文献类型： 中文期刊
作者： 郝变青 1 ; 马利平 2 ; 乔雄梧 2 ; 张丽珍 3 ;
作者机构： 1.山西省农业科学院山西省农药重点实验室
2.山西省农业科学院植物保护研究所
3.山西大学生命科学学院
关键词： 拮抗菌;绿色荧光蛋白;启动子;克隆
期刊名称： 安徽农业科学
ISSN： 0517-6611
年卷期： 2009 年 37 卷 16 期
页码： 85-86+93
收录情况： 北大核心
摘要： [目的]构建拮抗菌B96-Ⅱ的启动子文库,为B96-Ⅱ的绿色荧光蛋白标记提供试验基础。[方法]提取拮抗菌B96-Ⅱ的基因组DNA,以绿色荧光蛋白基因(gfp)为报告基因,以启动子探针pNW33N-gfp为载体,通过鸟枪法在E.coliDH5α中构建B96-Ⅱ的启动子文库。[结果]通过筛选获得了21个阳性克隆,编号为P1~P21,这些阳性克隆在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光。研究表明,在热激时间为90 s、用4μl酶连产物原液进行转化时,所得转化子数量最多,平均每平皿可得到167个转化子。[结论]表达绿色荧光蛋白的B96-Ⅱ启动子文库的成功构建为拮抗菌B96-Ⅱ的绿色荧光蛋白标记和环境行为研究奠定了良好的基础。
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