科研产出
基于CRISPR/Cas9的蛹虫草无抗性标记转化技术的构建
《菌物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:传统的真菌遗传改造方法需要抗性标记,但目前可使用的抗性标记基因非常有限,导致蛹虫草遗传改造面临着抗性基因数量不足的问题,且尚未能实现多个目的基因的连续敲入或敲除,因此在蛹虫草中建立高效的无抗性标记转化技术显得尤为重要。本研究利用CRISPR/Cas9技术对蛹虫草的Cmura5基因进行编辑,通过内源5S-1、5S-2和U6启动子对gRNA进行转录,结果表明使用U6启动子对Cmura5基因的编辑效率达到了100%。在尿嘧啶缺陷型菌株Cmura5–中,回补野生型Cmura5基因可实现正向选择,即野生型菌株可以在基础培养基上生长。利用设计的同源臂对Cmura5基因进行回收,可以实现反向选择,即野生型在含有5-氟乳清酸培养基中生长受到抑制。以尿嘧啶缺陷型Cmura5–为出发菌株,利用无抗性标记转化技术,导入一个重组质粒效率为75%;连续导入2个重组质粒效率为80%;连续导入3个重组质粒效率为100%;连续导入4个重组质粒效率为50%,平均转化效率为75.7%,每一轮的标记回收率均在100%,实现了4个外源基因在蛹虫草中同时表达。
关键词: CRISPR/Cas9 蛹虫草 无抗性标记 ura5 营养缺陷型标记
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喷雾助剂对雾滴粒径、抗蒸发及植保无人机喷施雾滴飘移的影响
《上海农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:为明确喷雾助剂对植保无人机喷施的影响,通过室内试验测定不同喷雾助剂添加后溶液表面张力、黏度、雾滴蒸发抑制性能的变化,并通过田间试验评估喷雾助剂对植保无人机喷施后雾滴飘移的影响。结果表明:喷雾助剂溶液显著降低溶液表面张力、增加其黏度。利用液力式SX喷头喷洒,添加迈飞?、DS10870、倍达通?3种喷雾助剂显著增加雾滴体积中径DV50,并降低雾滴粒径小于150μm的小雾滴的比例;所有助剂经IDK喷头喷洒后DV50全部降低,小雾滴的比例反而增加。悬滴法测定显示,植物油类喷雾助剂倍达通?具有最佳的雾滴蒸发抑制率,为60.3%。田间植保无人机喷施试验表明,植物油类喷雾助剂倍达通?具有显著抗飘移效果。与清水相比,添加该助剂可使累积飘移率降低5%—10%,90%累积飘移位置降低4.8—6.4 m。试验结果可对植保无人机喷洒助剂的选择提供理论依据,为进一步研究新型喷雾助剂、喷头及减少雾滴飘移提供数据支持。
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不同红蓝光比例对芹菜幼苗生长和物质分配的影响
《北方园艺 》 2022 北大核心
摘要:以黄心芹幼苗为试材,设置红蓝光8:1(R8B1)、红蓝光2:1(R2B1)、红蓝光1:2(R1B2)、红蓝光1:8(R1B8)共4个光处理,以白光(W)为对照,探究不同光源下芹菜幼苗的生长发育和物质分配情况,以期为芹菜的工厂化育苗提供参考依据.结果表明:与对照相比,R8B1和R2B1处理能明显的增加幼苗高度但却使茎粗下降,R1B2和R1B8的效果则明显相反.芹菜幼苗的叶面积随蓝光的比例增加显著降低,而叶片数和单位面积叶质量(MA)则显著增加,这说明不同红蓝光比例会显著影响芹菜幼苗的叶片发育.根系和叶片的干物质分配在各处理之间没有明显差别;叶柄的干物质分配也仅在R8B1和R1B8之间存在显著差异.所有处理中R1B2组合拥有最大的鲜质量和干质量,以及更加矮壮的株型和更多的叶片数,说明R1B2更有利于芹菜幼苗的均衡生长.
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HPLC测定灵芝子实体水提物及相关产品中三萜的含量
《菌物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:灵芝药品大多以灵芝子实体水提物为原料,为快速准确测定灵芝子实体水提物及相关产品中三萜的含量,建立了具有较好分离效果的HPLC分析测定方法.通过优化色谱柱和洗脱条件,优选出Agilent Zorbax SB-Aq C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-乙酸水溶液(0.01%)为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长252 nm,柱温30℃,该条件下灵芝酸A、灵芝酸F等10种灵芝酸得到较好的分离.方法 学考察显示该分析方法精密度、重复性、稳定性和加样回收率的RSD值均小于5%,可以用于灵芝酸C2、灵芝酸G、灵芝烯酸B、灵芝酸B等10种灵芝酸的定量检测.通过对灵芝子实体原料、水提物和市售灵芝产品中10种三萜类成分分析发现,灵芝子实体水提物中均含有这10种三萜,含量为2.52%-6.83%,较子实体原料大幅提高,市售的灵芝产品中的三萜含量为0.27%-0.84%.该方法的建立为灵芝水提物及其产品质量标准的建立奠定基础.
关键词: 灵芝;水提物;三萜;高效液相色谱
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水稻抗旱相关基因OsDR1的克隆、鉴定及表达分析
《上海农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:根据基因表达谱芯片结果,在陆稻品种'IRAT109'中筛选到抗旱相关基因OsDR1,利用5'-RACE和3'-RACE方法,克隆OsDR1基因的全长cDNA序列,明确基因的转录起始和终止位点.结果显示:OsDR1基因编码的蛋白是卤酸脱卤素酶,具体分子功能未知.qPCR定量表达分析结果表明,OsDR1基因受低温、盐、PEG模拟干旱等多种逆境诱导表达;在叶片中表达受光照诱导和调节,并且在24 h光周期内呈节律性变化.
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利用转录组分析茉莉酸甲酯对金针菇原基生长的影响
《食用菌学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:按照工厂化生产模式栽培金针菇(Flammulina filiformis),搔菌后在栽培料表面喷洒茉莉酸甲酯,以喷洒蒸馏水为对照,利用转录组分析茉莉酸甲酯对金针菇原基生长的影响.结果表明:与对照组相比,茉莉酸甲酯组原基出现时间提前,原基发育更快;茉莉酸甲酯组与对照组的差异表达基因有413个,其中上调表达基因233个,下调表达基因180个.GO功能富集分析表明,上调的差异表达基因主要富集于苯丙烷生物合成、肉桂酸生物合成、L-苯丙氨酸代谢等过程,下调的差异表达基因主要富集于二磷酸核苷代谢、己糖代谢、单糖代谢、糖酵解等过程.KEGG代谢途径富集分析表明,差异表达基因主要富集于糖酵解/糖异生、氨基酸代谢和能量代谢等过程.
关键词: 金针菇 茉莉酸甲酯 原基 转录组分析 差异表达基因 功能富集分析
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叶用莴苣新品种'浩农1号'
《园艺学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:叶用莴苣新品种‘浩农1号’是以PI 140398为母本,‘理想401’为父本杂交选育的新品种。株形半直立,叶质软嫩,叶色深绿,有莴苣清香,富含山莴苣素、山莴苣苦素、类黄酮和多酚,炒熟后不失绿。平均单株质量0.43 kg,产量在3×10~4 kg·hm-2以上。适合中国长三角与华南地区冬季栽培。
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甜加糯玉米'五彩甜糯2号'
《园艺学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:‘五彩甜糯2号’是以申W93为母本、wh-2为父本组配出的五彩甜加糯玉米。‘五彩甜糯2号’上海地区春播生育期85.5 d,株高217.4 cm,穗位高度85.8 cm,株形半紧凑,植株总叶片20片。穗形为筒形,果穗长18.7 cm,粗5.0 cm,穗行数14.3,行粒数38.6粒,穗轴白色。鲜百粒质量36.2 g,鲜出籽率66%,皮渣率10.3%,支链淀粉占总淀粉含量98.75%,品质优。鲜穗平均产量14 084.3 kg·hm-2。高抗大斑病、小斑病、矮花叶病、纹枯病、茎腐病和南方锈病。
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基于高光谱成像技术的水稻叶片稻纵卷叶螟虫害信息提取
《上海农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:使用成像光谱仪获取遭受稻纵卷叶螟危害的水稻叶片的高光谱影像,统计分析虫害叶片和健康叶片在光谱反射率和植被指数上的差异,建立分类判别模型,精确提取叶片上虫害区域的像元数和比例,实现对虫害严重程度的精确评估.结果表明:在波长为400—710 nm的可见光-红边波段范围内,虫害叶片的反射率普遍高于健康叶片,差异极显著(P<0.01);在近红外波段虫害叶片反射率低于健康叶片(P<0.01),但二者差异略小.虫害叶片的NDVI、RVI、RARS和SIPI 4种植被指数值明显低于健康叶片.基于RVI构建决策树分类模型能够准确区分叶片上的虫害区域和健康区域,并据此计算出虫害区域所占比例,进而对虫害严重程度进行定量化评估.
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LED光质对彩色马蹄莲组培苗生长及生理特性的影响
《上海农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:以彩色马蹄莲组培苗为材料,设置纯蓝光(B)、红蓝光组合R∕B(1∕2)、R∕B(1∕1)、R∕B(2∕1)、纯红光(R)5种LED光质,以白光为对照(CK),研究不同光质对彩色马蹄莲组培苗形态指标和生理特性的影响.结果显示:(1)R∕B(2∕1)光质条件下,彩色马蹄莲苗的增殖率比CK处理高42.9%;植株的株高、鲜重、叶片长和叶片宽最大,分别比CK处理高87.0%、42.3%、101.9%和108.8%;(2)R∕B(1∕2)光质条件下,彩色马蹄莲苗的叶绿素含量最高,是CK处理的1.22倍;(3)复合光质中随着红光比例的增高,彩色马蹄莲苗中的可溶性总糖含量升高,复合光质处理R∕B(2∕1)最高,蓝光则表现为抑制作用,但能够促进彩色马蹄莲苗淀粉的积累和可溶性蛋白含量的提高;(4)R∕B(1∕2)和R∕B(2∕1)光质处理下,彩色马蹄莲苗POD活性较高;R∕B(1∕2)和R∕B(1∕1)光质处理下SOD活性较高;CK处理下,彩色马蹄莲苗的MDA含量最高,在R∕B(1∕1)和R处理下,彩色马蹄莲苗的MDA含量较低.综上,复合光质R∕B(2∕1)是彩色马蹄莲组培苗增殖和生长的最适光质条件,该研究结果可为彩色马蹄莲组培苗生长发育品质的提高提供一定的理论基础.
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