‘尚农6’为材料，克隆了TaARF14基因(TaARF14-1A,TaARF14-1B和TaARF14-1D).序列分析显示：TaARF14的3个同源基因都具有10个外显子区域，且3条核酸序列相似性为94.94%～96.07%;TaARF14基因的启动子区域含有大量与植物正常生长发育或植物激素相关的顺式作用元件，推测TaARF14-1A,TaARF14-1B和TaARF14-1D对小麦的生长发育具有重要作用，且TaARF14基因对生长素(IAA)、赤霉素(GA)和脱落酸(ABA)具有明显的响应；系统进化分析表明：相比其他作物，ARF14基因在麦类作物基因进化中具有更高的保守性；qRT-PCR结果表明：TaARF14基因在小麦的穗发育进程中，特别是花器官的发育(包括雄蕊和雌蕊)中具有极其重要的作用，在施用IAA, GA和ABA后，TaARF14基因在根、茎、叶中均具有明显的响应变化.

关键词： 小麦 基因TaARF14 克隆 表达分析

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黄淮麦区小麦中类燕麦蛋白的分类、等位基因及质量评价

晁岳恩; 李文旭; 王沙沙; 王亚欢; 汪庆昌; 黄超; 《麦类作物学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：类燕麦蛋白(ALPs, avenin-like proteins)是一类富含半胱氨酸残基的非典型面筋蛋白，对小麦面团强度具有重要作用。为明确ALPs在黄淮麦区小麦品种中的表达类型、等位基因数量及可能的面粉品质效应，本研究以黄淮麦区的40个栽培品种为研究对象，选取灌浆中期的籽粒并根据品质不同分别组成2个混合池进行转录组测序。结果表明，在40个品种的转录产物中，鉴定到14个ALPs基因和24个ALPs的等位基因；14个ALPs基因在4AL、7DS和7AS染色体分别有5个、5个和4个。聚类分析表明，14个ALPs蛋白可以分为A、B两个大类，细分为A1、A2、B1、B2和B3五个亚类。ALP基因的表达水平在强筋群体和中筋群体间存在差异，两个A类ALPs基因在强筋群体中显著上调表达，B3亚类ALP显著下调。面粉品质效应评估表明，14个ALPs对面团强度性状的贡献存在差异，但除B1亚类外，其他所有蛋白对面筋强度贡献值都不低于高分子麦谷蛋白，推测ALPs可能也是影响中国黄淮麦区面团强度的重要蛋白类型。

关键词： 小麦 燕麦类似蛋白 面团强度 等位基因

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基于SWOT-PEST模型的平顶山梨产业发展现状及对策分析

张佳伟; 周威; 吴中营; 蒋钦群; 张九林; 《北方园艺 》 2024 北大核心

摘要：平顶山作为丘陵浅山区农业大市，梨产业发展已具有一定规模，但在市场中果品竞争力和影响力较为薄弱，与省内外的梨产业竞争对手仍具有较大差距。为了加快平顶山梨产业发展，发挥丘陵浅山区独有优势，缩小竞争差距，该研究通过分析平顶山梨产业在政治、经济、社会、技术环境中所面临的优势、劣势、机遇、挑战，构建了平顶山梨产业的SWOT-PEST矩阵，并针对优势机遇提出积极推进性战略，针对劣势威胁提出创新转变性战略，以期为平顶山梨产业发展提供参考依据。

关键词： 平顶山 梨产业 SWOT-PEST模型

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牛膝茎基腐病的病原菌分离与鉴定

王飞; 杨瑾; 李绍建; 高素霞; 李雪梦; 秦艳红; 赵莹; 鲁传涛; 《植物病理学报 》 2024 北大核心 CSCD

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柴胡新品种'郑柴胡3号'

曹辉; 王峰; 左红娟; 腊贵晓; 张晓申; 《园艺学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：‘郑柴胡3号’是从河南登封农家种的变异群体经过通过系统选育的柴胡新品种。主根明显,圆锥形,上端膨大,表面浅黄色,断面黄白色,具菊花心,皮部和木部易分离;茎表面粗糙有细纵槽纹棱,半中空;叶披针形,灰绿色;花期较早。田间表现良好,适合河南及相近生态区域种植。

关键词： 柴胡 品种

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猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

王瑞宁; 王勋; 李鸽; 李青梅; 李存法; 杨苏珍; 郭军庆; 《河南农业科学 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：为了开发检测猪伪狂犬病病毒（PRV）的免疫诊断试剂，使用HEK293F细胞表达的gE重组蛋白免疫BALB/c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合，应用酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）方法筛选阳性杂交瘤细胞株，以期获得对PRV反应性良好的抗gE重组蛋白单克隆抗体。结果显示，获得2株（2B5和8F7）稳定分泌抗PRV gE蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其腹水单克隆抗体的ELISA效价均为1∶1 000000；单克隆抗体亚型鉴定结果表明，2株单克隆抗体的重链均为IgG1亚型，轻链均为Kappa链。单克隆抗体特异性测定结果显示，2株单克隆抗体仅与PRV反应，不与其他常见病毒发生反应；SDS-PAGE结果显示，纯化后的单克隆抗体均在约50 ku和25 ku处有纯度较高的特异性条带；间接免疫荧光试验（IFA）结果表明，制备的2株单克隆抗体与转染gE质粒的293T细胞发生特异性反应。根据Western blot结果，筛选获得的2株单克隆抗体均在120 ku附近出现特异条带，表明这2株单克隆抗体均能特异性识别PRV。综上，成功制备了2株特异性强、效价高的抗gE蛋白单克隆抗体，为后期PRV诊断试剂盒的制备提供重要的生物材料。

关键词： 猪伪狂犬病病毒 gE蛋白 单克隆抗体 间接免疫荧光试验

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胶冻样芽孢杆菌对革兰氏阴性菌的抑菌活性及其抗菌次级代谢产物分析

李海利; 徐引弟; 王治方; 朱文豪; 陈建豪; 李斌; 段进刚; 冯丽丽; 杨帆; 马春江; 闫祥洲; 《河南农业科学 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：为筛选对革兰氏阴性菌抑菌活性较好的药用植物芍药的内生菌，采用表面消毒法和平板对峙法分离筛选对大肠杆菌和沙门氏菌有拮抗作用的芍药内生菌，对其进行形态学和分子生物学鉴定，并通过全基因组学分析探究其抗菌活性物质。结果表明，从芍药根、茎、叶等不同组织分离得到20株内生菌。采用平板对峙法抑菌试验，从20株内生菌中获得1株抗菌效果较好的革兰氏阴性内生菌HNYJ291，经形态学和分子方法鉴定为胶冻样芽孢杆菌（Paenibacillus kribbensis），该菌能有效抑制大肠杆菌和沙门氏菌。对该菌进行全基因组测序分析，HNYJ291的基因组大小为5 609 136 bp,G+C含量为45.48%，预测其编码基因个数为4 805个。分别有4 779、3 678、4 027、3 941、2 994、2 700个基因被NR、Swiss-Prot、Pfam、COG、GO、KEGG数据库注释，通过antiSMASH预测到与次级代谢产物合成相关的10个基因簇，主要次级代谢产物有环脂肽类抗生素（Fusaricidin B）、细菌素（Paenilan）、抗菌脂肽（Tridecaptin）、多黏菌素（Polymyxin）和抗菌肽（Paenicidin A）等。从其基因组中含有的抗菌活性物质相关基因簇可以预测出，该菌株具有开发新药和作为可饲用微生物的潜力。

关键词： 胶冻样芽孢杆菌 芍药 内生菌 沙门氏菌 大肠杆菌 抑菌效果 抗菌活性物质

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高粱LBD基因家族的鉴定及苗期干旱胁迫表达分析

宋迎辉; 付森杰; 朱灿灿; 代书桃; 秦娜; 景雅; 张真; 薛淑霞; 李君霞; 《西南农业学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：【目的】研究LBD（Lateral organ boundaries domain）基因家族在调控高粱干旱胁迫中的作用，为高粱（Sorghum bicolor）耐旱分子育种提供依据。【方法】利用生物信息学的方法鉴定高粱基因组中的LBD基因家族，对其理化性质、染色体分布、系统进化、基因结构、保守基序、顺式调控元件以及组织表达模式进行分析。【结果】鉴定出32个LBD基因，不均匀地分布在除6号染色体外的9条染色体上；系统发育树分析将其分为Class I和Class II两组，均含有CX₂CX₆CX₃C结构域，其中Class I有25个家族成员，含有相对完整的GAS和LX₆LX₃LX₇L结构域，Class II有7个家族成员，甘氨酸组成的保守序列均为GRA,LX₆LX₃LX₇L结构域不完整。同一组内的成员保守结构域蛋白序列一致性更高，基因结构和保守基序高度相似；系统进化分析发现高粱LBD蛋白与单子叶植物的同源性大于双子叶植物；顺式调控元件分析发现，SbLBD启动子序列中光响应元件G-box、脱落酸响应元件ABRE数量最多，其次是茉莉酸甲酯响应元件CGTCA-motif和厌氧诱导响应元件ARE,另外检测到低温响应元件LTR和干旱诱导元件MBS。表达分析发现，Class II中的7个成员和Class I中的SbLBD24在高粱各生育期和多数组织中表达量均较高。在模拟干旱处理下，高粱幼苗中SbLBD6下调表达，SbLBD26上调表达。【结论】不同组SbLBD基因保守序列存在差异。高粱LBD家族基因可响应低温、干旱、光强和光周期等多种逆境条件，且具有组织表达特异性。SbLBD6和SbLBD26可能在高粱干旱胁迫响应中具有重要作用。

关键词： 高粱 LBD基因家族 全基因组鉴定 干旱胁迫 表达分析

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马立克病病毒特超强变异株meq基因缺失株构建及作为疫苗候选株的鉴定

张卓; 樊剑鸣; 滕蔓; 张多; 刘金玲; 郑鹿平; 赵东; 各思雨; 韩放; 罗琴; 柴书军; 罗俊; 《病毒学报 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：马立克病（Marek’s disease, MD）是一种严重危害家禽健康养殖的免疫抑制病与肿瘤病，由致病性的血清1型MDV(Marek’s disease virus serotype 1, MDV-1)毒株感染引起。近年来，即使在已接种疫苗的鸡群中，MD病例的发生及危害在全球范围内仍呈不断上升趋势。此前研究发现，经典的MD疫苗已不能很好保护当前流行的MDV特超强毒株，尤其是新出现的特超强MDV(Hypervirulent MDV, HV-MDV)变异株，这意味着新一代高效的MD疫苗亟待研发。本研究中，以近期最新分离鉴定的HV-MDV变异株SDCW01为亲本毒株，首先将其在鸡胚成纤维细胞（Chicken embryo fibroblast, CEF）上连续传代以降低对宿主潜在的免疫抑制性，然后利用基于CRISPR/Cas9系统的基因编辑技术敲除致瘤基因meq，构建meq基因编辑缺失的疫苗候选毒株。经过PCR扩增鉴定、病毒克隆纯化、DNA测序、间接免疫荧光试验（IFA）、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及病毒体外增殖曲线测定等试验，证实获得一株meq基因完全缺失的MDV毒株，命名为SD01△meq。进一步传代培养及PCR鉴定结果显示，SD01△meq传代稳定性良好，meq基因的编辑缺失未发生回复突变，且不影响其它MDV基因的表达及体外复制能力。1日龄SPF鸡攻毒实验结果显示，与亲本毒株SDCW01相比，SD01△meq完全丧失了对宿主的免疫抑制和致病性，其诱导的MD发病率、致死率及肿瘤率均为0%。上述数据表明，本研究成功构建获得了一株meq基因编辑缺失疫苗候选毒株SD01△meq，为后续新型高效MD疫苗的研发奠定了重要基础。

关键词： 马立克病病毒 meq基因 CRISPR/Cas9 基因编辑 新型疫苗

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响应面法优化香菇片硬化保脆工艺

崔国梅; 刘丽娜; 田广瑞; 王安建; 禹子琪; 高帅平; 《食品与机械 》 2024 北大核心 CSCD

摘要：[目的]抑制以鲜香菇为主要原料的产品在加工及贮藏过程中的质构劣变。[方法]以硬度为主要指标，通过单因素试验和响应面试验分析硬化保脆剂及其添加量对香菇片质构特性的影响。[结果]最佳的硬化保脆条件为氯化钙0.15%，海藻酸钠0.11%，葡萄糖酸-δ-内酯2.0%，复合溶液中浸渍时间为100 min；适宜的灭菌条件为105℃灭菌25 min。[结论]优化后的工艺条件可以显著改善香菇片的质构特性，37℃下贮藏45 d，其口感硬脆、菇味浓郁，色泽与鲜香菇接近，且符合国家卫生标准。

关键词： 香菇片 质构特性 灭菌工艺 感官评分

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