科研产出
伪狂犬病毒感染对BHK-21悬浮细胞内质网应激和未折叠蛋白反应的影响
《中国畜牧兽医 》 2022 北大核心
摘要:[目的]探讨伪狂犬病毒(PRV)感染对BHK-21悬浮细胞内质网应激及未折叠蛋白反应(UPR)的影响.[方法]将悬浮的乳仓鼠肾细胞(BHK-21)以感染复数(MOI)0.01接种PRV,分别在接毒后12、24、36、48和56 h取样,用CCK-8法检测细胞存活率,按Reed-Muench法检测病毒滴度,筛选病毒接种处理的合适时间;以不接毒细胞作对照组,分别在感染后12、24、36和48 h取样,用实时荧光定量PCR法检测内质网应激标志分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及UPR的3种感受蛋白(PERK、IRE1、ATF6)相关通路中基因的表达变化,Western blotting法检测相关蛋白的表达变化.在接种PRV同时分别加入0、0.001、0.005、0.01和0.02 μmol/L内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(Tg)和0、20、40、80和160 μmol/L内质网应激抑制剂牛磺熊去氧胆酸(TUDCA),48 h收集细胞测定病毒滴度和细胞存活率.[结果]PRV感染56 h细胞存活率低于70%,感染48 h时病毒滴度达到最高(8.1 1g TCID50/mL),因此后续试验分别在接毒后12、24、36和48 h取样.与对照组相比,PRV感染36和48 h GRP78转录水平均极显著升高(P<0.01);PERK通路中,转录激活因子4(ATF4)转录水平在PRV感染36、48 h均极显著升高(P<0.01),生长抑制DNA损伤基因34(GADD34)转录水平在PRV感染36 h显著升高(P<0.05)、48 h极显著升高(P<0.01),磷酸化真核翻译起始因子(P-eIF2α)蛋白水平在PRV感染36、48 h均极显著升高(P<0.01);IRE1通路中,PRV感染组细胞36 h后多以剪切形式sXBP1存在,同时下游p58IPK mRNA水平在36 h显著增加(P<0.05),p58IPK和 EDEM mRNA水平在48 h均极显著增加(P<0.01);ATF6通路中,PRV感染不同时间ERp57、PDI、Calnexin和Calreticulin的表达均无显著变化(P>0.05).与0 μmol/L组相比,0.01和0.02 μmol/L Tg极显著降低细胞存活率(P<0.01),0.005和0.01 μmol/L Tg均极显著增加了 PRV病毒滴度(P<0.01).[结论]PRV感染可以诱导BHK-21悬浮细胞内质网应激,激活UPR的PERK和IRE1信号通路,说明PRV利用内质网应激增强其复制.
关键词: 伪狂犬病毒 BHK-21悬浮细胞 内质网应激 未折叠蛋白反应


1株羊源污蝇杆菌的分离鉴定与耐药性分析
《畜牧与兽医 》 2022 北大核心
摘要:污蝇杆菌(Wohlfahrtiimonas chitiniclastica)是一种新出现的人畜共患病原菌.2020年从安徽某羊厂1只口腔和舌头溃烂羊的口腔中采样并分离细菌,进行药敏试验.结果显示:分离到1株污蝇杆菌,呈β型溶血,该菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类耐药、大环内酯类、喹诺酮类、磺胺类、氟苯尼考、多黏菌素类药物均出现耐药情况,对美罗培南、替加环素敏感.这是国内首次报道羊源污蝇杆菌,但其耐药性相比之前报道菌株更严重,这对公共卫生安全具有重大挑战.


基于近红外光谱法的绿豆淀粉和蛋白质无损快速检测
《江苏农业科学 》 2022 北大核心
摘要:为实现绿豆籽粒淀粉和蛋白质含量的无损快速检测,满足高淀粉、高蛋白绿豆的筛选、选育等需要,选用我国不同地区100份绿豆种质资源为材料,采用酸水解法和凯氏定氮法分别测定淀粉和蛋白含量,样品中淀粉含量范围为40.88%~53.62%,蛋白含量范围为20.17%~27.38%,化学测量值数据分布广.应用近红外光谱技术建立绿豆中主要营养物质的快速检测方法.通过采集样品的近红外光谱,结合化学方法所得数据建立近红外定量模型.结果表明,采用无光谱预处理可以得到最优的淀粉数学模型,内部交叉验证决定系数(r2)和交叉验证均方根误差(RMSECV)分别为0.9269和0.658.采用一阶导数+MSC处理得到最优的蛋白模型,内部交叉验证决定系数r2和RMSECV分别为0.9341和0.384.淀粉和蛋白外部验证决定系数r2分别为0.9351和0.9212,模型预测效果较好.建立的近红外模型可用于绿豆籽粒淀粉和蛋白质含量的无损快速检测,模型涵盖了绿豆种质淀粉和蛋白质含量的广泛检测分布范围,可实现绿豆资源的快速评价,提高育种效率.


辣椒抗PMMoV基因L4连锁标记的验证分析
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:近年来,辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus, PMMoV)病的发生日趋严重,已严重危害中国辣椒生产。L系列等位基因(L1、L2、L3、L4)是抗烟草花叶病毒属的主要抗性基因,其中L4基因抗性最强且具有广谱性。为加速L4基因的转育应用,本研究对前人报道的3对与L4基因紧密连锁的分子标记进行检验分析。结果显示,标记L4SC340退火温度不稳定,极易造成假阳性,不适用于L4抗性基因的辅助筛选。标记087H3T7和L4-SCAR可以筛选出携带L3和L4抗性基因的辣椒种质,但无法区分携带L3和L4基因的抗性材料,同时087H3T7存在杂合基因型过高的问题。二者比较来说,L4-SCAR标记的筛选准确度高于087H3T7,但是L4-SCAR为显性标记,无法区分杂合基因型。因此上述3对标记均不能用于筛选携带L4抗性基因的种质材料,但是在明确抗性材料基因型的情况下,L4-SCAR标记结合087H3T7可用于L3和L4抗性基因转育后代抗性单株的辅助筛选。本研究结果可为加速辣椒抗PMMoV育种提供更实用的分子标记。


腐植酸对水培冰草生长及其品质的影响
《安徽农业大学学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:为探明营养液中添加不同腐植酸对水培冰草产量及品质的影响,为其在叶菜水培生产中的高效应用提供理论依据,选用非洲冰草为研究对象,以霍格兰营养液为基础溶液进行水培试验,共设置7个处理,以不添加腐植酸为对照(CK)、分别添加50 mg·L-1腐植酸(HA1)、100mg·L-1腐植酸(HA2)、200 mg·L-1腐植酸(HA3)、50 mg·L-1纳米腐植酸(NHA1)、100mg·L-1纳米腐植酸(NHA2)和200 mg·L-1纳米腐植酸(NHA3),测量冰草地上部及根系生长指标,检测冰草叶片红外光谱特征、品质及氮磷钾含量.结果表明:在试验浓度下添加腐植酸和纳米腐植酸均可促进冰草生长发育,并随着添加浓度的升高呈现先增后减趋势,其中NHA1效果最佳,较CK显著增加冰草地上部鲜重76.96%、地上部干重185.76%、根系长度42.79%及维C含量46.4%,且显著降低硝酸盐含量45,7%;较CK显著提高氮、磷、钾吸收率19.6%、39.2%及18.3%,其次为HA2处理.各处理的冰草叶片FTIR光谱在3 280、2 920、1 630、1 380、1 300和1 020 cm-1波数附近的透射率均低于对照,表明腐植酸尤其是纳米腐植酸能够增加冰草叶片中的糖类、酯类、蛋白质、氨基酸类和核酸等物质的含量,其中以NHA1处理最为显著.综上所述,营养液中添加适宜浓度的腐植酸能显著促进水培冰草地上部及根系的生长,改善冰草品质,促进养分吸收,提高冰草产量,纳米腐植酸的促进作用大于相同浓度的普通腐植酸,可为实际生产提供参考.


基于苋菜转录组的TCP基因家族成员鉴定及表达分析
《福建农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:[目的]基于大红苋菜转录组数据库,对苋菜TCP基因家族成员进行筛选鉴定,为深入探讨苋菜TCP基因家族对苋菜生长发育及非生物胁迫响应提供参考.[方法]在转录组数据库中,筛选鉴定TCP基因家族成员,并对其进行生物信息学分析;在不同条件处理下培养苋菜幼苗,并利用qRT-PCR技术分析其在不同处理下的表达模式.[结果]苋菜TCP基因家族有14个成员,全部定位于细胞核;AtrTCP蛋白质长度在230~721 aa区间内,预测相对分子量为25.25~78.57 kD,等电点为6.15~9.45,包含15个保守基序;除AtrTCP11为稳定蛋白外,其余均为不稳定蛋白;miRNA预测到两个AtrTCP家族成员AtrTCP2和AtrTCP6为miR319靶基因.qRT-PCR结果显示:在盐溶液不同浓度(0、50、100、200 mmol·L-1)处理下,该基因家族具有不同的表达模式;在蓝光处理下,AtrTCP10基因表达量上调达到了显著水平;AtrTCP2、AtrTCP3、AtrTCP8、AtrTCP9、AtrTCP11和AtrTCP13表达量下调达到了显著水平;在不同铵硝比(0∶0、0∶10、3∶7、5∶5、7∶3、10∶0)处理下,TCP基因家族各成员表达模式不同,其中,AtrTCP3参与整个氮代谢过程;在苋菜各部位进行qRT-PCR分析发现:AtrTCP3、AtrTCP12在叶片中高表达,其余家族成员均在根部的表达量较高.[结论]在不同条件处理下,苋菜TCP基因家族各成员表达模式不同,表明苋菜TCP基因家族各成员可能广泛参与非生物胁迫.
关键词: 苋菜 TCP转录因子 基因家族 生物信息学分析 表达


LiDAR传感器及技术在农业场景的应用进展综述
《中国农机化学报 》 2022 北大核心
摘要:农业传感器是实现农业现代化发展的关键支撑技术,先进成熟的工业传感器向农业领域拓展应用有效补充了农业传感器的体量。LiDAR传感器由于其较强的抗干扰能力,在复杂多变的农业场景中应用越来越广泛、深入。首先,介绍LiDAR传感器的性能特点,工作原理与分类,市场应用与新技术;然后,基于国内外大量相关研究,系统介绍LiDAR传感器及技术在森林参数测量、果树靶标几何特征探测、作物几何表型特征检测、农业车辆自主导航定位以及农药雾滴飘移检测这5个农业场景的应用进展;同时,针对农业场景中探测对象的特殊性,讨论分析LiDAR传感器及技术在上述5类农业场景应用中的发展趋势;最后,展望LiDAR新技术在农业场景应用中的发展方向,即通过集成自动化采集系统装备与数据智能分析方法进一步提升LiDAR数据精准性、全面性、丰富性和实时性。
关键词: LiDAR传感器 作物表型检测 自主导航定位 精准变量施药


不同播期下春季追肥方式对冬小麦产量及群体性状的影响
《中国土壤与肥料 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:以江麦869、徐麦178为供试品种,通过设置不同播期与春季追肥方式的互作处理,探究不同播期条件下缓释肥替代尿素的增产效果,以期为江苏淮北地区实现小麦高产高效轻简化生产提供理论依据.结果表明,江麦869和徐麦178的适宜播期分别为10月10~25日和10月10日前后.推迟播期,2个品种孕穗期最大叶面积指数、干物质积累量、高峰苗均呈下降趋势,而收获指数有所增加,茎蘖成穗率在播期10月25日条件下最高.各春季追肥方式中,返青期施用缓释肥可有效增加最大叶面积指数,促进小麦干物质积累,因而增产效果显著优于其他3种处理,且不必等雨或灌水施肥,简化了春季追肥程序.


长期施用尿素降低赤红壤旱地耕层pH的特征与预测
《植物营养与肥料学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:【目的】阐明长期不同施肥处理的赤红壤旱地耕层土壤pH变化特征,并以模型预测土壤pH的未来变化,为区域土壤高产稳产和可持续利用提供理论依据。【方法】在闽东南赤红壤旱地花生–甘薯轮作制连续进行16年化肥定位试验和14年化肥配施有机肥定位试验,测定各施肥处理的历年耕层土壤pH。以实测土壤pH为依据构建灰色预测模型,并进行模型可靠性验证。【结果】连续16年实测结果表明,不施肥CK处理和不施氮肥(尿素)处理(RF-N)的耕层土壤pH在16年间从基础土壤的5.90分别提高到6.24±0.18和6.21±0.17,分别年均递增0.021和0.019个pH单位;习惯施肥(FP)、推荐施肥(RF)、不施磷肥(RF-P)和不施钾肥(RF-K)处理均导致土壤酸化,且酸化程度没有显著差异。化肥配施有机肥可抑制土壤酸化或提高土壤pH。连续14年推荐施肥配施猪粪(RF+PM)处理的土壤pH从基础土壤的5.73提高到5.80±0.36,显著高于RF和推荐施肥配施商品有机肥(RF+COM)两个处理,年均递增0.005个pH单位,但与推荐施肥配施稻草(RF+S)处理的差异不显著;RF+COM处理抑制土壤酸化的效果较差,土壤pH年均递减0.019个pH单位,且与RF处理没有显著差异。土壤pH灰色预测模型显示,不同施肥处理的拟合误差在0.997%至4.321%;土壤pH变化存在明显的阶段性特征,拐点出现在试验开始后的第3或4年;土壤pH变化趋势受不同施肥处理的显著影响。CK和RF-N处理在试验开始后的第3年内土壤pH处于上升状态,但在第4年后就稳定在6.20左右。FP、RF、RF-P、RF+COM、RF+PM和RF+S处理在试验开始后的第3或4年内土壤pH处于下降状态;在定位试验持续到第3或4年之后,FP、RF、RF-P和RF+COM处理的土壤pH则稳定在5.50左右;但RF+PM和RF+S处理的土壤pH则处于上升状态,至第14年时分别达到6.26和5.91,比该试验地基础土壤pH 5.73分别提高0.53和0.18个pH单位。【结论】长期施用推荐施氮量或更高量的氮肥(尿素)是赤红壤旱地土壤酸化的主要原因,土壤pH变化存在阶段性特征,拐点出现在定位试验开始后的第3或4年。在推荐施肥基础上用腐熟猪粪或稻草替代1/3化学氮肥,在拐点后可显著提高土壤pH,效果是腐熟猪粪>稻草。
关键词: 赤红壤 长期定位试验 施肥 土壤 酸化 灰色预测模型


基于BSA-seq技术挖掘糙皮侧耳抗螨候选基因
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:根据前期不同糙皮侧耳菌株抗螨性差异调查结果,构建了糙皮侧耳孢子单核体群体,群体内479个菌株抗螨性呈正态分布。利用BSA-seq技术对高抗和高感混池进行SNP和InDel位点的欧氏距离关联分析,将抗螨性候选基因定位到一条染色体上,2个相邻候选区域总长度为1.75 Mb,内有基因605个,其中非同义突变基因353个,移码突变基因89个。经功能注释以及GO和KEGG通路富集等分析,发现26个候选基因参与了信号传导、防御过程和次级代谢相关通路,推测这些候选基因可能与糙皮侧耳抗螨性相关。

