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海南油茶SCoT反应体系建立与多态性引物筛选

分子植物育种 2023 北大核心 CSCD

摘要:SCoT-PCR是一种单引物扩增分子标记.为了将SCoT分子标记应用于海南油茶的分子鉴定和遗传多样性评价中,本研究采用单因素试验和正交试验结合方法,分析模板DNA、dNTPs、TaqDNA聚合酶及引物4种因素对海南油茶SCoT-PCR扩增结果的影响,构建海南油茶SCoT-PCR体系,并筛选多态性引物.单因素试验结果表明:DNA浓度对海南油茶扩增效率影响不大,高浓度dNTPs利于扩增产物,而Taq酶和引物扩增高效率偏于中浓度.正交试验结果表明:各因素对海南油茶SCoT-PCR扩增影响大小依次为引物>TaqDNA聚合酶>dNTPs>模板DNA;总体系为20 μL时,最佳反应体系中模板DNA用量为30 ng,dNTPs浓度为0.30 mmol/L,引物浓度为0.60 μmol/L,Taq DNA聚合酶用量为1.00 U.利用构建的SCoT-pcr体系对80条SCoT单引物进行筛选,最终筛选出16条SCoT条带清晰的多态性引物,多态性比率平均值达到76.25%.本试验结果可为海南油茶的遗传多样性分析和种质资源鉴定等研究提供参考数据.

关键词: 海南油茶 SCoT 反应体系 引物筛选

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植物源miR156a-5p对五指山断奶仔猪肠道菌群和上皮屏障的影响

动物营养学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:本试验旨在探究植物源miR156a-5p对五指山断奶仔猪肠道菌群和上皮屏障的影响。选取初始体重为(5.82±0.13) kg的35日五指山龄断奶仔猪12头,随机分为2组,每组6个重复,每个重复1头。对照组饲喂无意义单链核酸,试验组饲喂合成的植物源miR156a-5p(每天600 pmol/kg)。试验期7 d。结果表明:与对照组相比,1)试验组的终末体重和平均日增重均无显著差异(P>0.05),肺脏指数显著增加(P<0.05);2)试验组的血清白蛋白和高密度脂蛋白胆固醇含量显著或极显著提高(P<0.05);3)试验组十二指肠Chao1指数和Observed_otus指数显著提高(P<0.05),空肠Simpson指数显著降低(P<0.05),盲肠Shanon指数和Simpson指数显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01),结肠Simpson指数显著提高(P<0.05);4)试验组十二指肠拟杆菌目(Bacteroidales)、拟杆菌纲(Bacteroidia)和拟杆菌属(Bacteroides)的富集显著增加(P <0.05),十二指肠纤毛菌属(Leptotrichia)、颤螺旋菌属(Oscillibacter)、UCG-010、螺杆菌属(Helicobacter)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、Clostridia_vadinBB60_group、副萨特氏菌属(Parasutterella)和理研菌属(Rikenella)等的富集显著增加(P<0.05);5)试验组十二指肠pH和隐窝深度极显著提高(P <0.01);6)试验组十二指肠载脂蛋白A1 (APOA1)和尾型同源盒转录因子2(CDX2)mRNA相对表达量极显著上调(P<0.01),十二指肠黏糖蛋白2(MUC2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和β防御素1(DEFB1) mRNA相对表达量显著上调(P<0.05)。综上所述,植物源miR156a-5p可调节断奶五指山仔猪十二指肠、空肠、盲肠和结肠菌群α多样性,增加十二指肠pH及拟杆菌纲、目和属水平的富集,改善十二指肠上皮分化、化学屏障和黏膜免疫屏障功能。

关键词: 植物源miRNA 断奶仔猪 肠道菌群 肠道屏障

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荔枝多胺氧化酶(PAO)基因家族的全基因组鉴定与表达分析

分子植物育种 2023 北大核心 CSCD

摘要:为了探究PAO基因在荔枝(Litchi chinensis Sonn.)生长发育过程中的生物学功能,本研究基于荔枝全基因组数据,利用生物信息学方法筛选与鉴定荔枝PAO基因(LcPAO)成员,并对其理化性质、系统发育、结构、染色体定位、顺式作用元件、蛋白结构、miRNA靶位点和表达模式进行了分析。结果表明,一共鉴定得到10个LcPAO基因,全部为亲水蛋白。系统发育分析发现LcPAO落在4个亚族中的Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ亚族。LcPAO1~LcPAO3和LcPAO9~LcPAO10属于典型的PAO蛋白,LcPAO4~LcPAO8还含有一个特异的SWIRM结构域,属于非典型PAO蛋白。顺式作用元件分析表明其主要含光响应元件、逆境胁迫相关元件以及激素响应相关元件。miRNA靶位点分析发现LcPAO基因受到22个miRNAs的靶向调控。转录组表达模式分析发现,除了LcPAO1和LcPAO4,余下的LcPAO基因可能与荔枝果皮着色相关。所有的LcPAO基因均可能与荔枝的化学控花相关。除了LcPAO1所有的LcPAO基因均可能与荔枝果实脱落相关。本研究为深入研究LcPAO基因的功能和调控机制提供参考。

关键词: 荔枝 多胺氧化酶(PAO) 生物信息学 表达分析

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槟榔生物碱致癌性、致口腔黏膜下纤维化及兴奋作用等活性研究进展

食品与发酵工业 2023 北大核心 CSCD

摘要:槟榔是棕榈科植物槟榔的果实,是海南农业经济的重要支柱产业.生物碱是槟榔中重要的生物活性物质,与嚼食槟榔引起的神经兴奋作用密切相关.槟榔中生物碱种类众多,各生物碱含量、结构、作用也不尽相同,生物碱的含量与槟榔产品的成瘾性和致癌性密切相关.槟榔生物碱同时具有促进胃肠道消化、驱虫、抑菌、抗抑郁等的正面及致癌性、致口腔黏膜下纤维化、生殖系统毒性等的负面效应.该文系统全面地概述了目前研究报道的槟榔生物碱的种类结构、生物碱形成亚硝胺衍生物的代谢途径及致癌性研究进展、生物碱致口腔黏膜下纤维化及兴奋作用的分子机制以及槟榔生物碱在心血管系统、消化系统、生殖系统等系统中发挥的作用,以期为槟榔生物碱的深入研究提供理论指导.

关键词: 槟榔生物碱 生物活性 致癌性 口腔黏膜下纤维化 兴奋性

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椰子粕对文昌鸡生长性能、屠宰性能和肉品质的影响

动物营养学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:本试验旨在研究不同水平椰子粕对文昌鸡生长性能、屠宰性能和肉品质的影响。选取480只80日龄健康状态良好的文昌鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复20只鸡。对照组饲喂基础饲粮,3个试验组分别在基础饲粮中添加1.50%、4.50%和7.50%椰子粕。试验期为40 d。结果显示:1)与对照组相比,1.50%和7.50%组料重比均显著下降(P<0.05);各组间末重、平均日增重和平均日采食量均无显著差异(P>0.05)。2)与对照组相比,1.50%组屠宰率显著提高(P<0.05),而其他试验组屠宰性能均无显著差异(P>0.05)。3)与对照组相比,4.50%组胸肌pH24 h显著降低(P<0.05),各试验组pH45 min、24 h滴水损失、熟肉率、剪切力和腿肌pH24 h均无显著差异(P>0.05)。4)与对照组相比,各试验组肌肉肌纤维直径和平均横截面积都无显著差异(P>0.05)。5)与对照组相比,1.50%和7.50%组胸肌中粗蛋白质含量显著提高(P<0.05),但各试验组肌肉中水分、肌内脂肪和腿肌粗蛋白质含量无显著差异(P>0.05)。综上可知,在本试验条件下,饲粮中添加1.50%~7.50%的椰子粕未对文昌鸡生长性能、屠宰性能和肉品质产生不利影响;饲粮中添加1.50%椰子粕可以显著降低料重比,同时提高屠宰率。

关键词: 椰子粕 文昌鸡 生长性能 屠宰性能 肉品质

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海南辣椒尖孢镰刀菌拮抗内生细菌的分离与鉴定

分子植物育种 2023 北大核心 CSCD

摘要:为了获得对辣椒尖孢镰刀菌具有较好防治效果的内生细菌,课题组于2022年1~3月份在海口、定安、澄迈、临高和陵水等海南辣椒主产区采样,并从健康辣椒样品中分离获得内生细菌192株,其中39株对辣椒尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)CMTT4-1有拮抗作用,分别来源于根系(23株)、茎秆(2株)、叶片(8株)和果实(6株),有拮抗作用菌株占比20.31%,抑菌率为10.68%~59.02%.通过形态学和16SrDNA序列测定及同源性分析,初步鉴定芽孢杆菌属(Bacillus spp.)细菌36株、短杆菌属(Brevibacterium spp.)1株、农杆菌属(Agrobac-terium spp.)1株和假单胞菌属(Pseudomonas spp.)1株.研究结果为辣椒枯萎病的生物防治提供了菌株来源.

关键词: 辣椒 尖孢镰刀菌 内生细菌 分离鉴定

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基于猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2a基因的RT-RAA-LF检测方法的建立

中国兽医科学 2023 北大核心 CSCD

摘要:本研究针对猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2a基因序列,设计特异性RAA引物和标记探针,通过反转录酶与重组酶扩增结合,旨在建立一种高效检测PRRSV的基于侧流层析试纸条的可视化RT-RAA方法。结果,建立的RT-RAA-LF方法的最佳反应条件是39℃恒温扩增10 min,可在2 min内实现对检测结果的可视化判定;该方法特异性强,仅对PRRSV出现阳性扩增,对本研究中其他病原均无交叉反应;以含PRRSV ORF2a基因全段序列的重组质粒作为模板,RT-RAA-LF的检出限为160 copies/μL。应用建立的RT-RAA-LF方法对临床采集的160份样本进行检测,与PCR方法进行比较,两种方法的符合率为96.8%(65/68),一致性检验为χ~2<3.84,在95%的置信区间内没有显著性差异,当中3份临床样品在PCR检测中为阴性。综上,基于PRRSV ORF2a建立的RT-RAA-LF方法操作简单,对仪器设备要求不高,能够高效且直观的实现临床检测,满足现场检测的要求,对猪养殖场快速诊断和防控PRRSV具有重要意义。

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF2a 侧流层析试纸条 重组酶介导扩增法(RAA) 临床检测

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姜黄素对海南屯昌猪生长性能、饲料养分表观消化率和血清生化指标的影响

中国畜牧兽医 2023 北大核心 CSCD

摘要:【目的】研究饲粮中添加姜黄素对生长期海南屯昌猪生长性能、血清生化指标和饲料养分表观消化率的影响。【方法】选取健康、体重(35.88 kg±0.25 kg)接近的80头海南屯昌猪,随机分成5组,每组4个重复,每个重复4头猪,其中对照组饲喂基础饲粮,抗生素组在基础饲粮中添加300 mg/kg硫酸黏膜杆菌素,3个试验组分别在基础饲粮中添加200(姜黄素1组)、400(姜黄素2组)和600 mg/kg(姜黄素3组)姜黄素。预饲期7 d,正试期50 d。试验第51天早上称重,计算生长性能;从每组随机选取6头猪静脉采血,检测血清生化指标;每个重复随机收集3头猪的新鲜粪便,测定饲料养分表观消化率。【结果】与对照组相比,姜黄素3组猪平均日增重(ADG)提高23.82%(P<0.05);料重比(F/G)降低20.06%(P<0.05);血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和二氨氧化酶(DAO)含量分别降低22.23%和29.31%(P<0.05);血清IgA含量提高21.14%(P<0.05)。与抗生素组相比,姜黄素3组猪平均日增重(ADG)提高23.09%(P<0.05);粗纤维表观消化率提高42.14%(P<0.05);血清AST活性降低31.75%(P<0.05)。姜黄素2组猪平均日增重与对照组和抗生素组均无显著差异(P>0.05),粗纤维表观消化率极显著高于对照组和抗生素组(P<0.05);与对照组相比,姜黄素1、2组猪血清D-乳酸和DAO含量均显著降低(P<0.05)。【结论】饲粮中添加600 mg/kg姜黄素可以提高生长期海南屯昌猪的生长性能和粗纤维表观消化率,提升机体免疫状态,具有替代抗生素的潜力。

关键词: 姜黄素 海南屯昌猪 生长性能 表观消化率 血清生化指标

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海南野生稻白叶枯病抗性种质资源的收集与初步鉴定

植物遗传资源学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为抢救性收集和保护海南省野生稻资源,2021年11月中国农业科学院作物科学研究所与海南省农业科学院粮食作物研究所联合开展了海南省野生稻调查、异位保护及白叶枯病抗性鉴定工作。本研究对海南省的11个县市的17个乡镇21个野生稻分布点进行考察,发现有9个分布点处于濒危状态,7个受到不同程度的破坏,仅2个野生稻保护区未受干扰和3个分布点受到轻微干扰。抢救性收集野生稻资源210份,统一保存于国家野生稻种质圃。同时,本研究使用毒性强、致病性广的白叶枯病菲律宾致病小种6(PXO99),采用人工接种的方式对本次考察收集的145份普通野生稻和47份药用野生稻进行白叶枯病抗性鉴定,最终筛选出5份高抗白叶枯病的野生稻种质资源,为水稻抗白叶枯病的研究和育种奠定了丰富的材料基础。

关键词: 海南野生稻 异位保护 白叶枯病 抗性鉴定

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5种热带农业废弃物好氧堆肥过程中的变化及堆肥产物施用效应分析

植物资源与环境学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为了探明中国热带地区农业废弃物的堆肥效果及堆肥产物的施用效应,对海南省 5 种典型农业废弃物(包括蔗渣、橡胶木屑、椰糠、菠萝叶和木薯杆)好氧堆肥过程中温度、养分含量和堆肥腐熟度指标的变化进行了比较,并分析了不同堆肥产物对连茬小白菜(Brassica campestris subsp.chinensis Makino)单株干质量及土壤主要理化指标的影响.结果表明:5 种农业废弃物的好氧堆肥过程均可分为升温期、高温期、降温期和腐熟期 4 个阶段,高温期可持续 6~11 d.堆肥28 d,5 种农业废弃物的pH值(pH 7.81 至pH 8.55)、电导率(1575~3604 μS·cm-1)及堆肥产物培养的小白菜种子发芽指数(106.7%~140.0%)均达到NY/T 525-2021 公布的腐熟标准.堆肥前后的养分含量总体上存在显著(P<0.05)差异,堆肥后有机质、全氮、全磷、全钾和总养分含量分别为 40.46%~47.26%、1.82%~2.28%、1.96%~2.62%、1.45%~2.04%和 5.74%~6.31%.与无肥料处理组和化肥处理组相比,5 个堆肥产物处理组土壤的有机质、全氮、碱解氮、有效磷和速效钾含量以及pH值和总孔隙度总体上显著升高,土壤容重却显著降低,蔗渣、橡胶木屑和椰糠堆肥产物处理组的小白菜单株干质量显著升高.综上所述,供试 5 种农业废弃物的堆肥效果总体较好,其中,蔗渣、橡胶木屑和椰糠堆肥产物对小白菜的增产效果较好.

关键词: 热带农业废弃物 好氧堆肥 腐熟标准 施用效应 资源化利用

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