科研产出
小麦条锈菌GMPP基因克隆及其产物糖转运功能分析
《四川农业大学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探讨条形柄锈菌小麦专化型真菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici,Pst)中预测编码甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶(mannose-1-phosphate guanylyltransferase,GMPP)基因产物的糖转运功能.[方法]基于Pst转录组数据与NCBI中17个Pst基因组比对结果设计引物,筛选和克隆Pst的GMPP基因,命名为PsMT1,构建表达载体并导入酵母己糖转运缺失突变体EBY.VW4000,对获得的pDR196-PsMT1-EBY.VW4000重组酵母菌进行糖吸收功能互补测定.[结果]PsMT1基因的编码区为1245 bp,编码414个氨基酸,等电点为6.05.构建的无根进化树显示PsMT1与小麦秆锈菌的GMPP单独聚为一个分支.在酵母己糖转运功能缺失突变体中表达PsMT1能恢复EBY.VW4000菌体在D-甘露糖为唯一碳源的固体培养基上生长.[结论]克隆了Pst的PsMT1基因,其异源表达产物具有转运甘露糖的功能,为研究糖转运蛋白介导Pst-小麦互作的机制奠定基础.
关键词： 小麦条锈菌 糖转运 甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶 异源表达
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植物乳杆菌对小鼠体重、炎症反应及肠道健康的影响
《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究植物乳杆菌对小鼠体重、肠道形态、血清炎症因子、盲肠内容物短链脂肪酸（SCFAs）及肠道菌群的影响。试验选用20只8周龄雌性昆明小鼠，随机分为对照组和植物乳杆菌组，每组10只。植物乳杆菌组小鼠每日灌胃浓度为1×109CFU/mL的植物乳杆菌悬液，灌胃量为0.2 mL/只，对照组小鼠每日灌胃等量生理盐水。试验期为14 d。结果表明：1)与对照组相比，灌胃植物乳杆菌对小鼠体重、增重率没有显著影响（P＞0.05）。2)与对照组相比，植物乳杆菌组小鼠空肠绒隐比显著上升（P＜0.05）。3)与对照组相比，植物乳杆菌组盲肠内容物总SCFAs含量显著升高（P＜0.05），而血清炎症因子[C-反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-8（IL-8）]含量无显著变化（P＞0.05）。4)与对照组相比，植物乳杆菌组小鼠盲肠内容物中乳杆菌属的相对丰度极显著升高（P＜0.01），有益菌相对丰度上升，同时潜在的致病菌相对丰度下降。综上所述，灌胃植物乳杆菌能够改善小鼠肠道形态，提高小肠吸收能力，提高优势菌属的相对丰度，有利于肠道健康。
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纤维素基水凝胶的构建及其应用
《材料工程 》 2023 EI 北大核心 CSCD
摘要：水凝胶是一种交联的三维网状亲水性聚合物材料,能够吸收和保留大量的水并且保持一定形状.近年来,随着石油资源的枯竭和人类对环境问题的日益关注,天然或改性类高分子合成聚合物水凝胶已成为研究的热点.纤维素及其衍生物是一大类可再生天然高分子材料,具有无毒、资源丰富以及种类繁多等特点,由它合成的纤维素基水凝胶具有良好的吸水保水性、生物相容性和生物可降解性等,可应用于医疗、环境、农业等多个领域.本文综述了近年来纤维素基水凝胶的构建及应用研究进展,将水凝胶的微观网络结构与宏观性能相结合,重点对比了单网络、互穿网络和半互穿网络纤维素基水凝胶的力学性能、溶胀性能和吸附性能等,并对其在医疗、环境、农业以及电子领域的应用进行总结.对开发兼具力学性能和生物相容性的纤维素基水凝胶以及未来发展更多绿色经济的方法合成纤维素基水凝胶材料并将之用于工业化提出了展望.
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免疫亲和注射器微萃取-高效液相色谱串联质谱法测定牛奶中玉米赤霉醇类化合物
《食品与生物技术学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：将偶联玉米赤霉醇单克隆抗体的二氧化硅作为注射器微萃取的选择性吸附剂，建立了检测牛奶中6种玉米赤霉醇类化合物（ZERs）的免疫亲和注射器微萃取-高效液相色谱串联质谱法（IA-MEPS-LC-MS/MS）。将牛奶离心后，取中间夹层，使用免疫亲和注射器微萃取，超纯水洗涤，甲醇洗脱，洗脱液浓缩，流动相复溶后进行LC-MS/MS分析，采用C18色谱柱分离，水-乙腈为流动相梯度洗脱。使用基质匹配外标法定量，在工作液质量浓度0.1～100.0 ng/mL时6种ZERs线性良好，相关系数在0.994 3～0.996 2；在ZERs添加水平为1 ng/g时，平均回收率在50.40%～68.34%，日内RSD在4.87%～17.64%，日间RSD在7.04%～18.75%，本方法的检测限（LOD）为0.05 ng/g，定量限（LOQ）为0.2 ng/g。
关键词： 玉米赤霉醇类化合物 免疫亲和注射器微萃取 牛奶 残留检测
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CIDEA基因对奶牛乳腺上皮细胞脂代谢相关基因表达及甘油三酯合成的影响
《农业生物技术学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：诱导细胞死亡的DNA片段化因子-α样效应物A(cell death-inducing DNA fragmentation factorα-like effector A,CIDEA)是一种脂滴(lipid droplet,LD)相关蛋白,在哺乳期的乳腺中高度表达,介导小脂滴变成大脂滴并促进甘油三酯(triglyceride,TAG)的积累.为了检测CIDEA基因对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMEC)中脂代谢相关基因表达及TAG合成的影响,本研究通过qPCR技术检测奶牛(Bos taurus)干奶期和泌乳盛期乳腺组织中的CIDEA基因表达变化;设计合成靶向CIDEA基因的siRNA检测脂代谢相关基因的表达;利用TAG试剂盒检测细胞内TAG的含量.结果表明,通过克隆得到全长660 bp的奶牛CIDEA基因(GenBank No.MW960011)的CDS区序列;对其进行了生物信息学分析发现,奶牛CIDEA基因核苷酸序列与婆罗门牛(B.indicus)(GenBank No.XM_019986952.1)、牦牛(B.mutus)(GenBank No.XM_005892367.1)、印度水牛(Bubalus bubalis)(GenBank No.XM_006043025.3)的同源性分别为99.73%、99.46%和98.52%,氨基酸序列同源性均在95%以上;qPCR检测发现,CIDEA基因在奶牛泌乳盛期的表达量是干奶期的1.5倍;在BMEC中转染siRNA,干扰效率达到95%以上;干扰CIDEA基因后,显著下调了脂肪酸从头合成相关基因固醇调节元件结合蛋白1(sterol-regulatory element binding proteins 1,SREBF1)、乙酰辅酶A羧化酶α(acetyl-CoA carboxylaseα,ACACA)的表达,同时抑制了TAG合成相关基因二酰甘油酰基转移酶1(diacylglycerol O-acyltransferase 1,DGAT1)、DGAT2、脂素1(lipin 1,LPIN1)和脂肪酸转运相关基因心脏脂肪酸结合蛋白3(heart fatty acid binding protein 3,FABP3)、人类白细胞分化抗原36(cluster of differentiation 36,CD36)的表达(P<0.05),并且促进了甘油三酯水解酶(adipose triglyceridelipase,ATGL)的表达(P<0.05);CIDEA干扰后,BMEC内TAG含量显著下降(P<0.05).综上所述,CIDEA基因在调节BMEC脂代谢相关基因及TAG合成方面发挥着重要的作用.本研究进一步明确乳脂代谢的调控机理,对奶牛产业的健康发展具有重要的理论和实践意义.
关键词： 奶牛 乳腺上皮细胞(BMEC) 诱导细胞死亡的DNA片段化因子-α样效应物A (CIDEA) 乳脂代谢 甘油三酯(TAG)
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12%精喹禾灵·乙羧氟草醚·甲咪唑烟酸微乳剂在花生中的残留行为评价
《农药 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]建立同时检测花生中乙羧氟草醚、甲咪唑烟酸、喹禾灵及其代谢物的分析方法，并评价农药残留安全性。[方法]样品经酸化乙腈提取，以优化QuEChERS方法净化，采用超高效液相色谱串联质谱仪，多反应监测模式测定，基质匹配外标法定量。[结果]乙羧氟草醚、甲咪唑烟酸、喹禾灵和喹禾灵酸的定量限在0.01～0.05 mg/kg之间；在0.01～1 mg/kg的添加质量分数范围内，各农药的添加回收率在80%～94%之间，且相对标准偏差均低于10%。在0.001～1.5 mg/L的质量浓度范围内，乙羧氟草醚、甲咪唑烟酸、喹禾灵和喹禾灵酸的线性相关性良好，相关系数均大于0.99。12%精喹禾灵·乙羧氟草醚·甲咪唑烟酸微乳剂，以180 g a.i/hm2于花生苗后早期用药1次，成熟期花生中各农药的残留量均低于其定量限，风险商（RQ）小于1。[结论]该方法操作简单、高效、稳定性好，可同时快速检测花生中多种农药的残留量，通过规范残留试验中值计算可知，各农药膳食风险均不会对一般人群健康产生不可接受的风险。
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L-苯丙氨酸的氨基功能化γ-Fe2O3磁固相萃取(英文)
《南开大学学报(自然科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：通过不同的修饰方法制备了以γ-Fe2O3为核的四种氨基化的磁性纳米材料分别为γ-Fe2O3@SiO2-cysteamine, γ-Fe2O3@SiO2-PEI, γ-Fe2O3@SiO2-G1.0, γ-Fe2O3@SiO2-APTMS.在吸附时间为0.5, 1, 2,4, 8 h, p H=3, 5, 7, 9, 11的条件下，通过磁固相萃取的方法吸附浓度为2.5×10-6 mol/L的苯丙氨酸，随后用荧光分光光度计检测上清液的荧光强度，荧光强度越低说明纳米材料的吸附效果越优秀.通过试验后发现γ-Fe2O3@SiO2-G1.0磁性纳米粒子在p H=5,吸附时间为8 h的条件下的吸附性最好. γ-Fe2O3@SiO2-PEI磁性纳米粒子在pH=3,吸附时间为0.5 h条件下的吸附性略逊于上者，但该材料的制备过程简易，吸附氨基酸所需时间更短.因此功能化的γ-Fe2O3磁性纳米材料用于固相萃取氨基酸具有一定的研究前景.
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德系西门塔尔与荷斯坦杂交F1代牛生长发育规律分析
《中国农学通报 》 2023 CSCD
摘要：为分析德系西门塔尔牛公牛与中国荷斯坦母牛杂交F1代生长发育规律，构建杂交F1代母牛体尺生长规律模型，探究杂交F1代母牛与相同条件下3、6、13、18月龄荷斯坦母牛体尺差异，试验测量杂交F1代公牛（0～6月龄）、母牛（0～23月龄）及3、6、13、18月龄荷斯坦母牛的体高、十字部位高、体斜长、胸围、腹围和尻宽等体尺数据，用Logistic、Brody、Gompertz和Bertallanffy等4种公式为模型，对杂交F1代母牛体尺和月龄间关系进行拟合，以曲线的拟合度R2评价曲线拟合效果。结果表明，德系西门塔尔与荷斯坦杂交F1代牛各项体尺指标随月龄增长均呈增长趋势，但不同体尺指标的生长速率不同；F1代母牛在5月龄之前，体高、十字部位高、体斜长、胸围、腹围的平均增长量为5.31、5.99、8.33、11.11、16.29 cm/月，在6月龄时各项指标增长幅度变小，分别增长1.76、2.99、6.34、7.81、7.56 cm/月，但这种缓慢增长的形势在7、8月龄时得到缓解；9月龄以后各项体尺指标相对稳定提高，到达17月龄后，各指标增长缓慢；杂交F1代公牛6月龄前体高、十字部位高、体斜长、胸围、腹围平均增长速度分别为4.29、4.76、6.76、9.34、14.73 cm/月；杂交F1代母牛3月龄后各项体尺指标均高于荷斯坦母牛。本试验中拟合的各项体尺指标曲线可作为估测德系西门塔尔与荷斯坦杂交F1代母牛生长规律的模型使用，可为引进德系西门塔尔牛进行中国荷斯坦牛杂交改良工作提供基础数据。
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