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鹅细小病毒LH株的纯化及其生物学特性

文献类型： 中文期刊

作者： 刘宇卓 1 ; 刘飞 2 ; 李银 1 ; 黄欣梅 1 ; 赵冬敏 1 ; 韩凯凯 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心

2.南京农业大学动物医学院

关键词： 鹅细小病毒;蔗糖密度梯度;纯化;生物学特性

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2013 年 41 卷 05 期

页码： 156-158

收录情况： 北大核心

摘要： 取鹅细小病毒(GPV)LH株毒液,通过氯仿去除杂蛋白,用氯化钠与聚乙二醇-6000相结合方法粗提后,经蔗糖密度梯度离心纯化。通过PCR方法对不同浓度蔗糖溶液进行检测,取纯化毒液进行蛋白电泳及电镜观察,并无菌接种12日龄鹅胚,对死亡胚尿囊液进行PCR鉴定。试验结果显示:浓缩纯化后的GPV主要分布在50%～65%蔗糖浓度区间,病毒的蛋白含量为216μg/L;电镜观察结果表明,病毒粒子分为实心和空心2种,直径大小在20～22 nm;经SDS-PAGE电泳可看到多个条带,主要蛋白大小与病毒蛋白VP1、VP2和VP3相对应。纯化后的病毒接种敏感鹅胚仍可致其100%死亡,死亡胚具有特征性的病变,尿囊液经PCR鉴定,呈GPV核酸阳性。本试验所用方法获得的纯化GPV病毒液的纯度高且保持了该病毒的毒力特性,是一种方便可行的纯化该病毒的方法。

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