科研产出
2个大豆RNA依赖的RNA聚合酶基因GmRDR6a和GmRDR6b的克隆与分析
《南京农业大学学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：利用同源克隆的方法从大豆品种‘科丰一号’中分离出2个RDR6基因,分别将其命名为GmRDR6a和GmRDR6b基因,并对其进行序列分析、植物组织表达以及抗逆境胁迫表达分析。结果表明:GmRDR6a基因位于大豆基因组的6号染色体上,基因全长为4 389 bp,包含一个长度为744 bp的内含子,其ORF长度为3 615 bp,编码1 204个氨基酸,相对分子质量和等电点分别为297.5×103和4.86;GmRDR6b基因位于大豆基因组的4号染色体上,基因全长为4 002 bp,包含一个长度为387 bp的内含子,其ORF长度为3 615 bp,编码1 204个氨基酸,相对分子质量和等电点分别为296.89×103和4.86;GmRDR6a和GmRDR6b都含有RDRs家族的保守序列DLDGD;2个基因在所有被检测组织中均表达,并且在花中的表达量最高;荧光定量结果表明:在大豆花叶病毒(SMV)处理下,2个基因在抗病材料‘科丰一号’中的表达量均显著高于感病材料‘南农1138-2’,在非生物胁迫下,GmRDR6a基因在盐和干旱处理下根、茎、叶组织中的表达量均提高,其中盐处理下根中的表达量最高,ABA诱导条件下出现早期响应,但是在冷害处理下该基因的表达量没有明显变化;GmRDR6b基因在盐、ABA处理下,表达量很高,冷害处理下出现早期响应,但是在干旱条件下,该基因表达趋势不明显。
关键词： 大豆 基因克隆 组织表达 荧光定量PCR 生物胁迫 非生物胁迫
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气调处理对杏鲍菇货架期品质影响的多变量分析
《食品科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以空气为对照(CK,21%O2+0.03%CO2),采用单因素方差分析、主成分分析、相关性分析、偏最小二乘回归分析、通径分析5种数据分析方法,探讨了高体积分数CO2结合低体积分数O2的气调处理(controlled atmosphere,CA,30%CO2+2%O2)对常温(20~25℃、相对湿度90%~95%)条件下销售的杏鲍菇品质的影响。单因素方差分析表明,CA可以抑制杏鲍菇质量减少,减缓其硬度、蛋白质含量、总糖含量下降,维持较低的相对电导率和pH值,使杏鲍菇获得较高的亮度及感官得分;主成分分析表明,CA对杏鲍菇颜色的影响最为显著,杏鲍菇货架前期与后期的总糖含量、硬度、蛋白质含量、相对电导率、pH值均有较大幅度变动;偏最小二乘与相关性分析表明,硬度、蛋白质含量、L*值、总糖含量、h值与品质表现出显著的正相关效应(P<0.05),而质量损失率、相对电导率、a*值、b*值与品质呈显著负相关(P<0.05);通径分析表明,L*值主要通过自身的直接作用和a*值、b*值、质量损失率的间接作用来影响杏鲍菇的品质,是作用于品质的主要因素。综上所述,CA对杏鲍菇品质的影响主要表现为色度的变化(L*、a*、b*值),此外CA对杏鲍菇其他生理指标也产生一定影响。
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水稻模拟模型在高温敏感性研究中的应用
《植物生态学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以调试校正较高精度的ORYZA2000模型参数及高温敏感性模拟验证为目的,为模型适应性和本地化提供依据,利用江苏省9个试验点5个水稻(Oryza sativa)品种的田间观测数据及当地逐日气象数据,采用ORYZA2000最新版本(V2.13)水稻生长模型,首先挑选出5个试验点3个品种的观测数据进行模型参数适应性调试校正,确定了水稻发育生长阶段的各项参数,然后用该参数对独立样本的4个试验点2个水稻品种地上部分各器官生物量、叶面积指数动态变化过程及最终产量进行了动态模拟。通过t检验和质量评价指标对模拟结果进行了显著性检验。利用通过检验的模型及其参数在假设环境温度不同时间段的持续升高条件下,开展了高温对水稻生物量及产量影响的模拟研究,模拟结果的影响幅度与实际高温处理结果的影响幅度进行了比较。结果表明:1)经过调试校正获得较高精度的水稻发育阶段各参数,较准确地模拟了水稻生物量和叶面积指数的动态累积过程,模拟值与观测值基本一致,说明校正后参数的合理性和有效性;2)调整参数后高温敏感性模拟结果表明,孕穗期到开花期温度连续3天、5天、7天升高到35℃时,总生物量、穗生物量和总产量与对照(CK)相比分别下降了12%–25%;不同时间段连续升高到38℃时下降18%–31%;不同时间段升高到41℃时,各生物量与对照相比分别下降了20%–38%。模型模拟值与控制试验室的观测数据的下降幅度基本一致,表明经过参数校正的ORYZA2000可以应用于水稻对气温升高响应的预测。
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猪流行性腹泻病毒变异株N基因的克隆及原核表达
《畜牧与兽医 》 2014 北大核心
摘要：猪流行性腹泻病(Porcine epidemic diarrhea,PED)是我国猪群近两年的多发疾病。本试验于2012年在安徽分离到一株猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)AH2012。为研究该变异株N基因的特性,采用RT-PCR方法获得了其N基因片段,经测序后与其他代表性的PEDV基因序列进行同源性比较和遗传进化分析,发现该毒株与近年来在我国流行的几株PEDV变异株同源性在99.3~99.5%之间,进化分析显示该毒株属于目前流行的PEDV变异株。将其克隆到表达载体pET28a(+)中,构建了重组质粒pET28a-N,经测序鉴定正确后,转化至感受态细胞BL21(DE3)中,并进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达分子量为65 ku的融合蛋白,蛋白表达量较高,蛋白免疫印迹结果显示,表达的N蛋白能与PEDV阳性血清发生特异性的免疫反应,表明原核表达的N蛋白具有良好的反应原性。该研究可为猪流行性腹泻病的流行病学调查、诊断与防控方法的建立奠定基础。
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植物基因功能研究新方法
《华北农学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：TALEN(Transcription activator-like effector nuclease)和CRISPR/Cas系统(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR.CRISPR-associated,Cas)是近年来发现的基因功能研究的新方法,且已经成功地在动物、植物及微生物等多个领域得到成功应用。它们可以对DNA双链进行切割,从而启动细胞内的DNA修复机制,以此来实现对靶位点的基因修饰。相较于传统方法,它们具有特异性高、操作简便及打靶效率高等特点。主要从结构、功能及作用机制等方面阐述这2种新基因功能的研究方法。
关键词： 基因功能 TALEN CRISPR/Cas系统
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核盘菌诱导下甘蓝型油菜防御相关基因表达差异分析
《作物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：菌核病是油菜主要病害,至今尚未在油菜及相关植物中找到抗性基因。本研究利用qRT-PCR法比较了抗病品种宁RS-1和感病品种APL01在接种核盘菌后0～48 h内11个防御相关基因的表达差异,以揭示抗病品种宁RS-1的抗病机制。结果表明,4个基因(PGIP、Cu/ZnSOD、OXO和GLP)在核盘菌诱导前后抗、感品种内表达量均较高,且抗病品种的表达量显著高于感病品种,尤其是PGIP基因,抗病品种宁RS-1在24 h的表达量为诱导前的170.4倍,而感病品种仅为诱导前的3.5倍,该时期抗病品种PGIP的表达量为感病品种的1299.4倍;2个基因(LOX2和PDF1.2)在诱导前后抗、感品种内的表达量均较低,但抗、感品种间表达量差异显著;5个基因(FeSOD、PAL、EDS1、PR1和EIN3)诱导前后抗、感品种内的表达量均较低,且抗、感品种间的表达量差异不显著。推测抗病品种宁RS-1对菌核病的抗性可能是由于PGIP的上调表达,抑制了核盘菌PG蛋白对侵染部位油菜组织细胞壁的降解,从而抑制了油菜菌核病的发生与蔓延。
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湿害胁迫对不结球白菜生长及生理的影响
《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了探明湿害胁迫对不结球白菜生长的影响,本试验通过模拟根系高湿条件对6个不结球白菜品种的形态和生理指标进行研究。研究结果表明:湿害胁迫下,各参试品种的鲜质量均低于对照,且均达显著或极显著差异;菊花心的株高相对增长量显著低于低于对照;各参试品种根长则均极显著低于对照;各参试品种叶长也均显著小于对照;除龙池矮脚黄之外,其他5个品种的叶宽也均显著小于对照;叶绿素和蛋白质含量只有菊花心显著低于对照,黑油筒的蛋白质含量则显著高于对照;可溶性糖含量只有菊花心和高华青显著低于对照;脯氨酸含量也只有菊花心和高华青极显著和显著低于对照;相对含水量则只有菊花心显著高于对照。综合各形态及生理指标变化情况,矮脚苏州青和黑油筒受影响最小,说明二者在参试品种中具有相对较强的耐湿性,而菊花心受湿害胁迫影响最大,说明其耐湿性相对较差。
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‘苏薯11号’的高产生理及栽培技术研究
《上海农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：对淀粉加工型甘薯品种‘苏薯11号'的高产生理和栽培技术进行了研究。结果表明:‘苏薯11号'具有较高的叶面积指数和净同化率,经济系数也高于对照品种‘苏渝303',薯块干物质积累在栽后90—120d明显高于对照品种,这是‘苏薯11号'获得高产的主要生理基础。‘苏薯11号'的栽培技术研究结果表明,鲜薯产量、茎叶产量、生物产量和薯干产量肥料处理间差异极显著,鲜薯产量不仅受氮、磷、钾的施用量影响,而且与氮、磷、钾配比有关,试验中以氮、磷、钾肥的施用量分别为11 5.5 kg/hm~2、75 kg/hm~2和225 kg/hm~2(氮、磷、钾配比为1.5:1:3)时鲜薯产量最高。
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