科研产出
棉花脂肪酸合成酶基因GhKAR和GhENR表达载体构建及其功能初探
《棉花学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:酮脂酰ACP还原酶(β-ketoacyl-(ACP)reductase,KAR)和烯脂酰ACP还原酶(β-enoyl-(ACP)reductase,ENR)是脂肪酸合成过程中2个关键的还原酶,主要负责脂肪酸碳链的延伸。为明确棉花同源基因的功能,克隆了陆地棉Gh KAR和Gh ENR基因,并构建表达载体;应用花粉管通道法转化棉花,经过PCR检测和Southern杂交,筛选出阳性单拷贝植株,分析其后代株系中目的基因对油分含量以及抗寒性的影响。通过对转基因T4株系含油量的测定,发现转基因株系种子的含油量比野生型对照提高10.2%~14.1%,与对照差异极显著。通过气相色谱法分析转基因株系种子的脂肪酸成分,发现不饱和脂肪酸含量比野生型对照增加4.04%~6.02%。测定4℃低温胁迫下各个转基因株系不同时间生理指标的变化,结果表明:转基因株系的相对电导率和脯氨酸含量积累明显高于对照,而丙二醛含量低于对照,在不同胁迫时间与对照表现出显著或极显著差异,过表达的转基因株系的抗寒性有所提高。


利用高温发酵菌糠研制水稻育秧基质
《中国农业大学学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:将经高温发酵处理后的杏鲍菇菌糠与土壤按照比例进行配比制作水稻育秧基质,分析不同配比的水稻育秧基质的理化性质,比较研究水稻秧苗的秧苗素质、根系性状和营养吸收情况等。结果表明添加高温发酵腐熟的杏鲍菇菌糠对育秧基质的容重、总孔隙度、通气孔隙和持水孔隙具有改善作用,随着菌糠添加量的增加,容重逐渐减少,总孔隙度、通气孔隙和持水孔隙逐渐增加。水稻秧苗的株高、叶绿素含量、秧苗地上部百株干重、根的百株干重、根系活力和水稻秧苗的氮、磷、钾含量水平均优于100%土壤和100%菌糠,其中V(土壤)∶V(菌糠)为20%∶80%的基质配比更有利于水稻壮秧、干物质积累、根系生长发育和对氮、磷、钾的吸收。


中国砂梨多倍体种质资源发掘及其花粉育性分析
《果树学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:【目的】发掘中国砂梨种质资源中蕴藏的多倍体种质,明晰中国砂梨基于染色体水平的多样性,为砂梨多倍体育种和起源进化等研究提供依据。【方法】采用流式细胞术较为系统全面地对国家果树种质武昌砂梨圃中收集保存的466份砂梨种质进行倍性鉴定,并对新发掘的多倍体砂梨种质进行花粉生活力和自交结实率分析。【结果】共发掘出多倍体砂梨种质5份且均为三倍体,占总样本的1.07%,显示中国砂梨种内基于染色体的多样性水平较低。三倍体种质的花粉生活力和自交结实率均为0,显示其花粉不育且无单性结实能力。【结论】首次将流式细胞仪成功地用于中国砂梨种质资源的染色体倍性分析,发掘出的5份三倍体种质中,有3份自然三倍体集中分布于鄂西恩施的秦巴山区和武陵山区结合部,暗示该区域或为砂梨的起源演化中心之一。花粉育性分析结果可为其在多倍体育种等研究中的应用提供参考。


CRISPR/Cas9系统及其在家蚕基因组编辑中的应用
《蚕业科学 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:CRISPR/Cas9系统源于细菌获得性免疫系统,是一项可对多个物种的基因组进行高效率编辑的技术,已被广泛用于RNA靶向的基因组定向编辑。本文简要介绍了CRISPR/Cas9系统的基本作用原理和技术改进的进展,重点介绍了CRISPR/Cas9系统在家蚕功能基因研究和定向遗传改造研究中的应用及成果,并展望了该项技术在家蚕基因组编辑中应用的前景和主要的发展方向。
关键词: 基因组编辑 CRISPR/Cas9系统 家蚕 定点突变


湖北省水稻区试两系不育系指纹图谱构建及遗传相似性分析
《分子植物育种 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:为评价2015年湖北省水稻区试两系不育系材料的遗传相似性并构建其指纹图谱,利用48个SSR分子标记对15份参试品种及6个代表性对照品种进行分析,筛选出12对扩增稳定、多态性好并分布均匀的SSR引物,共检测到47个等位基因(Na),每个标记平均检测到3.9个,每标记多态性信息含量(PIC)平均值为0.64,利用这12个引物为核心标记构建了供试材料的指纹图谱;聚类分析结果表明,15份参试品种与6个对照品种在相似系数0.66左右分为6个类群,其中6个品种与广占63-4S均归于三类群,占参试品种的40%,此外,四类群的3个品种还与三类群同属一个亚类群;其余6个品种分别与Y58S、农垦58S以及珍汕97A归于同一类群。因此,聚类分析结果表明参试品种表现出了背景来源单一、亲缘关系较近的趋势。本研究结果有助于湖北省水稻两系不育系资源利用、创新与引进,持续提高水稻育种水平。


噻虫嗪对B型烟粉虱抗性种群取食行为的影响
《植物保护学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是一类全球广泛分布的农业害虫,由至少24个生物型组成,其中B和Q型烟粉虱入侵性最强、为害最重。目前,化学防治仍是防治烟粉虱的主要手段,吡虫啉、噻虫嗪等新烟碱类药剂因杀虫效果好、持效期长而成为防治该虫的重要药剂。但是大量持续使用药剂易导
鸭I-FABP基因的克隆、组织表达模式及功能研究
《畜牧兽医学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:本研究旨在探讨鸭I-FABP基因的结构与功能。本试验以绍兴麻鸭为研究材料,运用RACE、RT-PCR方法扩增鸭I-FABP基因mRNA全序列,运用qRT-PCR方法检测该基因在小肠不同区段的表达特性,运用siRNA干扰、qRT-PCR分析其功能。结果表明,鸭I-FABP基因共编码132个氨基酸,在不同物种间保守性较高,且在第60位氨基酸处发现一个Ile/Thr的突变位点;I-FABP在空肠前半段和十二指肠中表达量较高,与微粒体甘油三酯转移蛋白(Microsomal triglyceride transferprotein,MTTP)和载脂蛋白B(Apolipoprotein B,ApoB)基因在小肠不同肠段具有相似的表达变化情况,而与肝脏型脂肪酸结合蛋白基因(Liver fatty acid binding protein,L-FABP)存在差异;干扰I-FABP基因表达后,MTTP和ApoB基因的表达量显著降低,而L-FABP未发生显著变化。该结果预示了I-FABP基因在鸭的小肠脂肪酸吸收与转运通路中的重要作用,也为该基因的深入研究奠定了基础。


陆地棉盐胁迫应答基因GhWRKY41的克隆与分析
《中国农业大学学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:为研究转录因子GhWRKY41在陆地棉盐胁迫应答过程中的作用,基于差减文库分析结果,利用RT-PCR和RACE技术,克隆了GhWRKY41基因(GenBank登录号为HM002635)。该基因cDNA长度为1 630bp,含有ORF(Open reading frame)为1 068bp,编码355个氨基酸的多肽,包含2个内含子。通过瞬时表达分析亚细胞定位,结果表明,转录因子GhWRKY41定位于细胞核,符合转录因子特性。转基因株系发芽试验结果表明,过量表达GhWRKY41基因,可显著提高转基因棉花在干旱、盐和低温胁迫下的发芽率;利用Real-time PCR技术,证明在盐和干旱胁迫条件下,转基因株系中GhWRKY41基因的表达量显著上升。GhWRKY41基因在根、茎和叶片中表达存在差异,根系中胁迫6h上调达到最高,茎中则胁迫48h达到最高,而叶片中仅6和24h上调表达。进一步比较转基因棉花与野生型棉花的纤维品质性状,结果表明GhWRKY41的过表达可以提高转基因棉花的衣分。因此,GhWRKY41参与了棉花响应盐和干旱胁迫应答过程,且过表达可提高转基因棉花耐盐性和耐旱性。
关键词: 陆地棉 GhWRKY41 盐胁迫 表达分析 发芽率

