科研产出
转基因RNAi技术在动物抗病毒育种中的应用
《生物技术进展 》 2012
摘要：病毒对动物和人类健康都是极大的威胁,抗病毒疫苗虽然能在一定程度上预防病毒病,但目前几乎还不能对变异的传染病进行抗病毒治疗。尽管RNA干扰研究到目前才短短十几年,其作用机理已基本清楚。RNAi能够非常有效的抑制病毒体内复制,其介导的抗病转基因动物的研究相继取得了阶段性进展,抗疯牛病转基因羊和牛,抗内源性逆转录病毒猪以及抗核型多角体病毒病的转基因家蚕已经成功获得。尽管如此,目前的研究主要还是集中在细胞水平及小鼠模型方面,获得的转基因动物种类和数量有限,但为培育动物抗病毒品种提供了理论依据和技术支撑。随着转基因技术的不断的进步和成熟,RNA干扰技术将成为动物抗病毒育种中最有应用前景的方法之一。
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3个空间诱变水稻品系的稻瘟病抗性评价及抗性遗传分析
《华南农业大学学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：综合考察水稻苗期叶瘟抗谱和成株期穗颈瘟抗性可以全面地评价水稻种质的稻瘟病抗性.本研究采用来自广东不同稻作区的36个稻瘟病菌株,对经过抗性初筛的3个空间诱变水稻品系进行苗期叶瘟抗谱测定;同时种植于代表性自然诱发病圃——广东省从化市吕田镇,考察其穗颈瘟抗性.结果显示,入选的3个诱变品系具有广谱的苗期叶瘟抗谱、且高抗穗颈瘟,抗性明显优于非诱变原种.遗传分析结果表明,H4和H11对菌株GD0193和GD866的抗性均由主效单基因控制,H4对菌株GD08T4、H11对菌株GD08T13的抗性均由2个独立遗传的显性基因控制,D69对菌株GD0193的抗性遗传模式复杂,D69对菌株GD08T4和GD866的抗性为主效单基因模式.
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鸭新城疫病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的初步建立
《动物医学进展 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了对目前流行的鸭新城疫进行快速诊断,应用蔗糖密度梯度离心纯化后的鸭新城疫病毒免疫6周龄雌性Balb/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。采用ELISA方法筛选阳性细胞克隆,经3次亚克隆后获得一株能稳定分泌鸭新城疫病毒特异性单克隆抗体的细胞株2C1。以PEG纯化后的2C1腹水为捕获抗体,辛酸-硫酸铵纯化的兔抗鸭新城疫病毒多克隆抗体为第二抗体,HRP标记的羊抗兔抗体作为酶标抗体,建立了检测鸭新城疫病毒抗原的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,当2C1包被量为4μg/孔,鸭新城疫病毒1∶10稀释,兔抗鸭新城疫病毒多抗作用量为0.1μg/孔,HRP标记的羊抗兔二抗1∶10 000倍稀释,每次作用时间为1h时,P/N比值最高,且阳性OD值最接近1.0。试验表明,该方法特异性好,不与IBV、ARV、GPV、DPV、DHV尿囊液及H5、H9标准阳性抗原发生反应;可以检测出0.2μg纯化病毒,比传统的HA试验的敏感性至少高64倍;批间和批内变异系数均小于10%。本研究建立的双抗体夹心ELISA方法为鸭新城疫病毒的快速诊断奠定了基础。
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菠萝茎叶还田对土壤理化特性及下茬菠萝生长的调控效应
《热带作物学报 》 2012 CSCD
摘要：在大田条件下研究菠萝茎叶粉碎后直接还田(简称茎叶还田)对土壤理化特性以及下茬菠萝植株生长等的影响。结果表明,茎叶还田后土壤容重显著降低;土壤有机质、有效P、速效K含量等较对照有不同程度的提高,但土壤有效N含量降低。土壤中的脲酶、过氧化氢酶、酸性磷酸酶以及转化酶活性增强,其中酸性磷酸酶和转化酶显著提高。菠萝茎叶还田后土壤中的细菌、放线菌数量增多,真菌数量减少。菠萝茎叶还田促进了下茬菠萝植株生长,株高、叶长、叶宽、青叶数、根条数、根长以及地上部和地下部鲜质量等指标都高于对照。茎叶还田提高了下茬菠萝叶片的叶绿素、可溶性糖及可溶性蛋白含量,植株根系活力增强。茎叶还田后菠萝果实纵、横径增加,单果重、产量提高。
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酶联免疫吸附试验在几种犬源人兽共患病检测中的应用
《广东畜牧兽医科技 》 2012
摘要：随着宠物养殖量的增加,宠物疫病也越来越受到人们的关注。宠物源性人兽共患病不仅危害宠物养殖业的健康发展,而且严重危害了人类健康甚至于生命安全。早期诊断对有效预防和控制宠物源性人畜共患病有重要意义。酶联免疫吸附试验具有操作简单、快速、敏感性高、特异性强等优点,在宠物疫病检测中发挥的作用越来越大。本文对酶联免疫吸附试验在犬源性人兽共患病中的狂犬病、弓形虫病、布鲁氏菌病和钩端螺旋体病检测上的应用与研究进展进行综述,旨在促进该技术在宠物疾病检测方面的应用与推广。
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猪场沼液对芥菜产量和品质的影响效应
《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：通过盆栽试验研究猪场沼液对芥菜产量和品质的影响效应,旨在为其资源化利用提供科学依据。结果表明:与对照相比,施用沼液能够显著提高芥菜根系活力,增加产量和生物量,以100%原沼液的增产效果最好,地上部产量增加21.5%,生物量增加22.1%;施用沼液具有改善芥菜品质的效果,与对照相比,50%处理后沼液可提高芥菜可溶性蛋白和可溶性糖含量,分别增加25.1%和27.1%,但维生素C含量差异不显著。因此,合理施用沼液进行农灌不仅可以减轻养殖场处理后污水的排放压力,还可以减少化肥施用量,提高叶菜品质。
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花卉缓/控释复合肥对盆栽蝴蝶兰生长发育及其观赏性的影响
《中国农学通报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了解决盆栽蝴蝶兰简易、长效施肥的问题,通过盆栽蝴蝶兰施用缓/控释复合肥试验,并与普通花卉专用肥、一种进口控释肥进行生物学效应对比验证。结果表明:施用缓/控释肥料的处理较普通花卉专用肥处理以及不施肥的对照处理能明显促进蝴蝶兰大苗生长期的生长发育,并对蝴蝶兰花箭高度、开花品质有显著的调控作用。其中控释期为6个月的花卉缓/控释复合肥对盆栽蝴蝶兰的生长发育、花箭高度、开花品质的综合作用最好,表现为该处理蝴蝶兰叶色浓绿、有光泽,始花期早,花期长花朵数多而大。该处理蝴蝶兰相应时期的面积、叶数、叶片鲜重、叶展、花箭生长中后期花箭高度、花期天数、花径长度、花朵数分别较进口控释肥增加1.7%、1.7%、1.9%、5.9%、1.7%、11.0%、7.7%和8.9%。
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柑桔钙离子结合蛋白基因克隆及植物表达载体构建
《中国南方果树 》 2012 北大核心
摘要：以伏令夏橙叶片中分离的总RNA为模板,经RT-PCR扩增到一条约600bp、含钙离子结合蛋白基因(CsCaBP)的片段,将此片段克隆到pMD-19T中,经测序分析该片段与甜橙基因组中的对应序列完全吻合。设计2对带有限制性内切酶位点的特异性引物,以cDNA为模板扩增到2个CsCaBP片段,并连接到TA克隆载体pMD-19T上;经双酶切消化后,分别以正反2个方向插入到植物表达载体pFGC5941的查耳酮合成酶(CHSA)内含子两侧,构建成功CsCaBP的RNA干扰载体,但未获得转基因植株。将CsCaBP的正向片段定向克隆到具有CaMV35S启动子的pF-GC5941表达质粒上,构建成功CsCaBP过量表达载体。将构建好的表达载体导入根癌农杆菌LBA4404菌株,转化酸橙下胚轴,经PCR检测,获得9株过量表达转基因植株,荧光定量PCR验证发现目的基因在转基因植株中有不同程度的表达。
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