科研产出
五指山猪MYH基因家族结构变异对背最长肌肌纤维性状的影响
《畜牧兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：旨在通过探究五指山猪背最长肌MYH基因家族结构变异(SVs)对背最长肌肌纤维性状的影响，为深入理解肌纤维生长规律和分子机制提供基础。研究对象为五指山猪，采用大白猪作为对照组。屠宰前一周将3头五指山猪(4月龄母猪，平均体重14.2 kg)和3头大白猪(4月龄母猪，平均体重58.0 kg)饲养在相同的环境中，饲喂充足的食物和水，所有猪饥饿处理24 h之后屠宰。采集6头猪背最长肌组织，提取完整DNA,PacBio平台建库测序，每个样本测序大约40 Gb,测序数据与参考基因组(Sscrofa 11.1)比对，使用Sniffles和PBSV软件的默认参数检测SVs,过滤条件：50 bp≤SVs≤10 kb;提取每头猪背最长肌总RNA,转录组测序，计算基因表达量；统计五指山猪和大白猪SVs在染色体上分布位置和数目，比较五指山猪相对于大白猪SVs差异，筛选五指山猪特异性SVs,构建五指山猪MYH基因家族系统发育树，预测结构域，分析MYH基因表达量与肌纤维指标相关性。结果表明：1)五指山猪共有7个特异性MYH基因，主要分布在第3、5、6、12、13号染色体，第12号染色体包含3个MYH基因；2)系统进化树显示，五指山猪7个MYH基因分化为2个分支，分别编码非肌肉肌球蛋白和肌肉肌球蛋白，MYH9与MYH11基因、MYH1与MYH4基因同源性最高；7个MYH基因都包含结构域Motor domain, 5个MYH基因包含结构域Myosin-N,MYH基因头部结构域(Myosin-N和Motor domain)相对保守，中间和尾部结构域差异较大；其中五指山猪MYH1、MYH4和MYH9基因包含SVs而大白猪没有SVs,皮尔森系数统计表明，MYH基因是否包含SVs可能与基因表达量相关；综合转录组测序和Q-PCR试验，检测这3个MYH基因的表达量与肌纤维指标相关性，MYH1基因表达量与肌纤维密度和数量正相关，MYH4基因表达量与肌纤维密度和数量负相关，MYH9基因表达量与肌纤维密度负相关，与直径正相关。综上所述，五指山猪第12号染色体上特异性MYH基因最多；MYH基因家族主要分化为非肌肉肌球蛋白和肌肉肌球蛋白2个分支；MYH蛋白头部结构域相对保守，中间和尾部结构域差异可能是造成MYH基因家族分化的主要原因；MYH1、MYH4和MYH9基因表达量均与肌纤维密度相关，可能通过调控背最长肌肌纤维密度影响肌肉生长发育。本研究不仅扩展了肌纤维生长发育的分子机制相关内容，也为优化结构变异有关的遗传育种模式提供借鉴。
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早期断奶对五指山猪仔猪肠道免疫指标及氨基酸转运载体基因表达的影响
《华北农学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：旨在探明五指山猪断奶后仔猪肠道的应激变化以及对肠道黏膜AA转运载体表达量的影响。共用五指山仔猪24头，分别在断奶0天、断奶后第3,7,10天进行屠宰，并收集仔猪血清、小肠肠段和黏膜。测定其血液免疫指标、小肠形态学和肠道黏膜AA转运载体相关基因表达量。结果表明：与断奶前相比，断奶后第3天肠绒毛断裂稀疏，十二指肠和回肠绒毛高降低，空肠和回肠绒毛表面积的变化差异显著。断奶后第7天后绒毛高等数值均有好转；血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白和葡萄糖含量在断奶后显著降低，天门冬氨酸氨基转移酶、总胆固醇、乳酸脱氢酶和天门冬氨酸氨基转移酶含量差异显著；断奶后血清中二胺氧化酶、D-乳酸和脂多糖变化显著；断奶后小肽转运载体PepT1相对表达丰度按照十二指肠、空肠和回肠的顺序依次进行增加，酸性AA转运载体EAAT3相对表达丰度在肠道中不显著，中性AA转运载体B0AT1、ASCT2和rBAT在空肠以及回肠中的相对表达量更高，碱性AA转运载体CAT1、y+LAT1和4F2hc,在断奶后十二指肠的表达量降低，载体在回肠的表达中相对更加稳定。综上所述，早期断奶应激引起五指山仔猪绒毛缩短和隐窝增生等明显肠道变化，血液免疫蛋白及二胺氧化酶、D-乳酸和脂多糖等含量降低，同时肠道AA转运载体表达量变化，尤其断奶后第3天各项指标变化明显，但随着断奶日龄增长至第10天逐渐恢复，仔猪免疫力增强，肠道黏膜通透性增加。
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橘小实蝇对高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素的交互抗性
《昆虫学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]目前化学防治是果树重大害虫橘小实蝇Bactrocera dorsalis的主要防治措施.本研究旨在明确橘小实蝇高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素抗性品系成虫对高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素3种杀虫剂的抗性,分别对其他2种杀虫剂的交互抗性及其抗性遗传规律,为果园轮换用药开展防治和抗性治理等工作提供理论支持.[方法]从野外采集橘小实蝇幼虫,在实验室内饲养52代以上,应用药膜法测定成虫对杀虫剂的敏感度;采用群体筛选法逐代抗性汰选至52代,建立橘小实蝇抗药性品系;采用药膜法测定橘小实蝇高效氯氰菊酯抗性品系、敌百虫抗性品系和阿维菌素抗性品系成虫分别对另外2种杀虫剂的交互抗性水平;将高效氯氰菊酯抗性品系、敌百虫抗性品系和阿维菌素抗性品系成虫进行正反两两杂交,通过对各杂交处理F1代成虫进行生物测定以判定抗性遗传规律.[结果]研究发现橘小实蝇高效氯氰菊酯、抗敌百虫和阿维菌素抗性品系成虫分别对另外两种杀虫剂均存在一定程度的交互抗性.其中,高效氯氰菊酯抗性品系成虫对敌百虫存在中等水平的交互抗性,抗性倍数(resistance multiple,Rm)为15.61;对阿维菌素则为低水平交互抗性,Rm为6.67;敌百虫和阿维菌素对高效氯氰菊酯抗性品系成虫的致死中浓度(median lethal concentration,LC50)值分别为54.58和25.30 mg/L.敌百虫抗性品系成虫对高效氯氰菊酯和阿维菌素均存在低水平交互抗性,Rm分别为9.15和6.18;高效氯氰菊酯和阿维菌素对敌百虫抗性品系成虫的LC50值分别为43.12和23.35 mg/L.阿维菌素抗性品系成虫对高效氯氰菊酯和敌百虫同样存在低水平交互抗性,Rm分别为8.74和3.58;高效氯氰菊酯和敌百虫对阿维菌素抗性品系的LC50值分别为41.18和12.52 mg/L.橘小实蝇高效氯氰菊酯抗性品系与敌百虫抗性品系进行正反交时其F1代成虫的抗性衰退率分别为33.52%和56.42%,与阿维菌素抗性品系正反交时其F1代成虫抗性衰退率分别为8.49%和84.25%.敌百虫抗性品系与高效氯氰菊酯抗性品系正反交时其F1代成虫的抗性衰退率分别为21.41%和81.47%,与阿维菌素抗性品系正反交时F1代成虫的抗性衰退率则为38.00%和79.00%.阿维菌素抗性品系与高效氯氰菊酯抗性品系、敌百虫抗性品系正交时F1代成虫的抗性衰退率分别为3.62%和12.77%,与亲本相比变化不大;反交时F1代成虫的抗性衰退率分别为65.45%和62.29%.[结论]橘小实蝇高效氯氰菊酯抗性品系对敌百虫存在中等水平的交互抗性,对阿维菌素则为低水平交互抗性;敌百虫抗性品系对高效氯氰菊酯和阿维菌素均存在低水平交互抗性;阿维菌素抗性品系对高效氯氰菊酯和敌百虫同样存在低水平交互杭性.橘小实蝇对高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素的抗性遗传明显偏向母系遗传规律.本研究测定和明确了橘小实蝇高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素抗性品系对高效氯氰菊酯、敌百虫和阿维菌素3种杀虫剂的抗性水平、分别对其他2种杀虫剂的交互抗性水平及抗性遗传规律,对延缓该虫抗药性、指导田间杀虫剂使用提供了理论依据,对抗药性治理工作具有实践指导意义.
关键词： 橘小实蝇 高效氯氰菊酯 敌百虫 阿维菌素 交互抗性
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不同养殖模式的文昌鸡生产性能及经济效益比较研究
《中国畜牧杂志 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了研究不同养殖模式对文昌鸡生产和经济效益的影响,为文昌鸡现代集约化生产模式推广提供参考依据,本研究对 2 种养殖模式下的文昌鸡生产性能及经济效益进行比较分析.试验选取 15 000 只健康文昌鸡母雏,育雏期结束后随机分为 2 组,A组采用传统"放养+育肥"养殖模式,B组采用集约化笼养模式,每组设 3 个重复.饲养至 115 日龄时,测定并对比 2 种模式下文昌鸡母鸡生产性能、肌肉品质,并分析产生的经济效益.结果表明:B组的成活率、出栏体重、腹脂率高于A组(P<0.05),耗料增重比低于A组(P<0.05);B组肌肉红度值、天门冬氨酸含量虽然低于A组(P<0.05),但肌肉滴水损失和肌内脂肪含量高于A组(P<0.05),肌肉品质总体差别不大.由于人工成本低、鸡成活率和出栏体重高,B组生产成本明显低于A组,且每只文昌鸡能够增加 6.32 元利润.综合以上结果可以得出,集约化笼养模式能够降低文昌鸡生产成本,且对肌肉品质风味影响不大,能大幅度提高养殖成活率和经济效益,可在生产中推广应用.
关键词： 文昌鸡 传统养殖 集约化笼养 生产性能 肉品质 经济效益
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龙眼花色素苷生物合成相关基因DlCHS9的序列与功能分析
《热带作物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：查尔酮合成酶（chalcone synthase, CHS）是植物类黄酮化合物合成途径的第一个关键酶。前期在龙眼（Dimocarpus longanLour.）中鉴定了与花色素苷合成密切相关的DlCHS9，发现与红皮龙眼相比，其在石硖龙眼果皮中的表达水平较低。为了进一步探究DlCHS9的生物学功能，本研究分别克隆石硖龙眼DlCHS9-SX和红皮龙眼DlCHS9-HP基因，氨基酸序列比对分析发现，二者仅在第328位氨基酸位点有差异，但该位点并不是关键酶活性位点。进一步构建植物表达载体，并采用农杆菌介导的叶盘法将DlCHS9-SX转入烟草。结果表明，转基因烟草花瓣更红，花色素苷含量更高，说明DlCHS9-SX超表达能促进烟草花瓣花色素苷的积累。分析DlCHS9的启动子序列表明，相似度为96.2%，与DlCHS9-HP的启动子相比，DlCHS9-SX的启动子有32个SNP、14个碱基插入和12个碱基删除，多1个脱落酸响应元件（ABRE），少1个光反应元件（Box4）、1个低温响应元件（LTR）和1个MYC转录因子结合元件。综上所述，DlCHS9-SX是石硖龙眼花色素苷合成的关键结构基因之一，而其启动子序列与红皮龙眼差异较大，可能是其在石硖果皮中表达较低的重要原因之一。
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特早熟荔枝"科技一号"在海南陵水的引种表现
《中国南方果树 》 2024 北大核心
摘要：为进一步优化海南荔枝品种结构，充分发挥海南荔枝产区早熟优势，选育和推广早熟荔枝品种，2018年通过高接换种方式在海南省陵水县引种“科技一号”荔枝，以特早熟荔枝“桂早荔”为对照，比较分析两个品种在海南省陵水县的植物学性状、物候期、经济性状以及抗逆性等。结果表明，“科技一号”荔枝果实椭圆形，果皮暗红色，平均单果质量19.4 g,果形指数1.05,平均可溶性固形物含量16.2%,平均可食率63%,部分种子焦核，成熟期2月下旬至3月中旬，比同区域“桂早荔”早15 d左右，是适宜在海南适度种植推广的特早熟荔枝。
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海南岛越南油茶种质CdS-RNase基因及其编码蛋白的多样性分析
《中南林业科技大学学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]为了分析海南岛本地越南油茶种质中CdS-RNase基因及其编码蛋白的多样性,探索CdS-RNase蛋白类型与越南油茶自交坐果率之间的关系,为依据CdS-RNase蛋白类型合理搭配越南油茶田间种质和提高越南油茶坐果率,提供科学参考.[方法]选取60 份海南岛本地越南油茶种质,以其花柱cDNA为模板,RT-RCR特异扩增CdS-RNase基因序列.琼脂糖凝胶电泳检测和切胶回收CdS-RNase基因特异性扩增条带,并把特异性扩增条带连接到平末端测序载体上.将测序载体转化到大肠杆菌感受态细胞中,用带有卡那霉素抗性的LB固体培养基筛选阳性单克隆,测序得到CdS-RNase基因序列.随后,60份越南油茶种质与"CV1"~"CV18"的CdS-RNase基因序列一起用于基因单体型划分、单体型聚类分析、获得CdS-RNase蛋白氨基酸序列、CdS-RNase蛋白分型、CdS-RNase蛋白二级结构预测等.最后,根据越南油茶种质中CdS-RNase蛋白类型,把越南油茶种质划分为三类:类型I,只检测到正常CdS-RNase蛋白;类型II,同时检测到正常CdS-RNase和突变CdSm-RNase蛋白;类型III,只检测到CdSm-RNase蛋白.每类越南油茶种质挑选5份,开展自交坐果率统计试验.[结果]78 份海南岛本地越南油茶种质中共鉴定到 171 个CdS-RNase基因单体型(Hap1~Hap171),编码 35种正常CdS-RNase蛋白(CdS1-RNase~CdS35-RNase)和 22 种突变CdSm-RNase蛋白(CdSm1-RNase~CdSm22-RNase).正常CdS-RNase蛋白和突变CdSm-RNase蛋白二级结构中α-螺旋比例差异不显著,但是突变CdSm-RNase蛋白二级结构中β-转角和β-折叠的比例极显著或显著高于正常CdS-RNase蛋白,无规则卷曲比例显著低于正常CdS-RNase蛋白.类型I越南油茶种质自交坐果率显著低于类型II,类型II越南油茶种质自交坐果率显著低于类型III.[结论]海南岛本地越南油茶种质CdS-RNase基因及其编码蛋白多样性丰富,突变CdSm-RNase蛋白可能通过增加其二级结构中β-转角和β-折叠的比例减少无规则卷曲比例影响其蛋白功能的发挥,突变CdSm-RNase蛋白能一定程度上提高越南油茶自交坐果率.
关键词： 海南岛 越南油茶 自交不亲和 CdS-RNase基因 CdS-RNase蛋白 多样性分析
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龙眼及其制品中44种真菌毒素高通量检测方法的建立及其膳食暴露风险评估
《现代食品科技 》 2024 北大核心
摘要：建立基于UPLC-MS/MS测定龙眼及其制品中44种真菌毒素的高通量检测方法。样品经80%乙腈水溶液（V/V，含1%乙酸）提取，PSA和C18净化。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱分离，以φ=0.2%甲酸（Formic Acid, FA）-乙腈和水-乙腈为流动相进行梯度洗脱，在正负离子多反应监测模式下内标法定量。结果表明，44种真菌毒素线性关系均良好，R2≥0.990 41，检出限为0.003～0.7μg/kg，定量限为0.01～2.0μg/kg；方法的精密度RSD（n=6）为0.7%～9.7%，低、中、高3个添加水平的回收率为70.7%～123.6%。通过对市售17批次龙眼及其制品中44种真菌毒素进行检测，阳性率为100%，其中15-ADON、Fus X、PAT、Te A等含量较高，说明在龙眼生长、贮藏及加工过程中，这4类真菌毒素为主要污染毒素。采用风险商（Hazard Quotient, HQ）进行膳食暴露风险评估，评估结果显示，21种真菌毒素的风险商值HQ为0～0.012 37，均低于1，说明没有风险，对人体健康威胁性较小。
关键词： 超高效液相色谱-串联质谱 真菌毒素 检测 膳食暴露风险评估
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外源CPPU抑制'妃子笑'荔枝果实着色过程的基因表达分析
《分子植物育种 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了探究花青苷和叶绿素相关结构基因与‘妃子笑’荔枝果皮着色的关系，本研究首先基于基因组数据鉴定了花青苷和叶绿素相关结构基因，然后分析了其在外源CPPU抑制‘妃子笑’荔枝着色过程的表达及对应酶活性。结果显示，花青苷合成关键酶UFGT，叶绿素降解途径NYC/NOL、MDcase以及PAO酶活性明显受到抑制，叶绿素合成途径CS和CAO及Chlase酶活性明显增加。转录组测序和RT-qPCR结果表明，外源CPPU显著抑制了花青苷合成途径结构基因LcPAL1、LcPAL3、LcC4H1、Lc4CL2、Lc4CL3、Lc4CL4、LcCHS2、LcCHS5、LcCHI、LcF3H/LcF3'H、LcDFR2、LcANS1、LcUFGT2、LcUFGT3，和叶绿素降解途径结构基因LcSGR2、LcPPH和LcPAO的表达；促进叶绿素合成相关途径基因LcHEMA、LcHEMD、LcCHLH1、LcCHLH2和LcCAO的表达，同时抑制转录因子基因LcMYB3、LcMYB4和LcWRKY3的表达。因此，推测外源CPPU可能通过抑制花青苷合成和叶绿素降解相关基因表达及酶活性，促进叶绿素合成相关基因的表达及酶活性，使‘妃子笑’荔枝果皮中花青苷与叶绿素比值在最佳可食期偏低而不能完全着色。研究结果为解决‘妃子笑’荔枝“滞绿”问题提供理论依据，也可为植物色泽问题的研究提供参考。
关键词： 荔枝(Litchi chinensis Sonn.) CPPU 着色 酶活性 基因表达
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沉香叶黄酮对油酸诱导HepG2细胞脂质代谢的影响
《食品科技 》 2024 北大核心
摘要：文章研究了沉香叶黄酮对油酸诱导HepG2细胞脂质代谢的影响。采用水溶性四唑盐法检测细胞增殖率，利用试剂盒检测细胞内脂质生成相关因子水平，包括甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total cholesterol, TC)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)；同时检测氧化应激相关因子水平，如活性氧(Reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽(Glutathione, GSH)、过氧化氢酶(Catalase, CAT)水平。结果表明：沉香叶黄酮可以减少油酸诱导的Hep G2细胞内TG、TC、LDL-C、MDA、ROS释放水平，促进HDL-C释放，提高SOD、GSH、CAT活性。沉香叶黄酮可以缓解油酸诱导的HepG2细胞脂质代谢紊乱，其作用可能与调节细胞脂质代谢、清除活性氧、提高抗氧化酶活性有关。
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