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抗Bt(Cry1B)毒素单链抗体在sf9昆虫细胞中的表达及活性测定

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:通过构建pFastBacTMHT-A-scFv重组质粒,并将重组质粒化转DH10BacTMEscherichia coli感受态细胞,进行蓝白斑筛选,获得阳性克隆。PCR和基因测序检测证实挑取的白斑阳性单克隆存在完整、正确的单链抗体基因。提取阳性克隆中的重组杆状病毒穿梭载体(Bacmid-scFv)侵染sf9昆虫细胞,细胞发生明显病变特征。通过SDS-PAGE、Western blotting和间接竞争性ELISA等方法检测,发现单链抗体在sf 9昆虫细胞中表达成功,测得纯化后蛋白浓度为103.000 0μg/ml,Cry1B毒素对单链抗体的抑制中浓度(IC50)为1.010 0μg/ml,最低检测线IC10为0.011 3μg/ml,线性检测范围为0.500 0~10.000 0μg/ml。可溶性scFv对抗原类似物无交叉反应。

关键词: Cry1B毒素 单链抗体 真核表达系统 酶联免疫分析

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类猪圆环病毒因子P1在自然感染仔猪体内的组织分布

中国兽医学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:选用3头自然感染仔猪和1头阴性对照猪,剖杀后采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰脏、脑、空肠、扁桃体、胸腺、淋巴结、膀胱、性腺等组织,用荧光定量PCR方法检测病毒在组织中的分布及病毒载量。结果显示,类猪圆环病毒因子P1分布在仔猪的心脏、肝脏、肺脏、胰脏、脑和膀胱等组织,病毒载量以胰脏、脑和膀胱为最高,可达105拷贝/g以上;对照猪脏器中没有检测到病毒核酸。该研究为P1的诊断及致病机制奠定了基础。

关键词: 类猪圆环病毒因子P1 组织分布 病毒载量

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基于干旱胁迫的水稻栽培模拟优化决策系统(RCSODS)的订正与检验

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:为使水稻栽培模拟优化决策系统(RCSODS)满足淮河流域水稻生长季干旱影响精细化评估要求,利用淮河流域江苏省兴化市、河南省信阳市2010~2012年水稻大田和盆栽的水分胁迫控制试验资料,获取了RCSODS中相关子模型的参数,并对干旱胁迫订正因子的算法进行检验。结果显示,基于干旱胁迫订正后的模型对干旱环境下净光合速率、根冠比和叶面积的模拟效果较好,其决定系数分别为0.947、0.882和0.950~0.988,说明模型干旱订正结构合理,参数选值准确。对比模拟产量和实测产量,其决定系数也达到0.917,绝对平均误差(MAE)和均方差根(RMSE)值分别为0.551和0.623。表明订正后的模型有较好的模拟能力,更能适应淮河流域水稻生产的需要。

关键词: 水稻 干旱 模拟模型 应用

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淹水改良土壤性状及对辣椒疫病的防效研究

水土保持学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:在室内条件下,采用土壤处理和盆栽试验相结合的方法,以2块辣椒连作菜地土壤为对象,研究淹水处理对土壤的理化、生物学性质及辣椒疫病发生率的影响.结果表明,淹水后土壤pH、总酚酸含量升高,总有机酸含量显著增加,而土壤的电导率、氧化还原电位和铵态氮含量则显著下降.栽植辣椒后,根际土壤的总有机酸含量和总酚酸含量迅速下降,铵态氮含量和Eh上升,而电导率和pH基本不变.在生物学性质上,淹水能降低土壤脱氢酶和土壤脲酶的活性,并显著减少土壤真菌和放线菌的数量.将人工接种量为每1g干土1 000个辣椒疫霉孢子的连作土壤分别进行保湿35d和淹水35d处理,采用实时定量PCR技术测定土壤中辣椒疫霉的数量.结果表明:处理结束时保湿组辣椒疫霉数量是淹水组的5~6倍.土壤栽植辣椒后,保湿组辣椒疫霉数量显著增加,而淹水组基本不变.在2种辣椒连作土壤中,淹水20d和35d对辣椒疫病的防效都能达到100%,对照发病率为80%~86%;而在这2种土壤中分别人工接种辣椒疫霉孢子(接种量为每1g干土1 000个辣椒疫霉孢子),再进行淹水20d和35d后,在G土中防效为100%,而在X土中,对辣椒疫病的防效仅为40%~54%.因此,可以推测,当土壤中病原菌的数量较高时,采用单一的淹水处理仍然不能完全防控辣椒疫病,必须与其他土壤处理技术相结合.

关键词: 淹水 土壤处理 土壤性状 辣椒疫病

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辐照和抗氧化剂处理对宠物干粮食品中丙二醛含量的影响

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:为研究辐照和抗氧化剂处理对宠物干粮食品在储藏过程中脂肪氧化的影响,在牛肉中添加抗氧化剂(生育酚、抗坏血酸钠、叔丁基对苯二酚、没食子酸丙酯、茶多酚)制成宠物干粮食品,以60Coγ射线对宠物干粮食品进行辐照处理,研究储藏过程中辐照及未辐照样品中丙二醛含量的变化。结果表明:复合抗氧化剂处理(叔丁基对苯二酚+没食子酸丙酯+茶多酚)对样品中丙二醛的抑制效果优于其他几种复合抗氧化剂(没食子酸丙酯+茶多酚、叔丁基对苯二酚+没食子酸丙酯、叔丁基对苯二酚+茶多酚)和单一抗氧化剂处理;与对照相比,储藏100 d时叔丁基对苯二酚+没食子酸丙酯+茶多酚处理对丙二醛的抑制率为65.5%,辐照结合叔丁基对苯二酚+没食子酸丙酯+茶多酚处理对丙二醛的抑制率为64.4%。储藏初期,辐照处理样品中丙二醛含量明显高于未辐照处理,但随着储藏时间的延长,辐照处理样品中丙二醛含量的增加速度缓于未辐照处理,至储藏100 d时,辐照处理样品中丙二醛含量已经低于或接近未辐照处理。因此,辐照结合抗氧化剂的处理方式可以延缓货架期超过100 d的宠物干粮食品中丙二醛含量的增加。

关键词: 宠物干粮食品 辐照 抗氧化剂 丙二醛

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解淀粉芽胞杆菌Lx-11生物发酵工艺优化

中国生物防治学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:对前期筛选获得和在田间试验中防治水稻细菌性条斑病效果较好的解淀粉芽胞杆菌Bacillusamyloliquefaciens Lx-11,通过Plackett-Burman试验设计及Box-Behnken设计的响应曲面法(response surfacemethodology,RSM)对影响生防菌株Lx-11发酵培养基和培养条件进行了优化.培养基3个主要因子的质量浓度分别为玉米淀粉11.2 g.L 1、黄豆粉14.6 g.L 1和酵母膏0.62 g.L 1.培养条件优化试验得出:培养温度、通气量和接种量是影响发酵活菌数的主要因子,由所得响应曲面方程预测出这3个主要因子分别为30.84°C、59.68 mL/250 mL和1.52%时,在初始pH为7.0,150 r.min 1培养48 h的条件下,发酵活菌数和抑菌带宽的最大值分别为3.75*109cfu.mL 1和8.2 mm.经摇瓶发酵试验和抑菌活性验证该理论预测值与实际值无显著差异.

关键词: 解淀粉芽胞杆菌 Plackett-Burman试验设计 响应曲面法 最适培养条件

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不同辣椒材料果皮脂肪酸组成分析

中国蔬菜 2013 北大核心

摘要:采用气相色谱技术对26份辣椒材料果皮脂肪酸组成进行了研究,并与种子中脂肪酸组成进行了比较分析。结果表明:在供试的26份辣椒材料果皮中共鉴定出9种脂肪酸成分,分别为月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、花生酸和山嵛酸;辣椒果皮中主要脂肪酸组分是亚油酸、亚麻酸和棕榈酸,各脂肪酸组分含量在品种间存在明显差异,变异系数为8.16%~53.37%。与种子中脂肪酸组成含量比较分析结果表明:辣椒果皮中检测到月桂酸,且亚麻酸的平均含量相对较高;而种子中未检测到月桂酸,且亚油酸的平均含量约是果皮中的2倍,说明脂肪酸的组成及含量在辣椒果实的不同部位存在一定差异。

关键词: 辣椒 果皮 脂肪酸 气相色谱法

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不同饲养方式及垫料环境下的发酵床猪生产性能及肉品质

江苏农业科学 2013 北大核心

摘要:为比较不同饲养方式及垫料环境下发酵床猪生产性能及常规肉品质差异,选取150头60日龄仔猪,随机平均分成5组,分别为常规饲养(自由采食组、限饲组)、发酵床饲养(木屑组、酒糟组、菌糠组),采用统一饲料饲喂。结果表明:发酵床处理的猪增重显著高于对照组,其中菌糠组效果最好;从料肉比看,发酵床处理中以菌糠组最低,对照组(自由采食)最高;发酵床不同垫料间以及发酵床饲养与常规水泥地面饲养间的猪肉pH值、持水率、剪切力、水分含量、肌内脂肪含量、蛋白质含量等常规肉质指标均未出现显著差异;但发酵床养殖模式下的猪肉pH值、持水力、剪切力、肌内脂肪含量、蛋白质含量等指标在一定程度上优于常规养殖模式。

关键词: 发酵床 生产性能 肉品质 差异

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绵羊黄体期卵巢类固醇激素调节基因的表达研究

畜牧兽医学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:旨在研究黄体期后期湖羊卵巢黄体和不同大小卵泡类固醇激素调节基因表达的变化。选用体重40kg左右的湖羊10头,同期发情结束后第12天屠宰,收集黄体和不同大小卵泡组织。采用Real-time PCR技术检测基因表达水平。试验结果显示,与直径≤2.5mm卵泡相比,直径>2.5mm卵泡的CYP17A1、CYP19A1和VLDLR基因表达水平显著提高(P<0.05),ESR2基因表达水平极显著降低(P<0.01);不同大小卵泡内STAR、CYP11A1、FSHR、LHR、ESR1、LDLR和SR-BI基因表达水平差异不显著(P>0.05),但直径>2.5mm卵泡的ESR1(P=0.090)和SR-BI(P=0.093)基因表达水平高于直径≤2.5mm卵泡;与卵泡相比,黄体几乎不表达CYP17A1和CYP19A1,但STAR、CYP11A1、FSHR、ESR2、LHR、ESR1、LDLR、SR-BI和VLDLR基因在黄体中高表达。试验结果表明类固醇激素调节基因参与调节湖羊黄体期卵泡生长和黄体孕酮合成功能。

关键词: 湖羊 卵巢 类固醇调节基因

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5-氨基乙酰丙酸促进桃果皮提前着色机制研究

园艺学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:在‘早白花’桃果实着色前,用 300、100 和 50 mg·L-1的 5–氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,ALA)溶液涂布果实。结果表明:ALA 处理可促进果皮提前着色,促使果实提前成熟,且以 300 mg · L-1效果最为明显,比对照早约 5 d。ALA 处理还显著促进了 UFGT、DFR、LDOX 和 CHS 的提前表达,并且基因表达水平与花色素苷的积累趋势具有很好的一致性。据此推测 ALA 可能参与了桃果实成熟以及花色素苷合成的调控,对果皮花色素苷提前合成具有促进作用。

关键词: 5–氨基乙酰丙酸 着色 基因表达

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