科研产出
辣椒疫霉病生防菌的筛选、防效及抑菌机理
《植物病理学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:由辣椒疫霉(Phytophthora capsici)引起的辣椒疫霉病是一种具有毁灭性的土传病害,可导致辣椒减产甚至绝收,造成重大经济损失。本研究通过平板对峙培养法筛选到一个对P.capsici拮抗效果较好的细菌菌株1LN2,进一步根据生理生化特性、基于16S rRNA的系统发育分析以及核酸序列分析结果,将其鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。抑菌谱测定结果显示1LN2菌株对镰孢菌(Fusarium graminearum)、禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis)、核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)等10种植物致病真菌均具有拮抗作用,表明1LN2的抑菌谱较广。1LN2发酵菌液可强烈抑制P.capsici菌丝生长并导致菌丝畸形。温室盆栽防效结果显示1LN2菌液灌根处理对6~8叶期、9~11叶期、花蕾期三个不同生育期的辣椒疫霉病的防效分别为85.26%、61.27%和49.73%。田间防效试验结果表明1LN2对辣椒疫霉病的防效为62.35%。1LN2无菌发酵液也可显著抑制P.capsici菌丝生长,且1LN2可分泌纤维素酶、蛋白酶等细胞壁降解酶。全基因组测序结果显示1LN2基因组中包含subtilin、bacillibactin及macrolactin等8种次生代谢产物合成基因簇且存在合成抑菌物质的未知基因簇。此外,1LN2处理能够促进辣椒植株生长,导致辣椒防御酶(PAL、POD和SOD)活性增高。本研究为辣椒疫霉病绿色防控提供了有潜在应用价值的生防菌株1LN2,为深入揭示辣椒疫霉病生物防治机理提供了参考。
关键词: 解淀粉芽孢杆菌 辣椒疫霉病 生物防治 绿色防控 抑菌机理
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黄瓜绿斑驳花叶病毒MP基因的原核表达及抗血清制备
《热带作物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)是危害瓜类作物的重要植物病毒之一,其运动蛋白(movement protein, MP)在病毒传播和致病过程中起关键作用。本研究通过RT-PCR克隆CGMMV的MP基因,构建原核表达载体pET-32a-MP,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功诱导表达分子量约48 kDa的重组MP融合蛋白。利用镍柱亲和层析纯化获得高纯度蛋白(纯度≥80%),以此免疫新西南大白兔制备多克隆抗体。Western blot和ELISA分析表明,抗血清效价达409 600,且能特异性识别CGMMV侵染叶片中的MP蛋白,与烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)等其他病毒无交叉反应。本研究实现了CGMMV MP蛋白的原核高效表达与特异性抗体制备,为病毒快速检测、免疫组织化学及蛋白功能研究提供重要工具,对保障瓜类作物安全生产具有重要意义。
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嗜水气单胞菌感染后中华绒螯蟹肝胰腺的转录组分析
《江苏农业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:本研究旨在解析嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)基因表达调控的影响机制,通过RNA-Seq比较雌雄个体在病原侵染 24h后肝胰腺组织的基因差异表达谱,初步分析雄性中华绒螯蟹和雌性中华绒螯蟹是否存在免疫二态性.结果显示,雌性中华绒螯蟹感染组和对照组共富集到3 447个差异表达基因,包括1 424个上调表达基因和2 023个下调表达基因;雄性中华绒螯蟹感染组和对照组共富集到3 035个差异表达基因,包括1 462个上调表达基因和1 573个下调表达基因.雌蟹和雄蟹富集到免疫相关的差异表达基因主要有泛素蛋白连接酶基因、Toll样受体基因、C型凝集素基因、热休克蛋白基因、溶菌酶基因等.GO富集分析结果显示,大量差异表达基因被富集在免疫相关的生物过程.KEGG富集分析结果表明,差异表达基因显著富集在118 个通路,其中免疫相关的代谢通路主要有溶酶体、细胞外基质(ECM)受体相互作用、过氧化物酶体和吞噬体等.此外,挑选转录组数据中的 9 个免疫相关基因进行qRT-PCR验证,验证结果与RNA-Seq结果一致.本研究初步探究了中华绒螯蟹肝胰腺响应嗜水气单胞菌侵染的分子机制.
关键词: 中华绒螯蟹 嗜水气单胞菌 肝胰腺组织 转录组 差异表达基因
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T7噬菌体培养及纯化工艺研究
《安徽农业科学 》 2025
摘要:为降本增效,制备高品质T7噬菌体,分别开展培养及纯化工艺研究.绘制BL21 大肠杆菌在 3 种培养基中的生长曲线,优化T7噬菌体最佳接种时间以及最佳接种MOI.大量扩增T7噬菌体,通过超滤浓缩和PEG沉淀纯化噬菌体颗粒,再经Triton X-114变温萃取去除内毒素.结果显示,BL21在转接培养后2.5 h开始进入对数生长期,在对数后期以MOI=10-4接种T7 噬菌体,子代噬菌体产量可达到6.47×1010 PFU/mL.通过超滤浓缩可以有效浓缩T7噬菌体颗粒,同时去除约90%的内毒素,PEG沉淀可从浓缩液中回收约90%的噬菌体颗粒,且有效去除大部分宿主蛋白,但不能完全去除内毒.经3次Triton X-114变温萃取,最终收获的T7噬菌体产物中内毒素含量降至55 UE/mL.研究结果表明,通过优化T7噬菌体的培养条件可以实现高效扩增,联合使用超滤、PEG沉淀和Triton X-114 萃取等工艺能够制备高纯度T7噬菌体颗粒.
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基于专利的智慧农业领域技术融合演化分析
《情报探索 》 2025
摘要:[目的/意义]智慧农业是典型的新兴交叉学科,对其技术融合演化进行分析有助于揭示发展规律、预测发展趋势。[方法/过程]以智慧农业领域的专利为数据源,根据技术领域发展趋势、共现网络等分析其技术融合演化特征,根据IPC共现网络识别其技术融合的模式演变及重要技术中介。[结果/结论]智慧农业领域的基础、核心技术主要分布于其他特殊机器、测量、控制等技术领域;在IT管理方法、计算机技术、电信等技术的驱动下,智慧农业领域的技术融合不断加深,不同技术领域之间的联系越来越紧密,智慧农业领域的研究范围也不断扩大;智慧农业通过测量、控制、其他特殊机器等基础技术领域和IT管理方法、数字通信、视听技术等新兴技术领域实现跨领域技术融合。
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新德里番茄曲叶病毒江苏西瓜分离物的鉴定与克隆
《植物病理学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:新德里番茄曲叶病毒(tomato leaf curl New Delhi virus, ToLCNDV)是我国新发现的一种烟粉虱(Bemisia tabaci)传双生病毒。它最早在浙江和上海发现,后又在江苏发现,严重危害到当地葫芦科作物生产。本研究对江苏南通地区采集的西瓜分离物进行PCR检测,并通过摩擦接种本氏烟、番茄、西瓜、甜瓜和黄瓜,接种植物均表现出卷曲、褪绿等症状,结果表明该病毒株系可以机械传播。通过PCR进行全基因组扩增与序列分析,结果表明其与我国已报道的分离物亲缘关系最近,均聚为一支。系统进化还显示该病毒的进化与地理位置呈现相关性,我国的ToLCNDV可能来源于印度地区。我国目前已发现的分离物序列均不存在基因重组现象。本研究对了解该病毒的来源、进化、变异以及防控具有一定的参考价值。
关键词: 新德里番茄曲叶病毒(ToLCNDV) 江苏分离物 鉴定 序列分析
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盐碱地胁迫对江苏麦区小麦籽粒品质的影响
《大麦与谷类科学 》 2025
摘要:为探究盐碱地胁迫对小麦籽粒品质的影响,以104份具有遗传多样性的小麦种质资源为试验材料,在江苏盐城南洋试验场(对照)和顺泰农场(盐碱地胁迫)开展比较试验,测定并分析小麦籽粒的粗蛋白质量分数等核心品质性状的变化。结果表明,顺泰农场盐碱地胁迫显著降低了籽粒粗蛋白质量分数、湿面筋质量分数和沉降值,而淀粉质量分数受影响较小。沉降值表现出最高的遗传变异性(对照CK:18.11%;处理T:15.77%),淀粉质量分数变异系数最低(CK:1.32%;T:1.08%),表明其稳定性较强。相关性分析显示,粗蛋白质量分数与湿面筋质量分数在胁迫前后均呈极显著正相关(r≥0.80),而淀粉与蛋白质类性状的负相关在胁迫下减弱。不同品种对盐碱地响应差异明显,中国春多个品质指标均表现出高敏感性,扬14-88粗蛋白、湿面筋与淀粉的响应则存在特异性。研究筛选出宁麦资15318、淮麦28等敏感品种,为耐盐碱优质小麦育种提供了种质基础。
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