猪肺炎支原体主要抗原蛋白的研究进展

张悦; 刘茂军; 邵国青; 《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of Swine,MPS)的病原,给养猪业造成巨大的经济损失。由于对具有良好免疫原性的Mhp特异性蛋白缺少深入研究,使得Mhp在致病机制、血清学检测方法和新型疫苗的研究发展上受到一定限制,从而影响了对MPS的控制。本研究综合Mhp主要粘附因子、膜蛋白及细胞质蛋白等主要抗原蛋白的研究进展,为该病原致病机理研究、建立特异性诊断方法和推动基因工程疫苗发展提供一定的理论基础,对MPS的正确诊断、检测、免疫预防和控制也有重要意义。

关键词： 猪肺炎支原体 特异性抗原蛋白 特异性诊断方法 疫苗

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大豆花叶病毒诱导的应用于膜蛋白酵母双杂交的大豆cDNA文库构建

崔晓艳; 陈新; 栾鹤翔; 智海剑; 《植物病理学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：前言大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)是大豆上最普遍的病害之一,严重影响大豆的产量和品质,通过筛选与病毒互作的寄主蛋白,根据互作蛋白的功能和两者的作用机制可揭示病毒侵染的分子机制。对于病毒编码的膜蛋白或者膜相关特性的蛋白,由于具有膜结合特性,在生物体内的互作多发生在膜上。传统的酵母双杂交系统发生在核内,试剂盒的载体上加了核定位信号

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堆肥预处理温度控制促进麦秸厌氧发酵产沼气

陈广银; 马慧娟; 常志州; 叶小梅; 杜静; 徐越定; 张建英; 《农业工程学报 》 2013 EI 北大核心 CSCD

摘要：为阐释温度在堆肥预处理影响秸秆厌氧发酵产沼气中的作用,以麦秸为原料,研究堆肥不同升温阶段麦秸的厌氧发酵产气特性,并以麦秸堆肥的温度数据为基础,以灭菌后的麦秸为原料进行模拟堆肥(不同温度处理),模拟堆肥后的麦秸进行厌氧发酵产沼气。结果表明,在堆温升至55℃前,麦秸干物质(TS)损失率为4.06%,当堆温升至55℃后麦秸TS损失率迅速增加,堆肥10 d后麦秸TS损失率达22.45%;堆肥后麦秸厌氧发酵产气速率并无明显提高,TS产气量随堆肥时间先增加后降低,以堆温升至55℃时麦秸TS产气量最大,为349.92 mL/g,较开始堆肥增加了7.56%,扣除堆肥造成麦秸有机物损失,堆肥预处理对麦秸产气量并无明显促进;当堆温超过55℃以上9 d的麦秸产气量仅为开始堆肥的66.58%。模拟堆肥的结果表明,不同温度处理对麦秸有机物损失、物质组成均有较大影响,模拟堆肥后麦秸半纤维素大幅降低了28.10%,TS产气量随处理温度、处理时间的增加先增加后降低,当处理温度为55℃时获得最大TS产气量,为342.36 mL/g,较未处理提高了8.35%;随着处理温度的提高和处理时间的延长,麦秸TS产气量逐渐降低。以上结果表明,堆肥预处理产生的高温对破坏秸秆物质结构、提高其厌氧生物转化性能有较大影响,当秸秆堆体温度升至55℃时应停止堆肥,进行厌氧发酵产沼气。该文可为堆肥预处理在秸秆沼气工程中应用提供参考。

关键词： 厌氧消化 沼气 温度 麦秸 堆肥预处理

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弓形虫重组MIC3蛋白间接ELISA检测方法的建立

白昀; 王海燕; 张悦; 姚景霆; 吴叙苏; 刘冬霞; 邵国青; 《中国兽医科学 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：为检测弓形虫特异性抗体,以纯化的重组MIC3蛋白作为包被抗原,用羊抗猪IgG-HRP作为酶标二抗,分别对抗原浓度、血清稀释度、酶标二抗稀释度以及作用时间等进行了优化,初步建立了检测弓形虫特异性抗体的间接ELISA方法。结果显示,该方法检测猪球虫、猪肺炎支原体、猪圆环病毒2型、副猪嗜血杆菌等阳性血清均为阴性,表明该方法具有良好的特异性。组内和组间重复性试验的变异系数均小于8%,表明该方法具有较好的重复性。应用所建立的ELISA方法和商品化试剂盒A(IHA)、B(ELISA)同时检测从南京某猪场采集的猪血清样品166份,符合率分别可达94.58%和95.78%。该方法为我国进行弓形虫病的诊断与流行病学调查提供了一种技术手段,并为试剂盒的研制与开发奠定了前期工作基础。

关键词： 刚地弓形虫 MIC3蛋白 酶联免疫吸附试验 抗体检测

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猪圆环病毒2型Rep蛋白基因的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立

李文良; 毛立; 张纹纹; 王小敏; 茅爱华; 甘源; 江杰元; 《中国兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：采用PCR方法扩增猪圆环病毒2型(PCV-2)Rep蛋白基因,克隆入原核表达载体pET-32a(+),转化大肠杆菌BL21构建重组表达菌,经SDS-PAGE检测目的蛋白得到成功表达,采用His标签单抗和PCV-2阳性猪血清进行Western blot鉴定表明重组蛋白具有良好的抗原性。利用纯化的重组蛋白rRep作为包被抗原,通过反应条件优化,建立了间接ELISA抗体检测方法。抗原最适包被质量浓度为1mg/L(0.1μg/孔),待检血清最适稀释度为1∶100,作用时间为1h,酶标抗体最适稀释度为1∶3 000。用该方法检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)阳性血清,结果均为阴性;批内和批间重复试验变异系数分别为<5%和<10%,表明本方法具有较好的特异性和重复性。应用rRep-ELISA对113份血清样品进行检测,与rCap-ELISA结果比较,rRep-ELISA检测阳性率为50.44%(57/113),略低于后者的54.87%(62/113),2种方法检测符合率为88.5%(100/113),具有较好的一致性。这为PCV-2感染的流行病学调查和新型ELISA诊断试剂盒的研制奠定基础。

关键词： PCV-2 Rep蛋白 原核表达 ELISA

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农村面源污染治理的“4R”理论与工程实践——氮磷养分循环利用技术

常志州; 黄红英; 靳红梅; 马艳; 叶小梅; 薛利红; 杨林章; 《农业环境科学学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：农业面源污染已经取代点源成为水环境污染最重要的来源,其主要的污染物为各种途径排放的氮和磷,有效减少氮和磷的排放或循环利用这部分养分,不仅可以减少污染物的排放,也是实现氮磷养分资源化利用的重要途径。本文在以往研究成果的基础上,结合国内外已有研究报道,重点阐述了畜禽粪便、作物秸秆、农村生活污水及工程处理尾水中的氮磷养分利用方式、应用效果及环境效应。畜禽粪便固体部分经高温好氧堆肥后可直接还田,养殖肥水和沼液可替代25%~75%的化肥。农作物秸秆可直接还田或经堆肥化处理及能源化利用后还田。农村生活污水、农田排水及富营养化河水中的氮磷养分可利用稻田人工湿地进行处理和回用。在循环利用农业废弃物中的氮磷等养分资源时,要考虑废弃物自身及农田的特征,并与农作物的水肥管理技术相结合,兼顾环境和经济效益。

关键词： 农业废弃物 氮和磷 循环利用 农田 面源污染

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大麦苏啤4号幼胚愈伤组织的诱导及植株的高频再生

余桂红; 张旭; 孙晓波; 马鸿翔; 《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：为了给以长江中下游地区优良品种为受体的大麦遗传转化研究奠定基础,以长江中下游地区大麦优良品种苏啤4号的幼胚为外植体材料,对大麦幼胚离体培养再生体系进行研究。结果显示,与添加2.0 mg/L 2,4-D处理相比,愈伤组织诱导培养基中添加2.0 mg/L麦草畏(Dicamba)处理显著地促进愈伤组织的诱导,出愈率由78.33%提高至100.00%。愈伤组织分化培养基中添加2.0 mg/L玉米素(Zeatin,ZT)最有利于愈伤组织的分化,分化频率为75.56%。促分化培养有利于愈伤组织的分化,分化频率由处理前的75.56%提高至95.56%。生根培养基中添加0.5 mg/L麦芽提取物(Malt extract,ME)可以显著地增加单株平均根数。表明本试验建立的大麦幼胚离体培养再生体系可以用于大麦的遗传转化和其他遗传学研究。

关键词： 大麦 幼胚 愈伤组织 植株再生

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猪肺炎支原体致病机理研究进展

李彦伟; 刘茂军; 武昱孜; 张旭; 李桂兰; 张映; 邵国青; 《动物医学进展 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：猪肺炎支原体是猪支原体肺炎的主要病原。近年来对该病原研究较多,但主要都集中在基因和膜蛋白方面。论文从猪肺炎支原体基因结构、黏附蛋白、蛋白组学和猪肺炎支原体的细胞炎性因子反应等方面对猪肺炎支原体的致病机理进行综述,为相关研究提供参考。

关键词： 猪肺炎支原体 致病机理 蛋白组学 细胞炎性因子

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棉花草甘膦抗性基因CP4-EPSPS的初步定位

刘吉焘; 马晓杰; 狄佳春; 陈旭升; 《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：以抗草甘膦陆地棉品系G-6和不抗草甘膦海岛棉品系海7124为试验材料,对分离世代进行检测,分析抗性基因的遗传规律;利用覆盖棉花26条染色体的234对核心引物,通过群体分离分析法进行差异性标记筛选,利用F2分离群体对抗性基因进行染色体定位。结果表明,抗草甘膦性状是受1对显性基因控制的质量性状。特异引物检测显示控制抗草甘膦性状的基因为人工合成基因CP4-EPSPS。利用筛选获得的27对多态性引物检测F2作图群体每个单株的基因型,发现分子标记NAU5417、NAU1339、BNL3992、BNL2448、NAU2140与目的基因CP4-EPSPS连锁。进一步筛选,共得到15个分子标记。参照现有的遗传图谱,推断目的基因CP4-EPSPS位于棉花第5染色体BNL2448与NAU2140之间,遗传距离分别为7.0 cM和16.2 cM。

关键词： 棉花 抗草甘膦 CP4-EPSPS SSR标记 基因定位

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不同品种鸭宰后成熟过程中肉质的变化

谢程炜; 诸永志; 王道营; 刘芳; 徐为民; 《南方农业学报 》 2013 CSCD

摘要：【目的】对比分析不同品种鸭宰后成熟过程中肉质的变化,为鸭肉的加工烹调提供参考。【方法】跟踪研究金定鸭、金陵乌嘴鸭和樱桃谷鸭宰后成熟过程中鸭胸肉的pH、剪切力、蒸煮损失、肌原纤维小片化指数的变化情况。【结果】3个品种的鸭胸肉在宰后2h达到极限pH、剪切力最大值和蒸煮损失最大值,但解僵成熟时间各不相同,其宰后成熟时间分别为:金定鸭肉在宰后8~10h,金陵乌嘴鸭肉在宰后4~6h,樱桃谷鸭肉在宰后4~8h。【结论】不同品种鸭的僵直时间相近,均在宰后2h左右,但解僵成熟时间各不相同,且鸭养殖日龄越长,其肉质成熟时间越长。即鸭宰后2h内应避免加工或烹调,而其最适加工烹调时机需等到解僵成熟后。

关键词： 鸭肉 宰后成熟 肉质 僵直 剪切力 蒸煮损失 肌原纤维小片化指数

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