牙鲆rnd1基因克隆、表达模式及与抗病力的关系

张子威; 王磊; 李开敏; 卢昇; 郑卫卫; 陈松林; 《渔业科学进展 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：迟缓爱德华氏菌病是海水鲆鲽鱼类的主要病害，发掘抗病分子标记辅助育种是十分有效的策略。本研究以牙鲆（Paralichthys olivaceus） rnd1基因（Pornd1）为对象，对该基因在牙鲆抗病免疫方面的作用进行系统分析。首先对Pornd1基因进行克隆鉴定和抗病相关单核苷酸多态性位点的定位，然后利用荧光定量PCR （qRT-PCR）对Pornd1基因的组织分布、细菌感染后表达情况以及在抗病和易感家系中的表达水平进行检测。结果显示，Pornd1 c DNA开放阅读框为699 bp，编码232个氨基酸。结合前期GWAS分析数据，本研究对Pornd1基因扩增和测序，确定Pornd1基因内含子2上存在一个抗迟缓爱德华氏菌病相关单核苷酸多态性位点，该位点在易感家系和抗病家系中分别是C/T，抗病家系（freqT=0.92）高于易感家系（freqT=0.20），具有显著性差异（P＜0.05）。Pornd1在心、肝和肾中的相对表达量较高；迟缓爱德华氏菌感染后肝、肾和脾中Pornd1的表达量在6 h降低后逐渐升高，在48 h达到最高。Pornd1在抗病家系肝脏中的表达量显著高于易感家系。在蛋白水平，利用大肠杆菌（Escherichia coli）表达系统表达PoRnd1重组蛋白，检测其抑菌活性，发现PoRnd1重组蛋白对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌、迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）和哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）均具有一定抑菌活性。本研究揭示了Pornd1在牙鲆免疫抗病方面的作用，为开展牙鲆抗病分子育种提供了一个有效标记，并为解析其抗病性状的遗传机制提供理论基础。

关键词： 牙鲆 rnd1 迟缓爱德华氏菌 抗病免疫 抑菌活性

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富硒植物乳杆菌对大鳞鲃组织铅积累及氧化应激的影响

张晴; 尚信池; 耿龙武; 李海涛; 杜汝君; 丛艳锋; 徐伟; 《大连海洋大学学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为探究铅（Pb）胁迫下富硒植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）对大鳞鲃（Luciobarbus capito）的保护作用，利用植物乳杆菌将无机硒转化为纳米硒并添加到鱼饲料中，选用体质量为（75.4±0.9）g的大鳞鲃，设置对照组（control,饲喂基础饲料）、铅组（水中Pb质量浓度为0.2 mg/L,饲喂基础饲料）和富硒铅组（SL+Pb,水中Pb质量浓度为0.2 mg/L,饲喂富硒饲料，纳米硒含量为5 mg/kg,植物乳杆菌含量为3.125×10~8 CFU/kg）,养殖试验共进行14 d,然后采集样本，测定各组大鳞鲃肝、肾、鳃、肠和肌肉中硒和铅的积累量，以及抗氧化酶活力和抗氧化基因表达量。结果表明：当亚硒酸钠质量浓度为200μg/mL时，培养基中植物乳杆菌菌落数量最多，达1.150×10~7 CFU/mL,纳米硒含量为184μg/mL,电镜下可观察到球形纳米硒颗粒（SeNPs）;富硒铅组鱼体各组织中硒的积累量显著高于对照组和铅组（P＜0.05）,铅组鱼体肝、肾、鳃和肌肉组织中的硒含量均显著低于对照组（P＜0.05）,但肠道中硒含量显著高于对照组（P＜0.05）;铅组和富硒铅组鱼体各组织中铅的积累量显著高于对照组（P＜0.05）,铅组鱼体各组织中铅的积累量依次为鳃＞肝＞肾＞肠＞肌肉，富硒铅组鱼体铅的积累量显著低于铅组（P＜0.05）;富硒植物乳杆菌能够显著提高铅胁迫下鱼体肾和鳃组织中过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）的活性（P＜0.05）,显著降低丙二醛（MDA）含量（P＜0.05）;铅组和富硒铅组鱼体肾组织中抗氧化基因Nrf2、HO-1和GPx表达量显著降低（P＜0.05）,与铅组相比，富硒铅组这些指标显著增加（P＜0.05）。研究表明，在含铅水体胁迫下，饲料中添加富硒植物乳杆菌能够降低鱼体各组织中的铅积累量，缓解铅胁迫下鱼体的氧化应激。

关键词： 大鳞鲃 植物乳杆菌 纳米硒 铅 生物积累 氧化应激

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饲料中添加丁酸梭菌对卵形鲳鲹幼鱼生长性能、血清生化指标及肠道菌群和短链脂肪酸含量的影响

吴杨; 黄倩倩; 虞为; 徐创文; 洪敏娜; 蒋魁; 麦晓勇; 陈海谊; 林黑着; 杨铿; 《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：本试验旨在研究饲料中添加丁酸梭菌对卵形鲳鲹幼鱼生长性能、血清生化指标及肠道菌群和短链脂肪酸含量的影响。挑选活力、大小相似的卵形鲳鲹幼鱼450尾，初始体质量为（9.55±0.13） g，随机分为6组，每组3个重复，每个重复25尾。各组分别投喂丁酸梭菌添加量为0（C0组，对照组）、0.25%（C1组）、0.50%（C2组）、1.00%（C3组）、2.00%（C4组）和4.00%（C5组）的试验饲料。试验期60 d。结果表明：1) C4组的末均质量、增重率和特定生长率显著均显著高于C0和C5组（P＜0.05）,C2组的肥满度显著高于C0和C5组（P＜0.05）。2) C1组的血清总蛋白、葡萄糖、高密度脂蛋白含量及谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性显著高于C0组（P＜0.05）。3)在门水平上，C5组的肠道放线菌门（Actinobacteria）、厚壁菌门（Firmicutes）和拟杆菌门（Bacteroides）相对丰度显著高于C0组（P＜0.05）,C4组的肠道脱铁杆菌门（Aferrobacteria）相对丰度显著高于C0和C5组（P＜0.05）,C4和C5组的肠道厚壁菌门/拟杆菌门显著低于C0组（P＜0.05）。在属水平上，C4组的肠道发光细菌属（Photobacterium）、芽孢杆菌属（Bacillus）和Mucispirillum相对丰度显著高于C0组（P＜0.05）,C5组的肠道乳杆菌属（Lactobacillus）、拟杆菌属（Bacteroides）、分支杆菌属（Mycobacterium）、弧菌属（Vibrio）、螺杆菌属（Helicobacter）、脱硫弧菌属（Desulfovibrio）、葡萄球菌属（Staphylococcus）相对丰度显著高于C0组（P＜0.05）。4) C4和C5组的肠道乙酸、异丁酸、异戊酸含量显著高于C0组（P＜0.05）。由此可见，饲料中添加适量的丁酸梭菌可提高卵形鲳鲹幼鱼的末均质量、增重率以及特定生长率，提高血清总蛋白和葡萄糖含量，改变门水平上和属水平上的肠道菌群组成，提高肠道短链脂肪酸含量。本试验条件下，饲料中丁酸梭菌适宜添加量为2.00%。

关键词： 卵形鲳鲹 丁酸梭菌 生长性能 肠道菌群 短链脂肪酸

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基于环境DNA宏条形码的红枫湖鱼类多样性研究

许龙飞; 姚邓雕; 郭星辰; 杨原伟; 李君轶; 姜海波; 安苗; 邵俭; 《水产学杂志 》 2023 北大核心

摘要：2020年11月，按地理区域将贵州省清镇市猫跳河梯级水电站拦河而成的典型喀斯特高原型深水人工水库红枫湖水域划分为南湖（S1、S2、S3）和北湖（S4、S5、S6）共6个采样点，利用eDNA(environmental DNA, eDNA)宏条形码技术探究了贵州喀斯特高原水域鱼类多样性。结果：共监测到鱼类28种，隶属于4个目、13个科、25个属，其中梭鲈属（Sander）、鲚属（Coilia）、鳜属（Siniperca）、乌塘鳢属（Bostrychus）和鲈属（Perca）为优势属；南北湖鱼类群落空间分布差异性不显著（P>0.05），但各样点鱼类群落组成差异明显，其中S2鱼类群落多样性指数最高（Chao1 618.9;Shannon 3.16）,S6鱼类群落多样性指数最低（Chao1 190.87;Shannon 0.98）。在所有鱼类组成中，鲈形目共13种，占46.43%，这表明该水域可能受人工养殖及引种放流等影响而导致外来物种入侵。结果表明，环境DNA技术可用于喀斯特高原水域的鱼类多样性及空间分布研究，并丰富了红枫湖鱼类基础资料及调查手段。

关键词： 喀斯特高原 鱼类多样性 层次聚类分析 PCoA分析 红枫湖

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鮸α-葡萄糖苷酶抑制活性肽的制备、分离及理化特性研究

霍玉梅; 胡晓; 吴燕燕; 江津津; 《南方水产科学 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为实现鮸(Miichthys miiuy)加工副产物的高值化利用，选用鮸加工副产物鱼碎肉作为原料，以α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)抑制率为评价指标，通过单因素实验和响应面法优化α-葡萄糖苷酶抑制肽的制备工艺条件，确定胰酶的最佳酶解条件为：时间4.8 h，加酶量0.21%,pH 8.5，料液比1∶2 (m∶V)，温度46℃。在此基础上，分析了酶解产物体外模拟胃肠液消化前后其抑制活性的变化，绘制酶抑制动力学曲线，并采用SephadexG-25对酶解物进行分离，测定酶解物的相对分子质量分布及氨基酸组成。结果表明：活性肽经体外模拟胃肠液消化后α-葡萄糖苷酶抑制率提高至61.97%；其对α-葡萄糖苷酶抑制作用为混合型抑制；酶解物的相对分子质量集中分布在3 kD以下(占91.85%)；经G-25分离，F4组分对α-葡萄糖苷酶抑制率为58.05%，其<1 kD的肽组分占78.28%；酶解物中天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丙氨酸、亮氨酸和赖氨酸等相对含量较高。

关键词：  α-葡萄糖苷酶抑制活性肽 酶解 响应面优化法

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脉红螺对不同贝类的摄食行为特征研究

徐希震; 房景辉; 方建光; 张志新; 蒋增杰; 张义涛; 王军威; 毛玉泽; 《渔业科学进展 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：通过模拟自然环境，研究了脉红螺(Rapana venosa)对生境中存在的不同贝类的摄食选择性及其摄食行为过程和摄食节律。在水族箱中投放3种规格的脉红螺和3种规格的四角蛤蜊(Mactra veneriformis)、菲律宾蛤仔(Ruditapesphilippinarum)、紫贻贝(Mytilusedulis)和长牡蛎(Crassostrea gigas)活体饵料，记录3种规格的脉红螺对不同饵料的摄食个数、摄食重量、摄食规格、摄食时间以及摄食行为过程。结果显示，脉红螺对4种贝类均有摄食，其中，不同规格脉红螺对四角蛤蜊的摄食个数及重量显著高于其他贝类(P<0.05)，摄食指数超过50%，表现为喜食，对牡蛎和菲律宾蛤仔正常摄食，只有大规格脉红螺对紫贻贝有少量摄食。在摄食规格选择方面，3种规格的脉红螺明显喜食较大规格的四角蛤蜊以及小规格的长牡蛎(P<0.05)。大规格脉红螺的摄食率为7.15%，显著小于其他2种规格的脉红螺(小规格：10.98%；中规格：9.64%)。在本实验条件下，脉红螺摄食有明显的周期性，每隔3 d进行摄食活动，摄食时间为20:00～24:00。脉红螺的摄食过程可分为未摄食阶段、搜寻阶段、摄食阶段和摄食结束4个阶段。在摄食过程中，脉红螺主动搜寻贝类，腹足将贝类从沙中移出并包裹，在包裹的同时分泌黏液并将吻从贝壳缝隙伸入，在吸食被消化液分解的贝类软体部分之后潜入沙中或附在水族箱壁。研究表明，在本实验条件下，脉红螺对饵料贝的种类和规格有明显的摄食偏好性，明显喜食四角蛤蜊，极少摄食贻贝，并且其摄食行为具有夜行性和明显的周期性，即每3 d的上半夜进行一次摄食活动。

关键词： 脉红螺 摄食选择 摄食节律 摄食过程 摄食率

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海淡水养殖中华鲟免疫特性的比较

陈雪卉; 冷小茜; 罗江; 杜浩; 刘志刚; 乔新美; 熊伟; 危起伟; 《水生生物学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：实验以淡水养殖的4龄中华鲟（Acipenser sinensis）为研究对象,经海水驯化后实施全海水养殖,探究中华鲟在海水养殖条件下血液理化指标和免疫组织结构变化。结果显示:与淡水养殖个体相比,海水养殖后中华鲟的血红蛋白（HB）、红细胞比容（HCT）和白细胞数（WBC）均显著升高（P＜0.05）,红细胞数（RBC）与各类白细胞占比无显著变化（P＞0.05）;超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、溶菌酶（LZM）、免疫球蛋白M（IgM）、碱性磷酸酶（AKP）和酸性磷酸酶（ACP）等6种免疫生化指标与淡水个体无显著差异（P＞0.05）。对免疫组织的观察发现,海水养殖中华鲟头肾组织中细胞聚集,形态分布更整齐,黑色素巨噬细胞中心增多;脾脏组织的淋巴细胞和红细胞分布更加密集。研究结果表明,海水养殖会在一定程度上增强中华鲟的免疫和造血功能,保持较好的生理状态。

关键词： 淡水养殖 海水养殖 血液生理生化 免疫组织 中华鲟

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黄海南部及东海黄鮟鱇时空分布

袁兴伟; 姜亚洲; 高小迪; 杨林林; 刘尊雷; 程家骅; 《应用生态学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为探究黄鮟鱇栖息地时空分布特征，根据2018年11月(秋季)和2019年1月(冬季)、5月(春季)、8月(夏季)在黄海南部和东海开展的近海渔业资源大面定点底拖调查资料和同步采集的底层水温、底层盐度、底层溶解氧及水深数据，利用提升回归树(BRT)模型确定各环境因子的权重，分别选用算术平均法(AMM)和几何平均法(GMM)构建不同季节黄鮟鱇栖息地适宜性指数(HSI)模型，并通过交叉验证对模型输出结果进行比较分析。结果表明：2018—2019年黄鮟鱇最适栖息地存在季节差异。春季，黄鮟鱇最适栖息于49 m以浅的长江口及江苏近海浅水区；夏、秋季最适栖息于底层水温8.9～10.9℃的黄海东南部深水区；冬季最适栖息于9.2～12.7℃的黄海南部和东海北部深水区。BRT模型分析结果显示，春季对黄鮟鱇总偏差贡献率最大的是水深，其余3季贡献率最大的均为底层水温。交叉验证发现，除夏季外，运用AMM算法且赋予权重的HSI模型拟合效果更优。黄海南部和东海黄鮟鱇的时空分布特征与其生态习性及环境因子密切相关。

关键词： 黄鮟鱇 栖息地适宜性指数 环境因子 提升回归树 时空分布

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温棚培育南美白对虾大规格生态苗种新模式

李忠红; 李耕; 申旭东; 陈明康; 任传麒; 郑文军; 《科学养鱼 》 2023 北大核心

摘要：近年来，辽宁地区很多南美白对虾养殖户尝试池塘温棚生态培育方式，通过自育自养的管理方式培育大规格苗种，现以2023年辽河三角洲地区养殖示范户池塘温棚培育方式为例，就相关技术进行探讨。一、材料与方法1.苗种来源2023年5月中旬引进南美白对虾，经淡化后苗种放入温棚池塘进行大规格苗种培育，选择品系具有生长速度快、抗病能力强、适宜内外高密度养殖环境的优良特性，

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长岛海域东亚江豚种群密度和分布的初步研究

李永涛; 于国旭; 程兆龙; 左涛; 牛明香; 王俊; 《动物学杂志 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：长岛海域是黄渤海东亚江豚（Neophocaena asiaeorientalis sunameri）的热点分布区域之一。为了掌握长岛海域东亚江豚的种群密度与分布特征，2019年10月至2021年10月采用截线抽样法进行了5次东亚江豚目视考察。5次考察总航程2 421 km，共发现东亚江豚614次，1 156头次。相同月份调查种群遇见率无显著性差异（P＞ 0.05），不同月份种群遇见率差异极显著（P ＜0.01），提示东亚江豚种群在该水域可能存在季节性迁移。按照考察月份对数据进行合并处理，长岛海域5月和10月东亚江豚平均种群密度为（0.56±0.11）头/km~2（0.46～0.68头/km~2）和（3.63±0.25）头/km~2（3.38～3.88头/km~2），平均种群数量为（20 209±202）头和（2 971±681）头，这在目前已知所有东亚江豚分布区中是最高的。尽管不同季节种群数量差异显著，但东亚江豚种群在长岛海域的空间分布特征相似，砣矶岛-大钦岛西北侧和东南侧均为高密度分布区，因此建议将该水域作为核心区域重点保护。此外，我们还建议未来加强对其迁移规律及栖息地选择的研究。

关键词： 东亚江豚 种群数量 分布 动物保护

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