科研产出
广谱稻瘟病抗性基因Pigm和Pi2的抗谱差异及与Pi1的互作效应
《作物学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：Pigm是Pi2基因簇的等位或紧密连锁基因。本研究构建了4个不同遗传背景下Pigm和Pi2的系列近等基因系,204个菌株苗期接种结果显示其抗性频率均超过70%,但Pigm和Pi2的抗谱重叠度仅为54.4%~65.7%,聚合Pi1/Pigm和Pi1/Pi2杂种的抗性频率均超过90%。穗瘟人工接种及病圃自然诱发鉴定表现与苗期接种一致的发病趋势。农艺性状调查结果显示获得的近等基因系与其轮回亲本基本相似,存在较少的累赘连锁。表明Pigm是一个与Pi2抗谱差异明显的广谱抗性基因,对稻瘟病抗性育种具有重要应用价值。
关键词： 稻瘟病抗性基因 标记辅助选择 近等基因系 抗谱 互作效应
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二化螟鞘磷脂合酶相关基因CsSMSr的克隆、真核表达及表达谱分析
《核农学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：鞘磷脂合酶(SMS)基因家族在鞘脂质代谢中起着关键作用,可以通过调节神经酰胺和甘油二酯的平衡调控细胞的生存和凋亡。本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆得到1个二化螟鞘磷脂合酶相关基因的全长cDNA,命名为CsSMSr(Genbank登录号:JQ664739)。CsSMSr开放阅读框1587bp,可编码528个氨基酸;序列分析表明,CsSMSr基因编码的蛋白N端具有保守的SAM结构域,含6个跨膜区域,并且有4个SMS家族特有的保守区域D1～D4,保守区D3和D4上有活性中心包括3个氨基酸残基(催化三联体):His302,His345,Asp349。CsSMSr在粉纹夜蛾Tn细胞内成功表达,Western blot检测表达产物分子量约60kDa。应用实时荧光定量PCR方法分析该基因在二化螟不同发育阶段和不同组织的表达,结果表明,CsSMSr随着二化螟的生长发育表达水平逐渐升高,在成虫时期达到最大;CsSMSr的表达具有组织特异性,二化螟雌成虫和雄幼虫生殖器官中的CsSMSr表达量都显著高于其他器官,在二化螟雄成虫精巢中表达量也较高,但与中肠和马氏管差异不大。CsSMSr的表达有时间特异性和组织特异性,推测该基因在二化螟的发育和生殖中有重要作用。本研究成功克隆并表达了二化螟鞘磷脂合酶相关基因,为进一步对该基因进行功能鉴定奠定了基础。
关键词： 二化螟 鞘脂质 鞘磷脂合酶相关基因 真核表达 实时荧光定量PCR
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外源油菜素内酯对镉胁迫下菊芋幼苗光合作用及镉富集的调控效应
《生态学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：以两种菊芋(Helianthus tuberosus L.)品系南芋2号(NY2)和南芋5号(NY5)为材料,研究了外源24-表油菜素内酯(24-EBL)对镉胁迫下菊芋幼苗干重、根冠比(R/S)、光合色素含量、叶片气体交换参数和水分利用效率(WUE)的调节效应,还测定了其不同器官的镉(Cd)含量。结果表明:在镉胁迫下,2种菊芋幼苗的干重、R/S、光合色素含量、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)、WUE均呈下降趋势,而胞间二氧化碳浓度(Ci)升高。(2)与镉胁迫相比,胁迫下外源喷施10-10、10-9、10-8、10-7mol/L 24-EBL作用下,两品系植株干重和R/S值均不同程度的上升,NY2、NY5的植株干重分别在10-9mol/L 24-EBL(EBL2)和10-8mol/L 24-EBL(EBL3)处理下达到最大值,分别增加50%和64%。镉胁迫下,外源24-EBL处理均提高菊芋的叶绿素(Chl)和类胡萝卜素(Car)含量,Pn、Gs、Tr也由此得到不同程度的上升,而Ci均下降,NY5的Ci下降更显著。镉胁迫下,外源EBL2和EBL3作用下均不同程度地提高其WUE,NY5的WUE增幅远大于NY2。镉胁迫下NY5的新完全展开叶Cd含量的积累明显高于NY2;而EBL2处理下可降低NY2的新完全展开叶Cd含量,但EBL3却显著增加NY5的叶片Cd含量。镉胁迫下,喷施EBL2的NY2的不同器官、NY5根的Cd含量均显著下降,而NY5其他器官的Cd含量变化不显著。NY5不同器官的Cd含量均明显高于NY2。上述表明,24-EBL可明显提高菊芋的耐镉水平,主要是因为外源喷施24-EBL能显著促进其光合和提高水分利用效率,从而改善Cd胁迫下菊芋幼苗的生长;而24-EBL对菊芋NY5非气孔限制的更显著改善是其促进其光合、水分利用的重要原因,也是其对NY5的生长调控效果优于NY2的重要原因之一。结果还显示,菊芋NY5植株生物量大,从环境中提取Cd的能力较好,因此可作为重金属污染土壤的植物修复的材料来利用。
关键词： 菊芋 幼苗 油菜素内酯 镉胁迫 生长 光合作用 镉含量
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海蓬子属植物EST序列的SSR信息分析与标记开发
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为明确海蓬子EST序列中SSR的总体特征,开发海蓬子EST-SSR引物,从NCBI网站下载海蓬子及其近缘植物EST序列,利用Cross match等软件过滤掉载体序列、polyA/T和过短或过长的低质量序列,经CAP3软件拼接后获得非冗余EST,然后用在线软件SSRIT从这些序列中查找SSR,采用primer5.0软件设计SSR引物,并进行PCR扩增,对引物适用性进行评价。结果表明,截止2013年5月,NCBI数据库共有海蓬子相关EST序列1 439条,经软件处理后获得无冗余EST序列1 139条,总长542 084 bp,从这些序列中搜索到210个SSR,分布于167条EST中,出现频率为14.66%。SSR平均分布距离为2.58 kb,平均长度为14.56 bp;三核苷酸重复是主导类型,占ESTSSRs总数的40.95%,其次为四核苷酸和五核苷酸重复,分别占29.52%和13.33%;二核苷酸占11.90%,六核苷酸最少,仅占4.29%。在所有类型的重复基元中,ACT/AGT类型最多,占10.95%,其次为AAT/ATT和ACG/CGT,分别占8.10%和6.67%。随机挑选了30个SSR位点,根据其两侧保守序列,设计并合成了相应的EST-SSR引物,对海蓬子DNA进行PCR检测分析,结果有14对引物获得了清晰的条带,进一步将其中的5对引物对10个样本小群体进行了验证,结果显示有较好的多态性。该研究结果表明海蓬子EST序列中含有高频率的SSR位点,ESTSSR标记开发效率较高,为进一步开展海蓬子分子标记研究提供了一批适用的EST-SSR引物。
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耐盐柳树BADH基因克隆及表达分析
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：根据毛果杨(Populus trichocarpa)甜菜碱醛脱氢酶BADH基因设计了1对引物,采用同源克隆法从耐盐柳树(Salix)L0911中扩增出BADH基因的1个开放阅读框架,其核甘酸序列全长1 539 bp,推测的氨基酸序列全长为512个氨基酸残基。该氨基酸序列与毛果杨PtBADH2、胡杨PeBADH2编码的同源性分别为95.83%、95.03%,与水稻的同源性为71.68%。说明BADH基因相对保守。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析结果表明L0911BADH基因的表达是受盐胁迫诱导的,说明BADH基因与盐胁迫存在紧密关联。
关键词： 柳树 甜菜碱醛脱氢酶(BADH) 基因克隆 表达分析
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猪鼻拭子与支气管肺泡灌洗液用于呼吸道分泌性抗体检测
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：黏膜免疫是机体抵抗细菌或病毒感染的第一道防线[1].因此,检测黏膜免疫反应对评估黏膜接种方案和病原与宿主之间的相互关系具有重要的意义[2].目前,支气管.肺泡灌洗液样本(BALF)在下呼吸道样本的采集中占有重要的地位,也是目前评价呼吸道黏膜免疫的常用样本.
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Box-Behnken设计优化益智仁多糖的提取及其抗氧化活性
《食品与发酵工业 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：通过单因素试验及Box-Behnken设计,获得了热水浸提益智仁多糖的最佳工艺;以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基能力、还原力、清除羟基自由基能力和螯合铁离子能力为指标,评价了益智仁多糖的抗氧化活性。结果表明:热水浸提益智仁多糖的最佳工艺条件为液料比20∶1(mL∶g)、浸提温度94℃、浸提时间110 min,在此条件下多糖得率为7.71%。益智仁多糖具有较好的抗氧化活性,清除自由基能力、还原力和螯合铁离子能力均表现出一定的浓度依赖性;益智仁多糖清除DPPH自由基、清除羟基自由基和螯合铁离子能力的半数有效浓度(EC50)分别为(0.21±0.02)、(1.34±0.03)和(1.65±0.1)g/L。
关键词： 益智仁 多糖 Box-Behnken设计 抗氧化
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江苏淮南麦区主栽小麦品种耐迟播特性研究
《麦类作物学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了解小麦品种间耐迟播性的差异,以扬麦16、扬麦18、扬麦20、镇麦9号、宁麦14和镇麦168等6个淮南麦区主栽小麦品种为材料,研究了不同播期(11月8日、11月15日、11月22日和11月29日)下小麦品种的产量、生育特性及抗逆性特点。结果表明,随播期的推迟,6个小麦品种产量均呈下降趋势,其中扬麦18和镇麦9号四个播期的产量均在4 500kg·hm-2以上,表现出较好的丰产性和耐迟播性;扬麦18对赤霉病的抗性最强,但生育期长(190~206d),成熟期最晚推迟至6月6日,且田间出现倒伏现象。综合来看,本试验条件下,淮南麦区小麦适播期为11月8日至11月15日,11月22日是最晚临界期。镇麦9号综合农艺性状较好,适宜淮南麦区晚播种植。
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灵芝、金针菇混合发酵饮料的研制
《食品科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：选择灵芝、金针菇优良菌株,混菌发酵培养,考察灵芝、金针菇混菌发酵工艺条件,将发酵液与菌丝体破碎,离心、过滤,取滤液与柠檬酸、蔗糖、蜂蜜等按一定比例调配,经均质、灌装、杀菌等制得饮料成品,优化饮料稳定剂配比和饮料调配条件,进行感官评定及成分分析。结果表明:灵芝、金针菇混合发酵最佳培养基为玉米粉添加量3%、花生粕添加量0.25%、蛋白胨添加量0.2%、葡萄糖添加量3%、酵母膏添加量0.1%、KH2PO4添加量0.3%、MgSO4·7H2O添加量0.15%(m/m),pH6.5;混合发酵最佳条件为装液量100mL/250mL、培养温度24℃、摇床转速110r/min、培养时间8d;稳定剂最佳配比为CMC-Na添加量0.25%、黄原胶添加量0.04%、β-环状糊精添加量0.50%(m/m);饮料最佳配方为蜂蜜添加量1.5%、调配液添加量16%、柠檬酸添加量0.15%、蔗糖添加量6%(m/m)。研制出的灵芝、金针菇混合发酵饮料口感好,营养全面,符合国家卫生标准。
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