科研产出
新型鸭呼肠孤病毒一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用
《浙江农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为建立一种快速、敏感和特异性检测新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)的方法,本研究根据GenBank数据库中NDRV S3基因保守序列设计1对特异性引物和1条MGB荧光探针,建立了一种检测NDRV的一步法MGB荧光定量RT-PCR方法,对其特异性、敏感性和重复性进行检验,并与普通RT-PCR进行比较.结果显示,扩增标准曲线相关系数为0.999,扩增产物的熔解曲线仅出现单特异峰.该方法对经典鸭呼肠孤病毒、H9N2禽流感病毒、鸭坦布苏病毒、A型鸭肝炎病毒、鸭新城疫病毒、鸭瘟病毒及番鸭细小病毒均未检测到信号,对NDRV的最小检出量为10拷贝·μL-1.组内和组间变异系数均小于2%,重复性好.此外,利用该方法对239份疑似新型呼肠孤病毒病样品进行检测,常规RT-PCR检测时有75份为阳性,一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法检测时有100份为阳性,而且常规RT-PCR检测出的阳性样品用一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测时均为阳性,符合率为100%.该检测方法的建立为NDRV早期快速检测及定量分析提供新的方法.
关键词： 新型鸭呼肠孤病毒 MGB探针 荧光定量RT-PCR 检测方法
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一种南方小花蝽产卵基质的高效利用方法
《浙江农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：南方小花蝽(Orius strigicollis)是一类应用前景广阔的捕食性天敌。以芸豆豆荚作为南方小花蝽的产卵基质,研究了南方小花蝽在该产卵基质上产卵部位选择的偏好性,并以此为基础探讨了一种该产卵基质的高效利用方法。结果表明,90%以上的南方小花蝽卵被产在豆荚的荚缝线处,而且50%以上的卵被产在豆尖的荚缝处。斜45°切取豆荚的豆尖部分,并对切口处进行上蜡包裹,放置5 d切口处密封性仍保持完好,荚果保持新鲜,并且不影响卵的孵化。研究明确了该产卵基质高效利用方法的可行性,能为后期南方小花蝽室内扩繁和产品创制提供科学依据。
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瓠瓜(Lagenaria siceraria)白粉病抗性的全基因组关联分析
《分子植物育种 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：白粉病是瓜类作物重要病害之一。本研究采用苗期人工接种方法,研究了117份瓠瓜微核心种质对白粉病的抗性,并基于不同材料的病情指数和基因型数据,进行全基因组关联分析(genome-wide association analysis, GWAS)。利用2014年和2018年的抗病表型数据,分别鉴定到22个和13个与白粉病抗性相关的SNPs,其中2个SNPs位点在两年试验中同时被检测到。进一步研究发现不同瓠瓜材料的白粉病抗性与其携带有利等位变异数目成正相关。本研究为克隆瓠瓜抗白粉病相关基因、研究其抗病机制提供科学依据,促进了瓠瓜抗白粉病分子育种。
关键词： 瓠瓜(Lagenaria siceraria) 白粉病 关联分析
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小黄鱼(Larimichthys polyactis)精子的生理特性及超低温冷冻保存研究
《海洋与湖沼 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了解养殖小黄鱼精子的生理特性及超低温冷冻保存效果,用计算机辅助精子分析系统(CASA)检测了小黄鱼精子的运动参数及盐度、pH、葡萄糖、离子等环境因子的变化对其精子活力的影响;探究了稀释液、抗冻剂、稀释比及降温高度等对精子冷冻保存效果的影响。结果显示:小黄鱼精液的精子密度为(6.92±1.20)×109/mL。精子经自然海水激活后,运动率、运动时间及寿命分别为(59.31±4.85)%、8.44±0.87min及12.20±0.50min,直线运动速率(VSL)、曲线运动速率(VCL)及平均路径运动速率(VAP)分别为11.96±5.21、25.38±7.19和22.33±6.88μm/s。精子运动适宜的盐度范围为25—30、适宜的pH范围为7.5—8.5,精子在盐度25或pH8.0的海水中活力较好。精子激活效果较好的葡萄糖浓度为0.7—0.9mol/L;浓度0.9mol/L时,精子活力较好。精子激活效果较好的KCl、NaCl、MgCl2及CaCl2溶液浓度分别为0.4—0.5、0.4—0.6、0.7—1.0和0.2—0.3mol/L;精子在KCl及CaCl2溶液中活力相对较差,运动率等参数显著低于对照组;精子在不同人工海水中的运动率显著低于自然海水中的运动率,但精子在单一离子缺陷型人工海水及全人工海水中的运动率无显著差异。以0.25mL麦细管为冻存管, 6种稀释液、不同浓度的4种抗冻剂、5种稀释比及5种降温高度对小黄鱼精子冷冻保存效果的影响试验发现,以HBSS液1︰3稀释精液,添加10%DMSO及15%PG为抗冻剂,液氮面上3.5cm处降温5min后投入液氮中保存效果较好,冻精解冻后运动率达(43.57±2.59)%及(43.06±6.77)%。
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载体中蓟马聚集信息素组分的释放速率测定及其储藏温度筛选
《植物保护学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为明确蓟马聚集信息素组分在2种常用载体中的释放规律,应用固相微萃取(SPME)和气相色谱-质谱联用技术测定不同聚集信息素剂量(1、10、100μg)和萃取时间(30、60、120 min)下SPME萃取头对载体中3种蓟马聚集信息素组分的萃取效率,筛选最佳萃取条件,并分析储藏温度对载体中蓟马聚集信息素组分释放速率的影响.结果表明,在橡胶塞和PVC管2种载体中,相同聚集信息素剂量下,与萃取30 min处理相比,萃取60、120 min时SPME萃取头对载体释放的3种聚集信息素组分的萃取效率或无显著差异,或随萃取时间增加而呈现降低趋势;相同萃取时间下,SPME萃取头对载体释放的3种聚集信息素组分的萃取效率均随剂量增加而显著增大.因此,测定载体中聚集信息素释放速率的最佳条件为萃取时间30 min、剂量100μg.室温25℃储藏条件下,橡胶塞和PVC管中3种聚集信息素组分的释放速率均在存储2 d时最高,之后随存放时间的延长而逐渐降低;-20℃储藏条件下,载体中3种聚集信息素组分的释放速率随着存放时间的延长相对稳定,56 d内释放速率均处于较高水平,且显著高于室温下储藏载体中聚集信息素组分的释放速率.表明-20℃储藏可有效减少载体中聚集信息素组分的损耗,即-20℃是聚集信息素载体储藏的适宜温度.
关键词： 聚集信息素 缓释载体 固相微萃取(SPME) 释放速率 储藏温度
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利用共转化方法创制携带Pi9抗稻瘟病基因的无选择标记转基因水稻
《分子植物育种 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：水稻稻瘟病是由子囊菌(Magnaporthe oryzae)引起的水稻灾害性病害。培育抗病品种是防治稻瘟病最经济有效的措施之一。水稻Pi9抗稻瘟病基因来源于小粒野生稻并已被克隆和应用于转基因育种。为了提高无选择标记转基因植株的选择效率,将绿色荧光蛋白(GFP)用作可视遗传标记,对双菌株共转化系统进行改良:目的基因载体携带Pi9抗稻瘟病基因;标记基因载体用潮霉素磷酸转移酶(HPT)作为植物转化选择标记,用GFP作为负选择标记,筛除标记基因分离植株。两种载体的农杆菌转化株混合,分别与水稻品种‘浙恢414’、‘浙粳22’、‘浙11B’、‘日本晴’、‘空育131’和‘粤泰B’的愈伤组织共培养,然后从5%～38.3%的起始愈伤组织筛选获得了转化愈伤组织(HPT+GFP+)。对T0植株进行Pi9基因PCR检测,11.8%～77.8%的T0植株为共转化植株(HPT+GFP+Pi9+)。对共转化植株T1代进行绿色荧光检测,筛选阴性植株(GFP-),再通过PCR筛选Pi9+植株。根据13个T1群体的研究结果,61%的共转化植株在T1代分离出无选择标记转基因植株(HPT-GFP-Pi9+)。转Pi9的无选择标记植株和后代株系对水稻稻瘟病呈抗病反应。因此,本研究通过GFP标记提高了双菌株共转化系统的选择效率,转Pi9的无选择标记水稻株系为水稻抗稻瘟病育种提供了有用的遗传资源。
关键词： 水稻(Oryza sativa) 共转化 稻瘟病(Magnaporthe oryzae) 转基因植物 选择标记
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四种杂柑全果饮品的加工适应性与贮藏特性
《浙江农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为比较胡柚、瓯柑、高橙和甜橘柚等4种杂柑制成全果饮品的加工适应性与贮藏特性,筛选适合全果饮品加工的杂柑品种,将4种杂柑按课题组前期工艺加工成全果饮品,于40℃避光保存,每隔20 d取样用于抗坏血酸、总酸、总酚含量、抗氧化能力、色泽和黏度等指标检测,并对前3次的样品进行感官评价。贮藏期间,各品种的抗坏血酸含量下降,总酸含量基本保持不变,黏度、总酚含量和抗氧化能力先升后降,色泽均加深且色差趋于相近。高橙的抗坏血酸、总酸和总酚含量比其他品种高。不同品种杂柑的全果饮品各有利弊:甜橘柚适用于开发年轻化产品;胡柚和高橙含有较高的活性成分,适用于功能饮品开发,适当贮藏后口感得到提升;瓯柑适用于开发成老幼皆宜的产品。
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4种粪便堆肥过程中抗生素的降解特性
《环境科学 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：饲料中抗生素的广泛使用导致了粪便中抗生素的大量残留,堆肥工艺可以降解残留的抗生素.本研究以蛆粪、鸡粪、猪粪和牛粪为对象,利用中试好氧堆肥装置,研究不同类型粪便的抗生素残留情况及其堆肥降解特性.结果表明,磺胺类、氟喹诺酮类、四环素类和大环内酯类是主要存在的抗生素类型,不同类型粪便其优势抗生素均不同.对各粪便堆肥中抗生素降解规律研究发现:氟喹诺酮类抗生素和土霉素在堆肥第7 d检出水平为0,降解速度最快;强力霉素在4种粪便堆肥中的降解幅度在85%以上;磺胺类抗生素在鸡粪、猪粪和牛粪堆肥中的降解幅度在80%以上,但是在蛆粪堆肥中的降解效果较差;大环内酯类抗生素仅存在蛆粪中,经堆肥其降解幅度为70. 79%.相关性结果显示,含水率和容重是影响4种粪便堆肥抗生素降解率最主要的环境因子.
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甘薯胡萝卜素含量、干率聚合育种的一个特例
《分子植物育种 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：2005年采用高胡萝卜素、低干双亲的特殊组合'浙薯81'*'浙薯255'创制出甘薯优异高干红肉品种'浙薯13'.为了探索甘薯胡萝卜素含量、干率聚合育种新方法,2016年对这一双亲的正反交组合F1胡萝素含量、干率进行了测定和遗传分离规律分析.结果表明,正反交组合的胡萝卜素含量遗传主要受非加性效应控制,组合传递力分别为45.32%和49.73%.干率不仅存在加性效应,而且呈明显的超亲遗传,正反交组合的超亲优势分别达到15.12%和12.75%,超高亲率约70%,呈现相当于高干*低干的遗传分离,中、高干类型比例高达60%左右,其中高干类型比例约28%.杂交后代含有干率≥25%、胡萝卜素含量≥3 mg/100 g FW的株系占26.10%,含有干率≥25%、胡萝卜素含量≥10 mg/100 g FW的株系占9.78%.干率是甘薯食味的主要影响因子.因此,'浙薯81'与'浙薯255'杂交可以高效地聚合胡萝卜素含量和干率,大幅度提高优质食用高胡萝卜素育种的筛选效率.
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早熟砂梨新品种'新玉'的选育
《果树学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：'新玉'是由'长二十世纪'*'翠冠'杂交选育的早熟鲜食砂梨新品种.该品种树势中庸偏强,树姿半开张,花芽易形成.果实扁圆或圆形,果皮黄褐色,果肉白色.肉质细脆,汁液多,风味甜,无香气.平均单果质量305 g,大果质量可达700 g,果形指数0.85,较端正.每果实含种子8~10粒.平均可溶性固形物含量12.1%,品质上.果实发育时间110 d左右,在杭州地区(经度120.408 8,纬度30.427 2)7月中旬成熟,成熟期介于'翠玉'和'翠冠'之间.每个花序5~8朵花,多者12~13朵,萌芽率高,成枝力中等,枝条质地坚硬且脆,在拉枝时易折断.当年生新梢容易形成腋花芽.适合浙江及周边省区的砂梨产区栽培,第3年开花结果,丰产、稳产.可用'玉冠''翠玉''黄花''红酥脆'等作为授粉品种.2018年获得植物新品种授权.
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