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陆地棉GhNIP5.1基因的电子克隆及生物信息学分析

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:水通道蛋白(Aquaporin,AQP)是古老的通道蛋白MIP(Membrane intrinsic protein)家族成员之一,是广泛存在于动植物和微生物中,负责转运水分子和某些小分子物质的一类膜嵌入式蛋白。

关键词: 陆地棉 水通道蛋白 GhNIP5.1基因 电子克隆 生物信息学

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梨胶胞炭疽病菌的分离、鉴定及其生物学特性

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:近年来,由胶胞炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起的梨炭疽病在江苏、安徽两省酥梨产区普遍发生.本研究采集病样,分离并鉴定梨胶胞炭疽病菌25 株.采用梨果表面刺伤后接种菌块的方法,观察炭疽病菌对砀山酥梨的致病性.平板接种炭疽病菌菌块,测试不同培养温度、pH 值、碳源、氮源对炭疽病菌菌丝生长的影响.结果表明:参试的25 株炭疽病菌中3 株致病性较强,18 株致病性中等,4 株致病性较弱.致病性强的菌株其菌落颜色较深,菌丝浓密;致病性弱的菌株其菌落颜色均为白色,菌丝稀疏.菌落生长快,菌株的致病性较强;菌落生长慢,菌株的致病性较弱.菌株的产孢能力和致病性之间无相关性.梨胶胞炭疽病菌最适生长温度为25 - 30 ℃,最适生长pH 值为5. 0 -7.0;菌丝对多种单糖和双糖等碳源及有机氮、无机氮均可利用,最适碳源为蔗糖,最适氮源为牛肉浸膏.

关键词: 梨胶胞炭疽病菌 致病性 生物学特性

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雾滴体积和测量时间对水稻叶面雾滴接触角的影响

西南农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:为了探明雾滴体积和测量时间对接触角测量的影响程度,以蜡膜和载玻片为参照,研究了不同体积和不同测量时间下液滴在稻叶表面的接触角,并通过扫描电镜观察了稻叶的表面特性。结果表明:液滴体积越大,在稻叶上的接触角越小,测量体积可选择1~5μl,测量时间可选择在液滴滴下后40~60 s。液滴在滴下后的10 s内接触角变化率较大,其中以亲水的载玻片上的接触角变化率(0.66±0.03)最大,随着时间的延长接触角变化率显著降低。电镜观察结果表明:稻叶为疏水界面很大程度取决于其表面的SiO2-蜡质复合体所形成的乳头状突起,其正、反面的密度分别为(1778.4±13.2)和(1563.6±35.2)个·mm-2。

关键词: 水稻 接触角 雾滴体积 测量时间 乳突

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花生ALDH7基因的鉴定与盐胁迫表达

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:乙醛脱氢酶7(ALDH7)是乙醛脱氢酶家族中极其保守的一类蛋白质,该类蛋白质在植株盐胁迫中起重要作用。本研究利用花生表达序列标签(EST)数据库对花生ALDH7基因进行挖掘,得到一个全长为1 524 bp的开放阅读框(ORF),编码508个氨基酸组成的蛋白质,对序列进行结构域分析后确认为ALDH7基因。对花生ALDH7在盐胁迫下的表达模式进行研究,发现0.5%NaCl处理能显著提高根、叶中该基因的表达。进一步通过蛋白质同源性、进化树与蛋白质3D结构的分析,明确花生ALDH7与已知的动植物ALDH7基因在序列、蛋白质结构上同源。

关键词: 乙醛脱氢酶7 花生 盐胁迫

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棉花环丙烷脂肪酸合酶基因CPA-FAS-2启动子的克隆以及特征分析

分子植物育种 2013 CSCD

摘要:含有三碳碳环的环丙烷脂肪酸(CPA-FAs)和环丙烯脂肪酸(CPE-FAs)由于具有特殊的理化性质因而在化工领域有特殊的应用。环丙烷脂肪酸合酶基因负责合成CPA-Fas,植物中尚没有这类基因启动子特征的相关报道。本研究克隆了一个棉花环丙烷脂肪酸合酶基因CPA-FAS-2的启动子区域,对该段区域进行生物信息学分析后发现其含有根、花器官以及种子特异表达元件,还含有磷(P)、硫(S)缺乏、病原菌和干旱等逆境响应元件等。通过构建该启动子序列与GUS基因融合表达载体并转化拟南芥,对T1代转基因材料染色后发现该启动子不仅具有器官表达差异性,并且还受发育时期影响。GUS基因在幼苗期并不表达,只在植株成熟期表达,并且表达部位只限于茎基部、根、种子以及花药。进一步利用GUS定量,结果表明该启动子受P缺失以及干旱胁迫的诱导。本研究进一步明确了环丙烷脂肪酸合酶基因的表达特征,有利于促进该基因在种质创新中的利用。

关键词: 棉花 环丙烷脂肪酸合酶基因 启动子 器官表达差异性

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重瓣杜鹃花新品种‘紫金艳后’

园艺学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:杜鹃花‘紫金艳后’是‘小叶铁红’ב汉堡’杂交育成的重瓣新品种。花色艳红;雄蕊、花萼皆完全瓣化为花瓣;花径6.0~6.5 cm。植株长势强健,株形紧凑美观;耐高温高湿,适宜长江中下游地区设施栽培。自然始花期3月下旬至4月上旬,持续25~28 d。

关键词: 杜鹃花 重瓣 品种

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嵌合卵清蛋白-兔出血症VP60蛋白病毒样颗粒在杆状病毒表达系统中的表达及其鉴定

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:利用卵清蛋白(OVA)第257~264位氨基酸替换兔出血症病毒的主要结构蛋白质VP60不同位置处相应数量的氨基酸,研究了氨基酸的替换对VP60蛋白表达及病毒样颗粒装配的影响。通过重叠延伸剪接术(SOE)法,OVA T-细胞表位(257~264位氨基酸)分别取代VP60 3个区域(502~510位氨基酸、411~417位氨基酸、302~309位氨基酸),得到3种重组嵌合VP60基因。利用杆状病毒表达系统,得到3种重组穿梭载体Bacmid,分别命名为Bacmid-V-1、Bacmid-V-2、Bacmid-V-3。将重组阳性质粒转染Sf9昆虫细胞,得到3种重组病毒rBac-v-1、rBac-v-2、rBac-v-3,3组重组病毒感染Sf9细胞后表达的3种蛋白质分别命名为Z1、Z2和Z3。经RT-PCR、IFA、SDS-PAGE、Western blot等方法鉴定后,利用电镜观察此3种重组蛋白质病毒样颗粒的形成情况。3种重组嵌合VP60蛋白在Sf9昆虫细胞中得到表达,3种重组嵌合蛋白质均可以形成与VP60蛋白类似的病毒样颗粒。

关键词: 兔出血症病毒(RHDV) VP60蛋白 卵清蛋白 sf9细胞 病毒样颗粒(VLPs)

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莲藕渗透脱水工艺优化研究

食品科学 2013 北大核心 CSCD

摘要:为获得莲藕片渗透脱水最佳工艺和护色条件,比较不同护色剂的护色效果,探讨不同渗透液、料液比、渗透液质量浓度、渗透温度、渗透时间对莲藕失水率的影响。结果表明:0.002g/mL柠檬酸护色效果良好,选用麦芽糊精-氯化钠复合渗透液、料液比1:10(g/mL)时脱水效果佳;随渗透液质量浓度的增加、温度的升高、时间的延长,莲藕失水率增大。通过正交试验得,当麦芽糊精的质量浓度为0.6g/mL、渗透温度50℃、渗透时间180min时,莲藕渗透脱水的失水率最大,为69.50%。

关键词: 莲藕 渗透脱水 护色

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鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因密码子的优化及其在大肠杆菌中的表达

中国兽医科学 2013 北大核心 CSCD

摘要:为了提高鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因在大肠杆菌中的表达量,分析近期引起安徽免疫失败IBD病例中分离的强毒分离株AH1株的VP2基因,发现有49个稀有密码子,其中编码Arg(R)的有16个,编码Gly(G)的有6个。编码精氨酸的AGG(AGA)2个稀有密码子紧密相连(R区),另外还有2个相对比较集中的GGG密集区(G区)。根据大肠杆菌密码子使用频率对IBD强毒分离株(AH1株)VP2基因进行改造并合成优化基因,命名为mVP2。将mVP2基因分别克隆到pET-32a及pBV220原核表达质粒,构建了含密码子优化型IBDV VP2基因的原核表达质粒pET32-VP2和pBV220-VP2。SDS-PAGE结果显示,优化基因mVP2在大肠杆菌中的表达较野生型基因有十分显著的提高。Western-blot检测到目的蛋白能够与鸡抗IBDV超免疫血清反应。本研究为开展VP2基因结构与功能的深入研究及IBD免疫预防和快速诊断奠定了理论基础。

关键词: 鸡传染性法氏囊病病毒 VP2 密码子优化 表达

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沼液施用对辣椒疫病的防治效果及对土壤生物学特性的影响

中国农业科学 2013 北大核心 CSCD

摘要:【目的】研究猪粪、牛粪及其沼液配合化肥施用对辣椒疫病的防治效果以及对土壤生物学特性的影响,探讨施用沼液对植物土传病害防治的机制及其农用价值。【方法】利用连续3季的盆栽试验,研究等氮下,50%猪粪、牛粪及其沼液N替代比例配合化肥施用对辣椒疫病的防治效果及土壤酶活性的影响,并采用PCR-DGGE方法研究土壤微生物区系的变化。【结果】猪粪沼液配合施用化肥对辣椒疫病防治效果最好(平均防治效果为79.3%),其次为牛粪沼液(平均防治效果为38.5%),施用猪粪、牛粪对辣椒疫病无显著防治效果;2种沼液处理辣椒生物量显著高于猪粪、牛粪处理及阴性对照处理;施用猪粪沼液处理土壤荧光素二乙酸酯(FDA)水解酶活性、过氧化氢酶活性及多酚氧化酶活性分别比阴性对照高出3.44倍、66.7%和76.7%。此外,2种沼液处理均可增加根际土壤的细菌、真菌、放线菌、荧光假单胞菌及木霉的数量,提高土壤细菌、真菌的多样性指数。【结论】猪粪沼液对辣椒疫病的防治效果较好,体现出良好的农用价值。调控土壤微生物群落结构、提高土壤肥力可能是其抑制植物土传病害的机制之一。

关键词: 沼液 土壤生物学特性 辣椒疫病 畜禽粪便 微生物区系

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