兴凯湖翘嘴鲌(Culter alburnus)LPL基因克隆及其表达

郝其睿; 牟振波; 徐革峰; 刘斌; 韩英; 《河南农业大学学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：采用RT-PCR和RACE技术,进行兴凯湖翘嘴鲌LPL基因的克隆与表达分析,旨在为其脂肪性状的研究奠定基础.根据Genbank中已知的鲤科鱼类LPL基因序列设计引物,克隆出兴凯湖翘嘴鲌(Culter alburnus)脂蛋白酯酶(idella lipoprotein lipase,LPL)的c DNA序列;将其提交到Genbank,获得基因登陆号为KC166 231;兴凯湖翘嘴鲌LPL基因c DNA序列共1 947 bp,基因编码区序列共1 524 bp,编码一个终止密码子和507个氨基酸;通过Blast与Genbank上发表的其他物种的CDS区进行比对发现,与草鱼(Ctenopharyngodon)的同源性达到98%.采用荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测了兴凯湖翘嘴鲌野生群体和养殖群体在不同年龄、不同组织中LPL的表达量.结果表明,随年龄的增长野生群体与养殖群体LPL基因相对表达量差异增大,4龄养殖群体LPL基因相对表达量是同期野生群体的17.54倍,二者差异显著(P<0.05);LPL基因在心脏当中表达水平最高,脾和肝脏中的表达量次之.

关键词： 兴凯湖翘嘴鲌 LPL 基因克隆 组织表达

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基于分位数回归的库克群岛海域长鳍金枪鱼栖息环境综合指数

杨嘉樑; 黄洪亮; 宋利明; 饶欣; 吴越; 齐广瑞; 《中国水产科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：根据2012年9–11月在库克群岛(the Cook Islands)海域利用金枪鱼延绳钓调查所获得的共计43个站点的长鳍金枪鱼(Thunnus alalunga)渔获率数据,以及测得的温度、盐度、叶绿素浓度、水平海流及垂直海流数据等环境因子数据,采用分位数回归方法分析了各水层(40~280 m,每40 m为一层)及整个水体中各个环境因子与长鳍金枪鱼渔获率的关系,并利用43个站点内随机选择的验证站点对不同水层的研究结果进行了验证。研究结果表明:(1)长鳍金枪鱼在各水层及整个水体的单位捕捞努力量渔获量(CPUE)分布呈偏正态分布;(2)调查期间建模站点和验证站点内的预测CPUE与名义CPUE间均无显著性差异;(3)栖息地综合指数(IHI)模型的预测能力较好,且在水深40~80 m、160~200 m及整个水体范围内能有效预测长鳍金枪鱼的分布情况;(4)不同水层影响长鳍金枪鱼分布的因素不同,如在较浅水层(40~80 m)长鳍金枪鱼的渔获率与水色的的关联较大,在80~120 m水层则主要受水温的影响、在混合水层所在的120~160 m水层则主要受海流的影响,在较深的水层(160~240 m)则主要受饵料分布及水温的影响;(5)长鳍金枪鱼偏好觅食的水层应为160~240 m水层;(6)长鳍金枪鱼IHI指数分布较高的两个海域分别为13°S–15°S,162°W–167°W与11°S–12°S,161°W–167°W。建议在上述两个海域作业时,应使钓具沉降到160~240 m水层,从而在避免兼捕其他水层渔获的同时,提高长鳍金枪鱼的捕捞效率。

关键词： 长鳍金枪鱼 栖息环境综合指数 分位数回归 库克群岛 捕捞效率

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利用茎柔鱼废弃物酿制鱼露的研究

曲映红; 刘志东; 陈舜胜; 《食品工业 》 2014 北大核心

摘要：以智利外海茎柔鱼废弃物为原料,采用保温、加曲保温、加酶保温等不同速酿方法制备鱼露,测定鱼露在酿制过程中的pH和氨基酸态氮,并对最终样品作感官评价。结果表明,酿制20 d内,pH和氨基酸态氮变化显著,20 d后二者均趋于稳定。常温自然酿制鱼露中的各种变化速度较速酿鱼露缓慢得多。感官评定的结果表明,保温和加曲保温速酿的样品在气味优于加酶保温速酿的样品。对保温速酿鱼露中组胺和重金属含量测定的结果表明,其中组胺及砷、镉的含量均已超标,不适于直接作为调味品食用。

关键词： 茎柔鱼 废弃物 鱼露

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嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫后大鲵外周血免疫指标的变化

杨星; 刘文枝; 肖汉兵; 孟彦; 高正勇; 张辉; 曾令兵; 《中国水产科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：以福尔马林灭活的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)作为免疫原(F-AH),通过腹腔注射免疫健康大鲵(Andrias davidianus),分别于免疫后的第1、4、7、14、21、28天采集血液样品,进行大鲵外周血液的血细胞计数与白细胞组成分析,测定吞噬细胞的吞噬活性以及血清中和抗体效价,于免疫28 d后进行攻毒感染试验。结果表明,与对照组相比,在免疫后第4、7、14和第21天,免疫大鲵外周血中血细胞数量显著增加,其中,红细胞和白细胞数量均于第4天达峰值,分别为7.83×107个/mL和6.74×106个/mL;嗜中性粒细胞百分比也在第4天达峰值,为28.60%,单核细胞百分比在第7天达峰值,为10.53%;吞噬细胞活性显著提高,且吞噬百分比和吞噬指数均在第4天达到最高值,分别为34.09%和3.73。随后,淋巴细胞百分比和中和抗体效价显著增加,均在第21天达峰值,分别为75.30%和1︰426.67。攻毒感染实验结果表明,免疫组的相对免疫保护率为69.23%。由此可见,F-AH免疫原能够通过促进血细胞数量的增加、吞噬细胞吞噬活性增强以及特异性抗体的产生等方式提高大鲵的免疫保护力。

关键词： 嗜水气单胞菌 灭活疫苗 大鲵 血细胞数量 吞噬活性 凝集抗体效价 相对免疫保护率

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哲罗鲑、细鳞鲑及其杂交种肌肉的营养成分分析

张超; 佟广香; 匡友谊; 尹家胜; 《大连海洋大学学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：以体质量为38.03~55.03 g的哲罗鲑Hucho taimen、细鳞鲑Brachymystax lenok及其杂交种为研究对象,对其肌肉营养成分和氨基酸组成进行了分析评价。结果表明:3种鱼的粗脂肪含量差异显著(P<0.05),杂交种的水分、粗灰分含量高于哲罗鲑低于细鳞鲑,而粗蛋白质含量高于两者;杂交种的人体必需氨基酸和氨基酸总量均高于哲罗鲑和细鳞鲑,而鲜味氨基酸含量低于哲罗鲑高于细鳞鲑;3种鱼的必需氨基酸总量均高于FAO/WHO标准和鸡蛋蛋白标准,以杂交种最高;杂交种的氨基酸评分、化学评分和必需氨基酸指数均远高于哲罗鲑和细鳞鲑,以细鳞鲑最低。研究表明,3种鱼肉质鲜美,营养价值均较高,尤其是杂交种,其肌肉品质更优于哲罗鲑和细鳞鲑,这为哲罗鲑和细鳞鲑的杂交育种提供了参考。

关键词： 哲罗鲑 细鳞鲑,杂交种 营养成分 氨基酸

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传染性造血器官坏死病毒-Sn1203株的基因型及糖蛋白的生物信息学分析

徐黎明; 刘红柏; 尹家胜; 卢彤岩; 《中国水产科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：利用鲤(Cyprinus carpio)上皮细胞(epitheliaoma papulosum cyprini,EPC)培养传染性造血器官坏死病毒-Sn1203分离株(IHNV-Sn1203),根据GenBank中IHNV G蛋白基因开放阅读框(open reading frame,ORF)的序列设计引物(GenBank序列编号AB288207),采用RT-PCR的方法克隆得到IHNV-Sn1203株G蛋白全长ORF,克隆至表达载体pET27b(+)中,构建了pET27-G重组质粒,并进行了测序分析。生物信息学分析结果显示,IHNV-Sn1203株G蛋白基因序列长度为1 527 bp,与韩国株具有最高的核酸同源性(96.86%)和氨基酸同源性(97.05%)。该基因编码508个氨基酸残基,推导分子量约为56.55 kD,等电点为6.15;氨基酸序列分析表明,G蛋白富含丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸,存在28个潜在的磷酸化位点;存在4个潜在的N-糖基化位点和7个潜在的O-糖基化位点;G蛋白N端含有20个氨基酸的信号肽;亲水性大于输水性;位于483~508位氨基酸存在一跨膜区;抗原表位预测显示抗原性良好;系统进化树分析显示,IHNV-Sn1203株与日本株和韩国株聚为一簇,都属于JRt基因型。

关键词： 传染性造血器官坏死病毒 糖蛋白 生物信息学分析 IHNV基因型

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基因Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒TaqMan Real-Time PCR检测方法的建立及应用

殷亮; 王庆; 曾伟伟; 李永刚; 王英英; 刘春; 梁红茹; 石存斌; 吴淑勤; 《水产学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：为了建立和应用可检测基因Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的荧光定量检测方法,实验根据基因Ⅰ型GCRV的S6保守序列,分别设计扩增目的条带661 bp普通引物(P1、P2)、扩增目的条带159 bp荧光定量引物(F1、F2)和一条探针;同时构建含有目的片段的PVAX1-S6作为标准质粒,10倍梯度稀释构建质粒拷贝数与Ct值的标准曲线(Y=-3.389X+38.076)。结果表明,此方法在3.9×107~3.9×101拷贝/μL之间相关性较好,R2为0.992,最小检测量为4拷贝/μL;且与基因Ⅱ型、Ⅲ型GCRV以及其他病原核酸无交叉反应。运用该方法检测16份草鱼出血病疑似样品,阳性结果为4份;而普通PCR检测仅2份显示阳性。本研究建立了针对基因Ⅰ型GCRV的荧光定量检测方法,具有高效、特异、灵敏、可重复性强的优点,适合于目前基因Ⅰ型GCRV的临床快速检测和病毒定量分析。

关键词： 草鱼呼肠孤病毒 基因Ⅰ型 TaqMan Real-Time PCR 定量分析

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响应面法优化微波辅助酶解合浦珠母贝蛋白工艺

王晶; 吴燕燕; 李来好; 杨贤庆; 《食品科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：研究微波对酶解合浦珠母贝蛋白的影响,以水游离氨态氮含量和抗氧化活性为指标,选择较好的作用酶,通过单因素试验确定料液比、加酶量(E/S)、微波温度、微波功率及时间和后续水浴时间等因素水平,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,响应面法优化酶解合浦珠母贝蛋白工艺条件。结果表明,微波辅助蛋白酶酶解合浦珠母贝蛋白工艺条件为微波温度58℃、微波功率300 W、微波时间17 min、加酶量5 000 U/g,后续在58℃条件下再水浴1.5 h。预测响应值为0.224 4,水解度达到26.15%,验证实验证明与响应优化模型预测值误差不大,二次多元拟合度较好。

关键词： 合浦珠母贝蛋白 微波辅助酶解 抗氧化活性 响应面法

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虾蟹高效益生态双主养技术

叶金明; 王如愿; 姜增华; 胡庚东; 《科学养鱼 》 2014 北大核心

摘要：2013年,我们在罗氏沼虾主产区江苏省高邮市开展了罗氏沼虾与河蟹混养的养殖试验(省水产三新工程项目),结果表明,采用罗氏沼虾与河蟹混养的生态养殖模式,在基本不影响罗氏沼虾产量的前提下,收获了一定产量的河蟹,同时改善了养殖环境,提高了养殖池塘的经济效益。一、养殖方法1.试验池塘试验在高邮市三垛镇渔业科技示范户秦红朋的塘口进行实施,塘口面积26.5亩。2.试验方法(1)苗种放养:试验池塘3月19日放养扣蟹1.4

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菲律宾蛤仔两种谷氧还蛋白基因对微生物侵染和重金属胁迫的应答

张林宝; 孙伟; 蔡文贵; 贾晓平; 《中国水产科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：研究了菲律宾蛤仔(Venerupis philippinarum)两种谷氧还蛋白Vp Grx1和Vp Grx2 m RNA在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)和重金属镉(Cd)作用下的表达调控规律。结果表明,正常菲律宾蛤仔Vp Grx1和Vp Grx2在所检测组织中均有表达,其中Vp Grx1在鳃中的表达量最高,而Vp Grx2在蛤仔血淋巴细胞、鳃和肝胰腺中的表达量均较高。鳗弧菌和藤黄微球菌侵染在某些时段可显著诱导Vp Grx1和Vp Grx2基因的表达水平(P<0.05)。另外,0.8μg/L、8μg/L和80μg/L Cd处理30 d后,菲律宾蛤仔肝胰腺中Vp Grx1和Vp Grx2基因转录水平显著升高(P<0.05),血淋巴细胞中Vp Grx1基因表达被显著抑制(P<0.05)而Vp Grx2基因表达被显著诱导(P<0.05)。以上结果表明,Vp Grx1和Vp Grx2在菲律宾蛤仔的固有免疫反应和抗氧化胁迫中发挥着重要作用。

关键词： 菲律宾蛤仔 谷氧还蛋白 微生物侵染 Cd 基因表达

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