科研产出
大口黑鲈amh基因全长cDNA克隆、表达及多克隆抗体制备
《水生生物学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为研究大口黑鲈（Micropterus salmoides）抗缪勒氏管激素（amh）基因的表达及其在性腺发育中的潜在作用,研究利用RACE技术克隆得到了大口黑鲈amh基因,并制备Amh多克隆抗体,通过qRT-PCR、Western Blot分析Amh在大口黑鲈不同组织和不同发育阶段性腺中的表达模式,最后利用HE染色法和免疫组化观察不同发育阶段性腺的形态组织学变化及其与Amh表达的潜在关系。结果显示:大口黑鲈amh基因cDNA序列全长2050 bp,由24 bp5′非编码区、394 bp3′非编码区和1632 bp的开放阅读框组成,共编码543个氨基酸。amh基因mRNA在大口黑鲈11个组织中均有表达,其中雄鱼精巢中表达量最高,肌肉次之,雌鱼卵巢中表达量最高,肌肉次之。amh基因在雌雄鱼不同发育阶段的性腺中表达存在显著差异,精巢中表达量均显著高于卵巢（P＜0.05）。同时, Western Blot结果显示Amh蛋白在精巢中表达丰度较高。amh基因在精巢中的表达量呈先上升后下降的趋势,且在孵化后65d鱼精巢中其表达量达到最高（P＜0.05）,免疫组化结果显示Amh表达于早期精巢的支持细胞;孵化后135d和215d雄鱼精巢中其表达量明显下降, HE染色显示雄鱼精巢处于精子细胞生成和精子形变期, Amh主要表达于支持细胞中,精子占据精巢的绝大部分空间,支持细胞所占面积比例减少。amh基因在孵化后45d、65d和135d雌鱼卵巢中表达量较低,孵化后215d表达量上升,并且在卵母细胞的细胞膜边缘及外周的滤泡细胞和颗粒细胞检测到了Amh阳性信号。研究结果表明:在精巢中, Amh可能参与早期精巢发育;在卵巢中,其可能参与颗粒细胞和滤泡细胞发育。综上所述, Amh在大口黑鲈性腺发育中发挥着关键的调控作用。
关键词： amh 基因克隆 组织表达 多克隆抗体 性腺发育 大口黑鲈
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基于帧间深度特征差分的大西洋鲑鱼群活跃度分类模型
《农业机械学报 》 2023 EI 北大核心 CSCD
摘要：鱼群活跃度是鱼类健康福利养殖的特征性指标之一，实现鱼群活跃度细粒度分类有利于更精细地描述鱼群健康状况、评估鱼群福利水平。基于工厂化循环水养殖系统，本文建立了水下大西洋鲑鱼群活跃度细粒度分类视频数据集，并提出一种基于帧间深度特征差分的鱼群活跃度分类模型，通过引入残差连接的小型卷积神经网络提取视频帧的特征，进而在相邻帧之间做差分运算和平方运算得到视频帧间特征，最后将其输入基于外部注意力机制的分类网络IFDNet中得到视频类别。试验结果表明，本文提出的CNN-IFDNet模型分类准确率达到97.72%,F1值达到97.42%,以较低的计算复杂度实现了对水下视频鱼群活跃度的三分类。相较于实验室环境，基于真实养殖环境对鱼群活跃度所展开的算法研究实际应用性更强，可以为精细化描述鱼群的活跃度、实现智能监测鱼类健康状况提供参考，帮助养殖人员发现并排除导致鱼群活跃度异常的水质环境、病害等因素。
关键词： 鱼类健康福利养殖 鱼群活跃度 分类模型 视频分类 深度特征
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不同致死条件对冷鲜石斑鱼肉品质的影响
《上海海洋大学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为明确致死条件对石斑鱼（Epinephelus lanceolatus）品质的影响，提高石斑鱼冷藏期间的品质，采用5种不同致死方式处理石斑鱼，Ⅰ:冰埋致死；Ⅱ:敲击头部致死；Ⅲ:活石斑鱼经温度梯度18、14、10、6℃（每个温度处理20 min）处理后致死；Ⅳ:活石斑鱼经温度梯度18、12、6℃（每个温度处理20 min）处理后致死;Ⅴ:活石斑鱼经温度梯度18、6℃（每个温度处理20 min）处理后致死，然后将石斑鱼经微冻机迅速将鱼体中心温度降到0℃,于0～4℃冷藏，测定并分析冷藏期间鱼肉的感官评价、质构特性、pH、乳酸含量、巯基含量、挥发性盐基氮（TVB-N）、菌落总数等品质评价指标的变化。结果表明，5组致死处理方式对冷藏期间鱼肉的品质影响显著，由大到小依次是感官评价和TVB-N:Ⅴ组＞Ⅰ组＞Ⅱ组＞Ⅳ组＞Ⅲ组，质构：Ⅳ组＞Ⅴ组＞Ⅱ组＞Ⅰ组＞Ⅲ组，乳酸含量和pH:Ⅴ组＞Ⅰ组＞Ⅱ组＞Ⅳ组＞Ⅲ组，巯基含量和菌落总数：Ⅰ组＞Ⅱ组＞Ⅴ组＞Ⅳ组＞Ⅲ组。说明采用梯度降温的致死处理方式明显优于敲击头部致死和冰埋致死方式，而梯度降温时的温差间隔不宜太大。综合各指标品质评价结果，Ⅲ组的致死方式最好，较小的温差降温方式使石斑鱼死亡的过程应激反应小，乳酸含量、pH和总巯基相对稳定，从而有利于贮藏过程的品质保持，比其他4组更有效延缓质构特性和巯基含量的降低，抑制微生物活性，延长鱼样保鲜期。
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琼枝麒麟菜多糖的分离纯化、结构表征及降血糖活性
《大连海洋大学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为研究琼枝麒麟菜（Eucheuma gelatinae）多糖的结构及其粗多糖和纯化组分的降血糖活性，以超声波辅助酶法提取的琼枝麒麟菜粗多糖为原料，采用DEAE-52离子柱纯化、PMP衍生，用HPLC法测定各组分单糖组成。结果表明：琼枝麒麟菜粗多糖（EGP）和纯化组分（EGP-1、EGP-2、EGP-3）均为吡喃型硫酸多糖，主要由甘露糖（Man）、葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）、木糖（Xly）和阿拉伯糖（Ara）5种单糖组成；与EGP相比，纯化多糖的蛋白质含量显著降低（P＜0.05）,EGP-2和EGP-3的糖醛酸和硫酸根含量显著提高（P＜0.05）;EGP和EGP-1有三螺旋结构，EGP-2和EGP-3无三螺旋结构；多糖的体外降血糖活性显示，4种多糖均能有效抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的活性，且呈剂量依赖性，其中EGP-3的降血糖效果最优。研究表明，与EGP相比，3种纯化组分的相对分子质量均有所降低，且表现出更强的降血糖活性。
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基于北斗船位数据的南海外海灯光罩网渔船作业特征研究
《南方水产科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：灯光罩网是中国南海外海主要捕捞作业方式之一。为加强对南海外海灯光罩网渔船生产监测和渔船捕捞活动的有效管理，根据2017年2—5月南海外海灯光罩网渔船北斗船位数据，分析定位时间、经纬度等特征，结合作业时间、等深线等采用多层过滤法判断渔船作业状态；通过阈值筛选渔船作业的位置和时间，采用过滤窗修正法对船位点状态进行修正，计算渔船作业时长，并与渔民实际记录的纸质捕捞日志进行对比分析。结果表明：北斗船位数据提取结果和渔民实际记录的结果误差较小，航次准确率为100%，航次天数准确率为94.30%；相同作业日期准确率为92.72%；作业时长总平均绝对误差为1.12 h，平均相对误差为2.1%，具有较好的一致性。研究设计的灯光罩网渔船状态判断、作业位置确定、作业时长提取和捕捞努力量计算方法可为灯光罩网作业分析和其捕捞强度量化提供新思路。
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鲴亚科分子系统学研究
《水生生物学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为探讨鲴亚科(Xenocyprinae)鱼类系统发育关系,研究基于2种线粒体基因和5种核基因序列对鲴亚科各物种的系统发育关系和分化时间进行评估.结果显示:不同方法和数据类型获得了基本一致的拓扑结构.3个属的单系性都得到了很好地支撑;但是,它们之间的进化关系却随着分子标记的不同而改变.这一结果可能是由于早期的基因流或谱系的随机分选所致.此外,银鲴(Xenocypris argentea)、云南鲴(Xenocypris yunnanensis)和黄尾鲴(Xenocypris davidi)之间呈现出嵌套型的谱系关系,暗示它们之间存在基因交流的可能性.基于化石地层年代校正的分子钟估算结果显示,鲴亚科主要类群的分化发生在中新世晚期,约15-12百万年前(Millions of years ago,Ma),这与东亚季风强盛时期的时间相吻合.
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星康吉鳗精子的超微结构研究
《海洋科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为探讨星康吉鳗(Conger myriaster)精子的超微结构和形态,应用扫描电镜和透射电镜对星康吉鳗精子结构进行观察.结果表明,精子由头部、中段和鞭毛3部分组成,有其独特的结构,总长度为35.75±1.15 μm.精子头部为新月形,主要由细胞核构成,细胞核内有核泡,无顶体结构.精子头部的质膜内包含单一的线粒体.精子头部长为 3.33±0.16 um,头宽为 1.12±0.13 um.在精子头部的凸面上,有 4 条从中段到头端的条纹.精子中段伸出一支根,支根位于精子的中段末端.精子中段长度为 0.55±0.05 um,支根长度为 1.38±0.08 um、直径为 90.48±6.06 nm.精子尾部鞭毛细长,鞭毛横切面呈圆形,无侧鳍,鞭毛的轴丝结构为"9+0"型;一些鞭毛的末端呈现卷曲状,发育机制尚不明确.精子鞭毛长为 31.16±1.51 μm,鞭毛直径为 0.17±0.01 μm.通过比较分析发现精子的这些形态学特征不仅表现在星康吉鳗精子,还表现在鳗鲡目其他属的精子;表明是鳗鲡目精子的共同特征.本研究揭示了星康吉鳗精子的形态结构,为突破星康吉鳗人工繁殖技术提供了理论参考.
关键词： 星康吉鳗(Conger myriaster) 精子 超微结构 精子形态
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中华绒螯蟹螯足长节产地差异的几何形态测量学研究
《安徽农业大学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为掌握中华绒螯蟹螯外形精细结构的产地差异性，首次应用几何形态测量学方法，对长江中下游湖南省、安徽省、江苏省等7个产地蟹的螯足长节形态进行了比较研究。依据地标点法选取原则建立了螯足长节的14个特征点数据系统，并通过将其标准化，获得此7个产地蟹的平均型,再利用薄板样条分析和网格变形，对形态变异矢量进行了可视化分析。结果表明，与平均形比较，除无为野生蟹无明显的变化外，安徽省其他3个产地蟹长节形态有同趋势变化（即长节左下端向内缩小，长节内部凹陷点向左下端靠近）；湖南、江苏3个产地蟹长节形态亦有同趋势变化（即长节左下端向外扩展，长节内部凹陷点向右上方向偏移）。此外，对上述标准化数据开展判别分析的结果更显示，7个产地雌、雄蟹个体间的判别准确率均可达100%。上述发现进一步证实了几何形态测量学法不仅在大至背甲，小至螯足长节的形态方面能有效把握中华绒螯蟹产地差异性，而且在非致死、致伤产地溯源技术研发上也极具潜力。
关键词： 中华绒螯蟹 几何形态测量学 地标点 螯足长节 产地溯源
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4个温度下绿鳍马面鲀幼鱼耗氧率和窒息点的研究
《水产科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为探明绿鳍马面鲀幼鱼在不同温度下随水体溶解氧量下降过程中的耗氧和活动变化规律,于5.4 L圆桶状呼吸室中采用封闭式呼吸室的方法,在12、16、20、24 ℃ 4个温度条件下,测定平均体长为(9.5±0.08)cm、体质量为(15.34±0.15)g的绿鳍马面鲀幼鱼的耗氧率和窒息点.试验结果显示:绿鳍马面鲀幼鱼在 12、16、20、24 ℃ 的窒息点分别为(0.85±0.06)mg/L、(0.97±0.04)mg/L、(1.10± 0.05)mg/L、(1.40±0.07)mg/L,窒息点随温度升高而升高;4个温度下溶解氧质量浓度分别为2.14、2.37、2.40 mg/L和3.06 mg/L时,幼鱼出现不适行为、开始死亡至全部死亡,各温度组的溶解氧质量浓度下降幅度均接近0.3 mg/L,温度越高幼鱼全部死亡时间越短;耗氧率随温度的升高而升高,随着溶解氧质量浓度的降低,4个温度组的耗氧率从开始的0.104、0.131、0.187 mg/(g·h)和0.318 mg/(g· h)降低到结束时的0.02~0.03 mg/(g·h),温度越高下降越快.将各温度组溶解氧含量下降过程的耗氧率变化分为适宜期(Ⅰ)、窒息期(Ⅱ)、死亡期(Ⅲ),结果表明:3个时期有明显的变化规律,各组3个时期的耗氧率均呈下降趋势且各期之间差异显著(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ期各温度组的耗氧率随温度升高而升高,且各组之间差异显著(P<0.05);Ⅲ期相邻的温度组之间差异不显著(P>0.05),不相邻组之间差异显著(P<0.05).因此,绿鳍马面鲀幼鱼耗氧率随溶解氧质量浓度和温度的变化有明显的变化规律,耗氧量较大,耐低氧能力较差.
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5种主要海水养殖病原菌多重微流控荧光定量PCR快速检测技术的建立
《渔业科学进展 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：在养殖现场开展多病原的快速检测是水产养殖产业健康发展的重要技术需求之一。本研究选取哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）的vhhA基因、副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）的toxR基因、大菱鲆弧菌（Vibrio scophthalmi）的luxR基因、鳗弧菌（Vibrio anguillarum）的empA基因和美人鱼发光杆菌美人鱼亚种（Photobacterium damselae subsp.damselae）的Mcp基因作为靶基因，设计特异性引物，通过优化反应体系和条件，并在微流控芯片进行集成，建立了可同步检测这5种病原菌的多重微流控荧光定量PCR检测技术。结果显示，本研究所建立的检测技术最佳反应体系：2×Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix 5μL,Primer F/R各1μL,DNA模板2μL,ddH2O 1μL。反应条件为95℃30 s,95℃5 s,61℃30 s，扩增30个循环。通过绘制标准曲线发现，在10~9～10~4 copies/μL浓度范围内均有良好的线性相关性。该方法对哈维氏弧菌、副溶血弧菌、大菱鲆弧菌、鳗弧菌和美人鱼发光杆菌美人鱼亚种特异性强，对5种病原菌的最低检测限分别为40、20、200、500和20 CFU/mL，显示出较高的灵敏度，且样品平均检测时间缩短至26 min左右。本研究结果为开发水产养殖多病原快速、精准的现场检测技术奠定了重要基础。
关键词： 哈维氏弧菌 副溶血弧菌 大菱鲆弧菌 鳗弧菌 美人鱼发光杆菌美人鱼亚种 微流控PCR 现场快速检测
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