科研产出
CRISPR/Cas9技术编辑MPK7和MPK14基因创制抗穗发芽水稻新种质
《植物遗传资源学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：穗发芽对籼稻生产危害严重。编辑休眠调控基因,创制高休眠性新种质,进而提高穗发芽抗性,是探索改良穗发芽抗性的新途径。泰丰B(TB)是籼型优质杂交稻保持系,主要缺点是种子休眠性偏低,易受穗发芽危害。MPK7/14具有抑制粳稻种子休眠作用,尚不清楚是否适用于籼稻品种。本研究利用CRISPR/Cas9技术编辑泰丰B(TB)的MPK7和MPK14基因,通过测序筛选获得纯合变异株系,并利用发芽试验分析变异种子的休眠特性。共获得6个转基因株系,从其后代中筛到2个纯合移码突变株系。纯合变异后代种子休眠性大幅提高,杂合变异后代的休眠性也有明显改善。与泰丰B(TB)相比,变异纯合后代株高、分蘖数、穗粒数差异不显著。综上所述,同时敲除MPK7和MPK14可以提高泰丰B(TB)种子休眠性,抑制穗发芽和解决水稻穗发芽问题。这些结果为进一步解析穗发芽的抗性机制以及探索新的育种改良方法提供了参考。
关键词： 水稻(Oryza sativa L.) 穗发芽 种子休眠性 CRISPR/Cas9
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捶打时间对牛肉凝胶品质的影响研究
《食品工业科技 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为探究捶打工艺对牛肉凝胶品质的影响,以打浆工艺制作的牛肉凝胶为对照组,通过测定不同捶打时间的牛肉凝胶色差、肌原纤维蛋白氧化程度、蒸煮损失率、脂肪渗出率、质构特性,并测定牛肉凝胶的肉糜粒径、蛋白质二级结构及微观结构的变化,了解捶打时间对牛肉凝胶品质的影响机理.结果表明,捶打时间在15~40 min之间时,随着捶打时间延长,肉糜L*值与W值先降后升,a*值和b*值先升后降;肌原纤维蛋白氧化程度不断增加,总巯基不断减少,羰基值及溴酚蓝结合量不断增加;蒸煮损失率与脂肪渗出率先减少后增加;凝胶质构中硬度、咀嚼性逐渐增加,弹性、内聚性与回复性先增加后减少,以30 min为分界点,捶打30 min以内凝胶品质呈上升趋势,超过30 min呈下降趋势.30 min前凝胶品质上升原因为肉糜粒径减小及蛋白质二级结构β-折叠增多;30 min后凝胶品质下降原因为蛋白质氧化程度加深及凝胶微观结构的改变.试验结果表明传统捶打方式能提高肉糜品质,但过度捶打会引起肉糜品质劣变.
关键词： 牛肉;捶打加工;凝胶品质;蛋白质
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广州市沙田柠檬炭疽病病原菌种类的分子鉴定
《广东农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]明确沙田柠檬炭疽病的病原菌种类,为沙田柠檬炭疽病的田间防治提供指导.[方法]对采集的炭疽病样本进行分离纯化培养,获得ST2-1、ST2-2、ST2-3、ST3-1、ST3-2、ST3-3、ST4-1、ST4-2和ST4-3等9株沙田柠檬炭疽病病原菌.分别采用针刺和喷洒接种的方法测定上述菌株的致病性,并分别克隆其核糖体内转录间隔区(ITS)、β微管蛋白(TUB2)、钙调蛋白(CAL)、肌动蛋白(ACT)、核糖体大亚基(LSU)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)和几丁质合成酶1(CHS1)基因部分片段进行多基因联合鉴定.[结果]ST2-1、ST2-2、ST2-3、ST3-1、ST3-2、ST3-3、ST4-1、ST4-2和ST4-3均具有较强致病性,其中ST2-1、ST2-2和ST2-3的生物学特征和进化树表明它们属于暹罗刺盘孢菌(Colletotrichum siamense),ST3-1、ST3-2和ST3-3属于兰花刺盘孢菌(Colletotrichum cliviicola),ST4-1、ST4-2和ST4-3属于果生刺盘孢菌(Colletotrichum fructicola).[结论]综合形态学特征和分子生物学鉴定结果,引起沙田柠檬炭疽病的病原菌有暹罗刺盘孢菌、兰花刺盘孢菌和果生刺盘孢菌,其中暹罗刺盘孢菌仅分离自沙田柠檬发病的果实,兰花刺盘孢菌和果生刺盘孢菌分离自沙田柠檬发病的叶片,其中兰花刺盘孢菌能在柑橘类植物上引起炭疽病为国际上首次报道.
关键词： 沙田柠檬 广州市 炭疽病 果生刺盘孢菌 兰花刺盘孢 暹罗刺盘孢菌
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26～45日龄竹丝鸡饲粮粗蛋白质需要量研究
《中国畜牧兽医 》 2022 北大核心
摘要：【目的】研究饲粮粗蛋白质水平对26～45日龄竹丝公鸡生长性能、胴体性状和血清生化指标的影响，为此生长阶段粗蛋白质精准供给提供理论基础。【方法】1 625只26日龄竹丝肉公鸡根据体重一致原则分为5个处理组，每个处理组5个重复，每个重复65只鸡，各处理组饲粮粗蛋白质水平依次为18.5%、19.5%、20.5%、21.5%和22.5%,试验期20 d。每个重复于试验结束当天挑选接近平均体重的2只鸡屠宰，制备血清和分割屠体，测定胴体性状和血清生化指标。【结果】(1)饲粮粗蛋白质水平极显著影响肉鸡终末体重、平均日增重和料重比(P<0.01),随着粗蛋白质水平的升高，终末体重和平均日增重呈线性和二次曲线升高(P<0.01),料重比呈线性和二次曲线降低(P<0.01)。饲粮粗蛋白质水平对肉鸡平均日采食量和成活率无显著影响(P>0.05)。(2)饲粮粗蛋白质水平显著或极显著影响肉鸡屠宰率(P<0.01)、半净膛率(P<0.01)和全净膛率(P<0.05),但对胸肌率、腿肌率和腹脂率无显著影响(P>0.05),且屠宰率和半净膛率随粗蛋白质水平的升高呈线性和二次曲线降低(P<0.01或P<0.05)。(3)饲粮粗蛋白质水平极显著影响肉鸡血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胆固醇(TC)含量(P<0.01),且TC含量随粗蛋白质水平的升高呈线性降低(P<0.05)。饲粮粗蛋白质水平对肉鸡血清尿素氮(BUN)和甘油三酯(TG)含量无显著影响(P>0.05)。【结论】饲粮21.5%粗蛋白质水平可改善肉鸡生长性能，19.5%～20.5%粗蛋白质水平可改善胴体性状，18.5%粗蛋白质水平可调节脂代谢。根据二次曲线模型估测，建议此生长阶段竹丝鸡饲粮粗蛋白质水平为21.41%～21.83%,可获得最佳生长性能。
关键词： 粗蛋白质水平 竹丝鸡 生长性能 胴体性状 血清生化指标
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剑尾鱼IgD基因的克隆及其在嗜水气单胞菌疫苗免疫后的表达变化
《广东农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]以剑尾鱼(Xiphophorus helleri)为试验对象,克隆获得其免疫球蛋白D(Immunoglobulin D,IgD)的cDNA序列,初步探讨该基因在剑尾鱼中的组织分布及在疫苗免疫后的表达规律.[方法]根据已知的EST库设计引物,利用PCR等方法获得剑尾鱼IgD基因cDNA序列并进行分析.运用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测IgD的组织分布及嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)疫苗免疫后,在头肾、脾脏和肠中的相对表达变化.[结果]剑尾鱼IgD完整开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)为3879 bp,编码1298个氨基酸,预测其分子量大小为145.5 ku;由可变区和恒定区组成,恒定区包含CH1-CH2-CH3-CH4-CH5-CH6-CH7和1个跨膜区(Transmembrane region,TM).系统进化分析显示,剑尾鱼与鳜(Siniperca chuatsi)IgD的基因序列一致性最高、为70%.IgD在剑尾鱼头肾、脾和肠中均有分布,经嗜水气单胞菌疫苗腹腔注射免疫后,IgD在头肾、脾和肠中发生差异性表达,肾和脾脏中IgD表达量显著下调,肠中IgD表达量显著上调.[结论]IgD可能在剑尾鱼机体免疫应答与肠道粘膜免疫中发挥重要作用.
关键词： 剑尾鱼;免疫球蛋白D;基因克隆;实时荧光定量PCR;免疫应答
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优质丰产番木瓜新品种紫晖的选育
《果树学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：紫晖是由泰国红×GZ201301301杂交选育出的优质、丰产番木瓜新品种。该品种植株生长旺盛,冠幅290 cm,茎干高195 cm,茎干粗45 cm,叶片长90 cm,叶片宽93 cm,叶柄呈深紫色,长102 cm。花序主轴呈深紫色,平均长约7.5 cm,花数量多。果实长椭圆形,果肩有紫色印圈,果皮橙黄色,果面光滑,果肉橙红色,厚约3.3 cm,口感嫩滑清甜。平均单果质量1 142.7 g,平均纵径21.4 cm,横径10.8 cm,纵横径比为1.98。可溶性固形物含量（w,后同）11.5%,总糖含量10%,总酸含量0.21%,维生素C含量1.01 mg·g-1,粗纤维含量0.6%,品质优良。在珠江三角洲地区,组培苗春季定植至始花时间约63 d,定植至始采时间约180 d,最低结果部位离地约34.5 cm,连续坐果能力强,节位坐果率为92.2%;丰产性强,当年平均单株产量64.4 kg,每666.7 m~2产量7728 kg。适应性良好,但感环斑花叶病毒病。常温条件下保鲜贮藏期为7 d。适宜在广东省番木瓜产区及类似生态区栽培,宜采用轮作或选择新区种植。
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UPLC-Q-TOF-MS法分析僵蛹和僵蚕化学成分差异
《中成药 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：目的 研究僵蛹和僵蚕化学成分及抗惊厥作用的差异.方法 通过UPLC-Q-TOF-MS/MS法对僵蛹和僵蚕样品进行分析,采用主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析对结果进行分析,筛选鉴定差异化学成分.通过士的宁致痫小鼠模型对僵蛹和僵蚕水提物的抗惊厥作用进行比较.结果 僵蛹和僵蚕化学成分差异显著,筛选到46种差异化学成分,其中脂类物质占31种,还包括黄酮、甜菜碱、腺嘌呤、L-左旋肉碱和胆碱等其它成分.僵蛹水提物能够延长小鼠阵发性痉挛发作潜伏期,还可以提高小鼠的死亡保护率,对士的宁致痫小鼠的治疗效果优于僵蚕.结论 该方法快速、全面地对僵蛹和僵蚕差异成分进行分析,僵蛹可以作为僵蚕的代用品使用.
关键词： 僵蛹 僵蚕 化学成分 UPLC-Q-TOF-MS
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烤烟植株磷对矿质养分转运基因表达的影响及调控途径
《植物营养与肥料学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]作物体内磷与其他矿质养分之间存在复杂的交互作用.分析不同供磷水平对作物体内养分转运相关基因(启动子中含P1BS顺式调控元件)的表达水平,从基因水平深入理解磷与其它养分间交互作用的机理.[方法]设置砂培试验,供试烟草品种为K326?(Nicotiana tabacum?L.?cv.?K326),营养液中设低磷(0.1 mmol/L)、正常(对照,1?mmol/L)和高磷(5?mmol/L)?3个磷供应水平,于烟草幼苗移栽4周后开始处理,5周后打顶,6周后取样,并分为根、茎、叶和腋芽,测定磷和其他元素浓度,鉴定启动子序列中含有磷调控顺式元件P1BS的基因,运用实时荧光定量PCR分析其中一些基因在缺磷和高磷条件下的相对表达量,采用生物学方法研究磷调控信号通路的中心转录因子NtPHR2调控钾、镁转运蛋白的途径.[结果]与对照相比,低磷和高磷处理均抑制烟株生长和地上部干物质量的积累;高磷处理植株各部位磷的积累均显著增加;地上部叶片中的钾、镁浓度随供磷水平的增加而提高,钙浓度在低磷和高磷处理下均不同程度地降低;根系中的铜、铁、锌浓度受供磷水平的影响不显著,而低磷显著降低了锰的吸收但促进锰向地上部转移.本研究在根系中共鉴定到86个含P1BS顺式调控元件的编码矿质营养转运蛋白的基因,选择其中磷、钾、钙、镁、铁、铜和锌转运蛋白基因12个进行RT-qPCR扩增分析,发现它们在低磷和高磷条件下的相对表达量不同.低磷和高磷处理均上调了磷、钾、钙、镁、铁转运蛋白基因表达量;低磷上调铜转运蛋白基因表达量而高磷下调其表达量;而两个锌转运蛋白基因一个在低磷和高磷时表达下调,另一个则表达上调.通过生物学方法证实了中心转录因子NtPHR2通过结合P1BS顺式元件直接调控钾和镁转运蛋白基因.[结论]缺磷和过量供磷均会抑制烟株生长,影响包括磷在内的养分的吸收和转运.增加磷供应水平可显著提高烟株各部位磷的浓度,提高钾和镁浓度,缺磷和过量供磷对地上部各组织其他养分浓度有负面影响.各营养元素转运蛋白基因的相对表达量受低磷和高磷的影响不同,可能与磷信号通路对其转运蛋白的调控途径有关.NtPHR2通过结合P1BS顺式元件直接调控钾和镁转运蛋白基因,因此,增加磷的供应提高了烟株磷的吸收,进而可能直接上调了钾和镁的吸收及转运.
关键词： 烟草;磷;养分转运基因;调控途径;P1BS;NtPHR2
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pOsHAK1:OsFLN2提高水稻的糖代谢水平和抗旱性
《生物技术通报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：糖的合成和转运是植物响应干旱胁迫的关键过程.利用干旱诱导的钾转运蛋白基因OsHAK1的启动子驱动OsFLN2基因的异位表达,可以在干旱胁迫下改善水稻的糖代谢水平,进而促进根系生长.pOsHAK1:OsFLN2转基因植株叶片净光合速率、蔗糖磷酸合成酶活性、韧皮部蔗糖转运速率提高,叶片、根系中的蔗糖含量分别显著减少和增加.pOsHAK1:OsFLN2转基因株系的抗旱性优于野生型(WT)水稻,与WT相比,转基因植株脯氨酸积累量较高,而脂质过氧化水平较低.进一步研究发现,干旱处理的转基因株系中胁迫响应基因显著上调,而衰老相关基因的表达量低于WT.结果表明,通过pOsHAK1:OsFLN2的表达,促进糖分代谢,有利于提高水稻的抗旱性和在干旱胁迫下的生产力.
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75株蛋鸡源沙门菌的MLST分型与耐药性分析
《畜牧兽医学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：旨在掌握2017年7月至2019年5月期间云南地区蛋鸡源沙门菌血清型、药物敏感性及毒力基因携带等基本情况.无菌采集发病鸡肝组织,共分离到沙门菌75株,对分离株进行MLST分型、药物敏感性及相关耐药基因和毒力基因检测.结果显示,MLST鉴定到ST78序列型鸡伤寒沙门菌54株(72.00%)、ST92序列型鸡白痢沙门菌21株(28.00%);分离株对青霉素的耐药率为100%,对其它抗生素的耐药率分别为:四环素26.67%、强力霉素26.67%、复方新诺明22.67%、阿莫西林18.67%、氨苄西林16.00%、恩诺沙星14.67%、链霉素8.00%、环丙沙星2.67%、庆大霉素1.33%,共存在7种耐药谱型,28.00%的菌株表现为多重耐药,且集中于鸡伤寒沙门菌;耐药基因tetA、sul2和 blaTeM 的检出率分别为26.67%、10.67%和8.00%;毒力基因 mogA、mgtC、bcf*A、araB、stn 和spvC的检出率均高达100%,而spvB的检出率为89.33%.结果表明,鸡伤寒沙门菌和鸡白痢沙门菌为云南地区蛋鸡源沙门菌主要流行血清型,多重耐药情况严重,耐药基因与毒力基因检出率较高.
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