科研产出
重组小麦静息巯基氧化酶的表达、酶学特性及其对面包品质的影响
《生物工程学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为发展新型面粉改良酶制剂,利用大肠杆菌Escherichia coli原核表达了小麦静息巯基氧化酶（Wheat quiescin sulfhydryl oxidase,wQSOX）。将合成的wqsox基因构建至pMAL-c5x载体,并在大肠杆菌中进行表达,优化蛋白表达条件后对重组蛋白进行分离纯化及融合标签切除,获得的重组wQSOX蛋白用于酶学性质探究以及面包品质改良。结果表明,合成的截短wqsox基因包含1 359 bp,编码453个氨基酸,理论蛋白分子量51 kDa;构建的pMAL-c5x-wqsox重组质粒在E. coli Rosetta gamiB（DE3）中可溶表达了重组蛋白MBP-wQSOX,其最佳表达条件为:诱导温度25℃,诱导剂IPTG浓度0.3 mmol/L,诱导时间6 h;利用Xa因子蛋白酶切除了MBP融合标签,亲和层析纯化得到了wQSOX;wQSOX可催化DTT、GSH和Cys氧化,并伴随着H2O2的生成,其中对DTT表现出最高的底物特异性;酶学性质研究发现,wQSOX最适反应温度和pH分别为50℃和10.0,在高温和碱性环境条件下表现出较好的稳定性;每克面粉中添加1.1 U wQSOX能够显著（P<0.05）提高26.4%的面包比容,降低20.5%的面包芯硬度和24.8%的咀嚼性,表现出了较好的改良面包加工品质能力。研究结果对丰富新型面粉改良酶制剂种类以及推动wQSOX在焙烤行业的应用奠定了理论基础。
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广东烟草种质资源创新与利用研究进展
《广东农业科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：烟草种质资源是烟草原始创新、新品种选育及其生物技术产业化的物质基础,是保障烟叶生产安全的战略性资源,对我国烟草可持续发展具有重要意义.烟草原始创新、新品种选育及其生物技术产业化的成效,取决于所掌握种质资源的数量和对其差异性状表现及遗传规律研究,而突破性进展往往依赖于特殊种质资源的发现与利用.由于烟草种质资源遗传多样性丰富,研究内容宽泛、调制类型多样,且具有公益性、基础性和不可再生性等特征,相关研究工作任重而道远.为了解广东烟草种质资源研究现状,介绍了广东烟草种质资源国内外收集、保存的基本情况;阐述了烟草种质资源的分类、鉴定评价及种质创制与利用等方面的研究进展;概述广东生态环境下烟草地方种质资源香气风格形成与新品种选育情况,在此基础上,对目前种质资源繁种更新、精准鉴定、遗传群体研究和种质创制等进行展望.
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饲料添加L-精氨酸或N-氨甲酰谷氨酸对黄颡鱼生长、肠道功能、血清生化指标和抗氨氮应激能力的影响
《动物营养学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲料添加L-精氨酸（Arg）或N-氨甲酰谷氨酸（NCG）对黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）生长、肠道功能、血清生化指标和抗氨氮应激能力的影响。试验选取初始体均重为（0.98±0.03） g的黄颡鱼480尾,随机分为3组,每组4个重复,每个重复40尾,分别投喂添加0（对照组）、0.48%L-Arg（0.48%Arg组）、0.025%NCG（0.025%NCG组）的3种等氮等脂（42%蛋白质和7%脂肪）试验饲料,饲养56 d。结果显示:与对照组和0.48%Arg组相比,饲料中添加0.025%NCG显著提高了黄颡鱼增重率及肠道脂肪酶、诱导型一氧化氮合酶活性和血清总抗氧化能力（P<0.05）。与对照组和0.025%NCG组比,饲料中添加0.48%Arg显著增加了黄颡鱼肠道蛋白酶活性（P<0.05）。0.025%NCG组黄颡鱼肠道精氨酸酶、一氧化氮合酶、二胺氧化酶活性和血清溶菌酶含量显著高于0.48%Arg组（P<0.05）。0.48%Arg组黄颡鱼肠道Na+/K+ATP酶活性显著高于0.025%NCG组（P<0.05）。0.025%NCG组黄颡鱼血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于对照组（P<0.05）。0.48%Arg组或0.025%NCG组黄颡鱼血清溶菌酶含量显著高于对照组（P<0.05）。与对照组相比,饲料中添加0.48%Arg或0.025%NCG显著了降低了黄颡鱼氨氮应激48和72 h累计死亡率（P<0.05）。0.025%NCG组黄颡鱼氨氮应激72 h累计死亡率显著低于0.48%Arg组（P<0.05）。综上所述,饲料中添加0.025%NCG显著提高黄颡鱼生长性能、免疫和抗氧化能力,添加0.48%Arg或0.025%NCG显著提高黄颡鱼肠道功能和抗氨氮应激能力。结合生长性能、免疫抗氧化和抗氨氮应激指标综合评价,饲料中添加NCG作用效果优于Arg。
关键词： 精氨酸 N-氨甲酰谷氨酸 黄颡鱼 生长 肠道功能 血清生化指标
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秋水仙素加倍玉米单倍体胚性愈伤组织的初步研究
《植物遗传资源学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以玉米单倍体胚性愈伤组织为遗传转化受体,结合化学加倍方法,可以在较短时间内获得纯合稳定的个体,加快转基因植株的纯合时间。本研究基于二倍体幼胚胚性愈伤组织诱导方法,获得玉米单倍体愈伤组织,并分析了单倍体愈伤组织检出率,不同继代次数后的褐化率和死亡率,以及二倍体愈伤组织与单倍体愈伤组织的生长速率等重要指标。同时,采用0.005%～0.03%秋水仙素处理单倍体愈伤组织,分析处理后单倍体愈伤组织的死亡率,成株后的散粉率,大花药（花粉活力强）植株比率,结实率以及结实大于5粒的植株比率等指标。研究结果表明,基于改进的二倍体愈伤组织诱导方法,能够正常诱导出单倍体胚性愈伤组织,单倍体愈伤组织检出率为4.2%,与诱导系MT-1对自交系18-599（红）的诱导率相当。单倍体愈伤组织的褐化率和死亡率均与同继代次数下的二倍体愈伤组织褐化率存在一定差异,且继代3次后的单倍体愈伤组织褐化率和死亡率最高。以愈伤组织直径为参考,单倍体愈伤组织的生长速率低于二倍体愈伤组织,在生长早期可作为判断单倍体和二倍体愈伤组织的重要参考指标。经不同浓度和时间的秋水仙素处理后,单倍体愈伤组织的散粉率、大花药植株比率、结实率以及结实大于5粒植株比率随处理浓度和时间的增加而提高,而存活率和小花药（活力较低或无活力）比率随处理浓度和时间的增加而下降。由此表明,秋水仙素处理可提高玉米愈伤组织成株后的散粉率和结实率,结实率的提高又取决于大花药比率的提高。本研究综合分析了玉米单倍体愈伤组织诱导及加倍过程中的诸多因素,筛选出0.01%秋水仙素处理12 h和0.02%秋水仙素处理3 h作为玉米单倍体愈伤组织加倍的较优处理模式。
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基于扫描电镜技术的甜玉米食味品质鉴评研究
《广东农业科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】建立一种简便、有效观察甜玉米果皮和胚乳超微结构的扫描电镜制样方法,并将其应用于不同类型甜玉米食味品质的鉴评。【方法】以新鲜饱满乳熟甜玉米籽粒为材料,采用戊二醛固定法、低热干燥法和直接制样法等3种不同样品处理方法,比较分析鲜玉米籽粒果皮和淀粉粒的超微结构及其差异。【结果】戊二醛固定制样法能很好地呈现甜玉米籽粒果皮细胞结构层次、厚度以及淀粉粒形态与空间分布等特征,是一种相对理想、便捷获得甜玉米籽粒果皮和淀粉粒超微结构的方法。将戊二醛固定法应用于4种类型甜玉米食味品质在超微结构水平的鉴定结果表明,不同类型甜玉米籽粒在果皮结构层次、胚乳淀粉腔隙、淀粉颗粒大小及分布等方面存在显著差异,这些超微结构差异与甜玉米口感品质密切相关。【结论】戊二醛固定法是一种简便、有效获得玉米果皮及胚乳等超微结构的方法,该方法可用于甜玉米食味品质在超微水平的鉴评以及籽粒果皮、淀粉粒等超微结构研究,为甜玉米品种改良提供方法支撑。
关键词： 甜玉米 扫描电镜 果皮 淀粉粒 超微结构 食味品质
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蔬菜疫病抗性鉴定技术研究进展
《广东农业科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：疫病是蔬菜生产上一种非常重要的病害,以茄果类、瓜类、芋类等受害最为严重.该病害在蔬菜整个生长期均可发生且各部位均可发病,尤以幼茎、嫩果部位受害最为严重.疫病属卵菌病害,化学药剂难以防治,给蔬菜生产和育种工作带来极大挑战.选育抗病品种是控制疫病最经济有效的根本途径之一,而抗病性鉴定、筛选是抗病育种的重要前提和保障.通过人工接种方法,进行苗期抗病性鉴定、筛选抗性种质,有利于亲本选择、缩短育种进程和提高抗病育种效率.为深入了解蔬菜对疫病的抗性情况和高效种质资源鉴定、筛选方法,对蔬菜疫病抗性鉴定方法的研究进展进行总结,并对主要蔬菜疫病抗性鉴定方法进行比较,提出相应对策,旨在为蔬菜抗疫病育种工作提供有价值的理论和技术参考.
关键词： 疫病;抗性鉴定;茄果类;瓜类;芋头
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荔枝蒂蛀虫成虫对LED光的趋性及其繁殖响应特征
《环境昆虫学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为明确荔枝蒂蛀虫Conopomorpha sinensis成虫对不同LED光的趋性行为反应,初步筛选出该虫趋光性不同的光色并进一步研究其对成虫繁殖生物学特性的影响,以期为今后研发特异性强且绿色高效的荔枝蒂蛀虫灯光防控技术提供理论依据。本文采用对比实验法,测试了荔枝蒂蛀虫雌蛾对9种供试光源的趋性行为反应,并进一步研究夜间LED光照射对荔枝蒂蛀虫成虫交配率、繁殖力及寿命的影响。结果显示,荔枝蒂蛀虫雌成虫对不同LED光的趋光反应率由高到低为:蓝（445～450 nm）>紫（400～405 nm）>红（655～665 nm）>蓝绿（475～480 nm）>橙（600～605 nm）>绿（515～520 nm）>黄（570～575 nm）>白（400～700 nm）>黑暗>紫外（365 nm）,试虫对紫外光表现出明显的避光性,对7种单色光表现为不同程度的趋光性,其中对黄光和白光的趋光率在50%以下。在繁殖生物学方面,夜间50 lx的LED黄光和白光持续照射能使荔枝蒂蛀虫成虫的交配率由93.75%降低至50%以下,且产卵前期延长,雌蛾产卵量显著降低。此外,夜间不同LED光源照射能抑制已交配荔枝蒂蛀虫雌蛾产卵活动,白光照射组的单雌日均产卵量降低程度最大,为50.71%,黄光次之（48.96%）,蓝光最小,为38.06%。综上所述,荔枝蒂蛀虫雌蛾对LED白光和黄光的趋光性较弱,夜间适当的LED白光（400～700 nm）和黄光（570～575 nm）持续照射可有效降低成虫交配率和繁殖力,该结果对促进LED白光干扰防控荔枝蒂蛀虫技术的优化升级具有一定指导意义。
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滇西南稻区白背飞虱种群特征及其关键影响因子
《环境昆虫学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为明确滇西南沧源县稻区白背飞虱Sogatella furcifera的种群发生特征及其影响因子,于2010-2019年通过灯诱监测和田间调查的方法,分析沧源县白背飞虱的越冬种群、灯诱种群及田间种群发生特征,并对白背飞虱种群数量的影响因素进行相关性分析。结果表明:（1）白背飞虱以成、若虫在再生稻、落粒稻上越冬,越冬虫量最高可达1 600头/667 m2,越冬虫量大小与冬季极端最低温度呈显著正相关（r=0.473）;（2）白背飞虱灯诱高峰主要集中在3月下旬至4月上旬、5月下旬至7月上旬以及9月,灯诱峰期和诱虫量在不同年份之间差异较大;随着白背飞虱不断迁入,田间白背飞虱种群呈增长趋势,一般于5月底至6月初田间种群数量最大,构成田间种群的危害高峰,而水稻抽穗之后,白背飞虱田间种群数量迅速下降,向外迁出,9月水稻进入成熟收割期,外地回迁的灯诱峰次虽虫量较大,但对当地水稻威胁较小;（3）沧源县白背飞虱田间最大虫量与5月累积灯诱虫量呈显著正相关（r=0.670）,与越冬虫量以及3、4月累积灯诱虫量无显著关系,5月累积灯诱量又与5月降雨存在显著正相关（r=0.758）,说明5月迁入虫源是影响白背飞虱种群为害的关键因素。明确滇西南稻区白背飞虱的种群发生特征及其影响因子,对当地白背飞虱的预测预报和防治工作具有重要意义。
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γ-氨基丁酸和2-乙酰-1-吡咯啉代谢通路在水稻籽粒发育过程中的变化分析
《中国水稻科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】结合代谢组和转录组技术,分析香稻和非香稻不同发育时期籽粒中γ-氨基丁酸（GABA）和2-乙酰-1-吡咯啉（2AP）代谢通路主要化合物和基因的动态变化,为高含量GABA和2AP的水稻育种提供理论依据。【方法】本研究收集优质香籼稻美香占2号和优质籼稻黄华占花后8d（乳熟期）、花后15d（蜡熟期）、30d（完熟期）的脱壳籽粒和花后40d收获的籽粒的精米,对各样本采用LC-MS/MS和RNA-seq技术进行代谢产物检测和转录表达分析,分析两个水稻品种GABA和2AP代谢通路相关化合物的空间分布以及含量变化特征。【结果】代谢组数据PCA分析表明两个水稻品种乳熟期籽粒和花后40d收获的籽粒的精米明显分离,蜡熟期和完熟期籽粒分离不明显。代谢组共鉴定出623种代谢物,四个时期差异代谢物合计161个。GABA和2AP通路中9个代谢物被检出,两个水稻品种的相关代谢物变化趋势相似,其中腐胺主要定位于籽粒的糊粉层,而亚精胺在内胚乳特异累积。转录组共检出3.3万个左右基因,其中检出GABA通路18个酶中的14个酶对应的基因有较高的表达水平,除Badh2外其他基因均不是差异表达基因,同一基因在两份水稻材料中的表达水平和变化趋势相似,GAD1、GABA-T1、DAO4和PAO4在相应同源基因中表达水平较高。黄华占籽粒中L-精氨酸和腐胺的代谢在蜡熟期已基本结束,美香占2号在籽粒整个发育期具有持续较强的多胺降解水平。美香占2号籽粒具有合成2AP的物质基础,多胺降解途径和谷氨酸-脯氨酸转化通路同时有助于2AP的积累。【结论】水稻籽粒GABA代谢以降解为主,GABA-T1和GABA-T2共同调控GABA的降解。GABA相关代谢物主要集中在糊粉层,黄华占籽粒中代谢物分布和基因表达特征与美香占2号相似,美香占2号籽粒成熟过程中具有持续较高的线粒体活性。
关键词： γ-氨基丁酸 2-乙酰-1-吡咯啉 籽粒发育 香稻 代谢组学
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