科研产出
青花菜与甘蓝型油菜小孢子共培养技术研究
《核农学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：研究易出胚基因型与难出胚基因型小孢子共培养,可促进难出胚基因型小孢子胚胎发育,提高产胚率。本研究以易出胚甘蓝型油菜(ZS758)基因型与难出胚青花菜(Q1和Q2)基因型为试材进行小孢子混合培养,研究不同数量花蕾混合共培养对青花菜小孢子胚胎诱导效率、胚胎发育过程、胚状体数量及类型和植株再生。结果表明:共培养中青花菜和油菜小孢子胚胎发育过程基本一致;不同处理中,T1-3(2个青花菜Q1花蕾+10个ZS758花蕾)和T2-3(2个青花菜Q2花蕾+10个ZS758花蕾)每蕾平均出胚数分别为12.5个和14.1个、子叶型胚比例分别为78.3%和81.7%、小孢子胚萌发率分别为92.6%和87.6%,均显著高于对照;T1-2(6个青花菜Q1花蕾+6个ZS758花蕾)和T2-2(6个青花菜Q2花蕾+6个ZS758花蕾)获得的青花菜小孢子再生植株数最多,分别为13株和27株;青花菜和油菜小孢子再生植株形态特征差异显著,易于区分。此方法不仅能有效促进难出胚青花菜基因型胚胎发育获得胚状体,而且提高了子叶型胚所占比例,对提高小孢子培养应用效率具有重要意义。
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Glu-1位点缺失对小麦麦谷蛋白聚合体粒度分布及面团特性的影响
《作物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：以Glu-1位点正常和部分缺失的小麦品系为材料,探讨HMW-GS和LMW-GS组成与谷蛋白聚合体粒度分布和面团特性的关系,为利用HMW-GS缺失系改良小麦品质提供理论依据。在20个供试硬白冬麦品系中,1个品系为Glu-A1位点缺失,5个品系为Glu-D1缺失,3个品系为Glu-A1和Glu-D1双缺失。所有品系的蛋白质含量皆较高(13.39%~14.12%),品系间无显著差异,缺失系与非缺失系间也无显著差异。Glu-1位点缺失显著降低了高分子量谷蛋白/低分子量谷蛋白比(HMW/LMW)、不溶性谷蛋白大聚体的含量和百分比。谷蛋白/醇溶蛋白比(GLU/GLI)在基因型间变幅较小,且在缺失系和非缺失系间无显著差异。Glu-1位点缺失显著降低了面团弹性,但显著提高了面团的延展性。部分Glu-1位点缺失系仍具有较高的面团强度和突出的延展性,谷蛋白聚合体粒度分布和面团特性受谷蛋白亚基组成和表达量的共同影响。研究结果表明,利用Glu-1位点亚基缺失可能是改善面筋延展性,提高食品加工品质的方法之一。
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大豆BIEX群体维生素E含量的遗传分析
《华北农学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：大豆高维生素E含量专用品种的选育是现代大豆品质育种的重要方向,为给大豆高维生素E含量专用品种选育提供遗传学依据,通过对大豆重组自交系群体2008-2009年的维生素E含量进行相关的遗传分析,以Essex×ZDD2315衍生的208个重组自交家系群体BIEX为材料,用主基因+多基因混合遗传模型,分析大豆α-、γ-、δ-生育酚含量以及VE总含量的遗传机制。结果表明,α-生育酚含量、γ-生育酚含量以及VE总含量均属于2对主基因+多基因遗传模型,主基因遗传率分别为59.62%,75.99%,77.05%,多基因遗传率分别为35.90%,13.96%,15.05%;δ-生育酚含量属于1对主基因+多基因遗传模型,主基因遗传率为50.39%,多基因遗传率为38.11%。维生素E及其组分含量遗传涉及主基因和多基因,主基因遗传率在50%以上,多基因遗传率在10%以上,建议育种中要兼顾主基因和微效多基因的利用。
关键词： 大豆 维生素E含量 主基因+多基因混合遗传模型 分离分析
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微波消解-HR-CS FAAS测定保健酒中钙、铁、锌和锰
《酿酒科技 》 2015 北大核心
摘要：建立微波消解-高分辨连续光源火焰原子吸收光谱法测定保健酒中Ca、Fe、Zn和Mn的方法。试验选择微波消解作为样品的前处理方式,研究了乙炔流量和燃烧器高度对吸光度的影响,通过单因素试验确定了各金属元素最佳乙炔流量和最佳燃烧器高度。在优化条件下,使用高分辨连续光源原子吸收光谱仪测定保健酒中Ca、Fe、Zn和Mn的质量浓度分别为21.87 mg/L、0.525 mg/L、0.213 mg/L和2.56 mg/L,本法的精密度(RSD)均小于2.8%,加标回收率为96%~105%。该方法准确、稳定,具有较高的实用价值,为食品中多种金属元素的检测提供了科学依据。
关键词： 微波消解 高分辨连续光源火焰原子吸收光谱法 保健酒 金属元素
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海岸和内陆沙地砂引草(Messerschmidia sibirica)对自然环境和沙埋处理适应的生理差异
《中国沙漠 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：砂引草(Messerschmidia sibirica)是一种耐盐、耐旱固沙地被植物,既能生长在海岸沙地并成为优势植物,也在内陆干旱沙地有分布。本文以科尔沁内陆沙地和烟台海岸沙地生长的砂引草为试验材料,研究了两沙地土壤化学特性、水温特性及在自然状况和沙埋胁迫条件下两沙地砂引草叶片丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活力和渗透调节物含量的变化特征。结果表明:(1)海岸沙地土壤含盐量较内陆沙地高5倍,但土壤地表温度略低。(2)在自然和沙埋条件下,两沙地砂引草叶中MDA含量较低。(3)生活在内陆干旱高温沙地上的砂引草,在自然和沙埋处理中叶片平均脯氨酸和可溶性糖含量均高于海岸沙地砂引草,自然状况下,其叶片平均脯氨酸和可溶性糖含量分别较海岸沙地的高25%~50%和高3.5倍。(4)海岸沙地砂引草在自然和沙埋处理5d和10d中,其叶片平均超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活力均大于内陆沙地砂引草,且两者差异显著(p<0.05),自然状况下海岸沙地砂引草叶片SOD、POD、CAT平均活力分别较内陆高14%、140%和118%。(4)两沙地砂引草对沙埋胁迫的生理响应类似,随着沙埋强度的增加砂引草沙上叶片MDA含量变化不大,SOD和CAT活力和脯氨酸含量增加,可溶性糖含量下降。研究表明,砂引草具有在不同环境下利用不同渗透调节剂维护水分代谢平衡、提高抗氧化酶活力抑制膜脂过氧化维持氧自由基代谢平衡的生理调控能力,该生理可塑性可能是其具有较宽生态幅的生理基础。
关键词： 砂引草(Messerschmidia sibirica) 海岸沙地 内陆沙地 沙埋 抗氧化酶活力 渗透调节物
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利用E.coli表达猪圆环病毒2型Cap蛋白生产病毒样颗粒疫苗
《中国农业科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究利用大肠杆菌可溶性表达PCV2b亚型ORF2基因,利用重组Cap蛋白制备PCV2 VLP疫苗的可行性。【方法】根据大肠杆菌密码子使用频率表优化合成PCV2 NJ株ORF2基因,将其插入原核表达载体p QZ1,鉴定阳性后转入表达宿主菌BL21,利用原核表达平台CVC1102对重组菌进行诱导表达。利用SDS-PAGE与Western blotting对目的基因的表达及产物的可溶性进行分析;利用电镜分析技术鉴定重组Cap蛋白VLP组装;利用BCA试剂盒测定重组大肠杆菌破碎后上清中总蛋白量,利用薄层扫描分析确定目的蛋白百分比,得出目的蛋白量,将重组Cap蛋白的浓度调整为1 mg·m L-1。使用不同剂量的重组蛋白与206佐剂乳化,免疫2—3周龄抗原抗体双阴性的仔猪,同时设含免疫增强剂CVC1301、CVC1302的试验组、同类制品免疫对照组与空白对照组,免疫后14 d与21 d所有试验猪采血,分离血清,利用武汉科前生物科技有限公司的猪圆环病毒2型抗体ELISA检测试剂盒检测试验猪血清中PCV2抗体水平;免疫后28 d试验猪按照兽用生物制品质量标准汇编中公布的PCV2攻毒程序,利用PCV2 NJ株F6代进行强毒攻击试验,肌肉注射与口服PCV2 NJ株各105.0TCID50,同时利用乳化的钥匙孔血蓝蛋白及硫酸巯基乙醇培养基进行免疫刺激,攻毒后25 d,对所有试验猪进行解剖检测,通过攻毒过程中试验猪体温变化、试验猪平均相对日增重、解剖时试验猪肺部与相关淋巴结的大体变化及攻毒后PCV2核酸检测等4个方面评价大肠杆菌表达制备的PCV2 VLP的免疫效力。【结果】SDS-PAGE结果表明PCV2 NJ株优化的ORF2基因在大肠杆菌中得到了高效表达,表达产物以完全可溶性形式存在于菌体超声波破碎后的上清中;Western blotting分析结果显示表达的重组Cap蛋白能够与PCV2阳性血清发生反应;电镜下观察可见大量直径在17 nm左右的PCV2病毒样颗粒存在于超声破碎后的上清中;500μg/头重组VLP疫苗免疫猪产生较高的抗体水平,单次免疫后21 d抗体100%达到合格,对PCV2强毒的攻击提供完全保护。【结论】实现了PCV2 Cap蛋白在大肠杆菌中高效可溶性表达,重组Cap蛋白体外自我组装成病毒样颗粒,且具有良好的免疫原性,可用于制备PCV2亚单位疫苗。
关键词： 猪圆环病毒2型 ORF2基因 可溶性表达 病毒样颗粒 免疫原性
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