科研产出
马铃薯野生种冷驯化能力的蛋白组学分析
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为研究马铃薯冷驯化机理,通过同位素相对标记与绝对定量技术（isobaric tags for relative and absolute quantification, iTRAQ）分析了冷驯化过程中（0, 4和12 d）马铃薯野生种Solaum acaule （W3,具备冷驯化能力）和S. cardiophyllum （Cph12,无冷驯化能力）的蛋白质组变化。结果表明,在W3和Cph12中筛选的可信蛋白质数量分别为2 126和1 044;在冷驯化早期分别筛选到103与56个差异表达蛋白,后期分别筛选到330和155个;富集到与耐寒性或冷驯化直接相关的途径27条,例如膜脂质成分的调节,渗透保护剂的合成,抗氧化代谢,能量代谢和光合作用等。本研究结果为深入研究马铃薯冷驯化的分子机制提供理论指导,也可为马铃薯抗寒基因挖掘及分子育种提供参考。
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瑶山鸡和长顺绿壳蛋鸡肌肉营养成分分析及评价
《中国畜牧杂志 》 2021 北大核心
摘要：本研究旨在探究2个贵州地方鸡种瑶山鸡和长顺绿壳蛋鸡肌肉的营养成分差异。试验选择180日龄的瑶山鸡、长顺绿壳蛋鸡各20只,公母各半,采用常规分析、氨基酸分析仪、气相色谱法等测定肌肉常规营养成分、氨基酸组成、脂肪酸成分,并进行氨基酸品质评价。结果表明:瑶山鸡肌肉水分、锌、棕榈油酸、油酸、不饱和脂肪酸含量显著高于长顺绿壳蛋鸡,胆固醇、肌苷酸、硬脂酸含量显著低于长顺绿壳蛋鸡;2个品种肌肉中均测出必需氨基酸7种、半必需氨基酸2种、非必需氨基酸7种,其中谷氨酸含量最高,天冬氨酸和赖氨酸次之;长顺绿壳蛋鸡肌肉中必需氨基酸含量、甘氨酸、酪氨酸含量显著高于瑶山鸡,而鲜味氨基酸含量低于瑶山鸡（P<0.05）;2个品种肌肉必需氨基酸含量接近WHO/FAO模式参考标准,且长顺绿壳蛋鸡氨基酸比值系数分为75.93,高于瑶山鸡的74.86。综上,瑶山鸡肌肉水分、锌、不饱和脂肪酸、鲜味氨基酸含量高于长顺绿壳蛋鸡,长顺绿壳蛋鸡胆固醇、肌苷酸、甘氨酸、酪氨酸、必需氨基酸、硬脂酸的含量及氨基酸比值系数分高于瑶山鸡。
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紫苏褐斑病菌的分离鉴定及抑菌剂的室内毒力测定
《西南农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】为规模化生产上紫苏褐斑病的防治提供参考。【方法】以感染褐斑病的紫苏叶片为试验材料,采用形态学和分子生物学相结合的方法鉴定紫苏褐斑病病原菌,在此基础上采用抑菌圈法对抑菌剂进行室内毒力测定。【结果】紫苏褐斑病病原菌为链格孢属真菌（Alternaria Nees）。72%甲霜锰锌、70%代森锰锌和69%烯酰锰锌的500～800倍稀释液均可抑制链格孢属真菌的生长,3种抑菌剂的抑菌率均与药品浓度呈正相关关系,72%甲霜锰锌500倍液的抑菌效果最强,抑菌率为73.4%;72%甲霜锰锌EC50为0.76μg/mL;70%的代森锰锌EC50为0.19μg/mL;69%烯酰锰锌EC50为0.16μg/mL。【结论】紫苏褐斑病病原菌为链格孢属真菌,3种抑菌剂对紫苏褐斑病均有防治效果,69%烯酰锰锌对菌丝生长的整体抑制效果最好。
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基于RecurDyn的澳洲坚果破壳装置最低转速的求解与验证
《中国农机化学报 》 2021 北大核心
摘要：为求解基于V型双通道澳洲坚果破壳装置的工作最低转速,运用RecurDyn软件对破壳装置破壳过程模拟,分析不同工作转速下最低破壳剪切力大小及刀片、果壳破壳过程中应力变化规律。研究结果表明,破壳装置刀盘轴转速为250 r/min时,刀片与澳洲坚果相互作用的剪切力为1 107.21 N,产生的应力大于果壳强度极限。试制澳洲坚果破壳装置样机并以刀盘轴转速为100～500 r/min进行破壳试验。试验结果表明刀盘轴转速为250～500 r/min时破壳装置破壳率为92.6%～96.74%,破壳装置破壳效果与仿真结果基本一致,能够有效完成澳洲坚果破壳作业。
关键词： 澳洲坚果 破壳机 剪切破壳装置 RecurDyn 最低工作转速
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两种紫苏叶主要营养及药用成分评价
《植物生理学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：紫苏（Perilla frutescens）是我国传统的药食兼用型植物。本研究对药用紫苏M424和油用紫苏M84的叶中主要营养及药用成分进行检测分析。结果发现:M424与M84两种紫苏叶片中氨基酸种类齐全,蛋白含量分别为8.62%及12.67%,显著高于常见叶菜,必需氨基酸占总氨基酸含量比值（EAA/TAA）及必需氨基酸与非必需氨基酸的比值（EAA/NEAA）均达到理想蛋白的标准。2种紫苏叶片中纤维素含量分别为23.84%和18.60%,总糖含量分别为2.84%和2.08%,脂肪含量分别为1.53%和2.39%。2种紫苏叶矿物质元素含量丰富,其中钙、铁和硒含量均显著高于普通叶菜。β-胡萝卜素含量分别为0.38和0.32 mg·g–1,维生素C含量3.27和3.03 mg·g–1。2种紫苏叶挥发油含量约为0.765%及0.312%。药用紫苏的迷迭香酸、总黄酮及花青素等抗氧化成分含量均高于油用紫苏;而油用紫苏叶片中蛋白及脂肪含量较高。
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NF-κB信号通路激活剂LPS/抑制剂SN50对鸭肠炎病毒增殖影响的研究
《中国预防兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为探究NF-κB信号通路对鸭肠炎病毒（DEV）增殖的影响,本实验分别以不同终浓度的NF-κB信号通路激活剂LPS（2.0μg/mL、4.0μg/mL、6.0μg/mL）和抑制剂SN50（25.0μg/mL、50.0μg/mL、75.0μg/mL）处理鸭胚成纤维（DEF）细胞后,采用CCK8法分析LPS或SN50对DEF细胞活性影响;利用不同浓度的LPS或SN50预处理DEF细胞4 h后,再于12 h120 h后收获细胞和上清液（未感染DEV）;上述经LPS或SN50预处理细胞4 h后接种DEV（MOI 0.01）,12 h120 h后（每间隔12 h）分别收获细胞及上清液,采用荧光定量PCR方法分别检测上述未感染和感染DEV的DEF细胞中NF-κB1基因和DEV NP基因的转录水平;采用ELISA方法分别检测上述未感染和感染DEV的DEF细胞上清液中NF-κB信号通路关键因子（IL-1β、IL-6和MyD88）的表达水平。结果显示:不同浓度的LPS和SN50处理对DEF细胞均无明显毒性作用。荧光定量PCR结果显示,经不同浓度LPS预处理,均能有效提高DEF细胞中NF-κB1基因的转录水平,其中4.0μg/mL LPS处理的DEF细胞中NF-κB1基因转录水平最高;而在LPS预处理再感染DEV后,4.0μg/mL LPS和6.0μg/mL LPS处理的DEF细胞中NF-κB1基因转录水平整体上调（p<0.05）,2.0μg/mL LPS处理的DEF细胞中NF-κB1基因的转录水平整体下调（p<0.05）;不同浓度的SN50预处理后,未感染和感染DEV的DEF细胞中,均以50.0μg/mL SN50处理的细胞中NF-κB1基因的转录水平下调效果最好（p<0.05）。LPS预处理DEF细胞后感染DEV,12h84 h DEV NP基因的转录水平均受到明显抑制（p<0.01）,84 h后2.0μg/mL和6.0μg/mL LPS均会促进DEV NP基因的转录水平;而经SN50预处理DEF细胞后感染DEV,细胞中DEV NP基因的转录水平均显著下降（p<0.01）。ELISA结果显示,经LPS预处理后,不感染或感染DEV,DEF细胞中IL-6表达量整体稍呈下降趋势（p>0.05）,而IL-1β和MyD88的表达则呈无规律变化;经SN50预处理后不感染或感染DEV,DEF细胞中IL-1β、IL-6和MyD88的表达均无规律变化。以上研究结果表明,不同浓度LPS均可促进正常DEF细胞中NF-κB1基因的转录,而DEV则可以阻断低浓度LPS（2.0μg/mL）的这种促进作用。不感染或感染DEV,SN50均于高浓度（50μg/mL和75μg/mL）时才能有效降低NF-κB1基因的转录水平;不同浓度的LPS或SN50均对NF-κB通路关键因子的表达基本无影响;LPS在DEV感染后期才能促进其增殖,而SN50则可以有效抑制DEV的增殖。本研究为阐明NF-κB信号通路与DEV之间的相互作用关系奠定了实验基础。。
关键词： 鸭肠炎病毒 鸭胚成纤维细胞 NF-κB信号通路 激活剂LPS 抑制剂SN50 增殖
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高羊茅FaCCA1基因克隆、表达分析及基因编码蛋白的亚细胞定位
《植物生理学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：生物钟节律基因（circadian clock gene） CCA1在植物光周期途径中具有十分重要的作用。以高羊茅‘黔草1号’ cDNA为模板,利用同源扩增结合cDNA末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends, RACE）技术从高羊茅中获得与拟南芥CCA1高度同源的cDNA全长序列,命名为FaCCA1。利用BLAST在线软件对该基因进行生物信息学分析,通过农杆菌介导的烟草瞬时表达,观察Fa CCA1基因编码蛋白的亚细胞定位,并利用RT-qPCR技术分析不同光照条件下FaCCA1基因表达水平。结果表明,该序列cDNA全长为2 433bp,含有一个完整的开放阅读框,长度为2 148 bp,编码蛋白含有715个氨基酸,蛋白分子量为77.80 kDa,理论等电点为5.91。亚细胞定位结果显示FaCCA1基因所编码的蛋白定位于细胞核。系统进化树分析表明FaCCA1与禾本科植物的CCA1蛋白亲缘关系较近,其中与大麦亲缘关系最近,达到80%以上。FaCCA1基因表达量在长日照高于短日照,表达水平出现昼夜节律钟变化模式,表明高羊茅FaCCA1表达量受光周期调控。这为高羊茅FaCCA1基因的功能研究提供参考资料,为高羊茅的分子育种利用提供了改良靶标。
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大蒜资源精油成分分析与比较
《中国调味品 》 2021 北大核心
摘要：为探明不同来源大蒜资源精油成分的差异,该研究采用水蒸气蒸馏提取法提取大蒜精油,利用GC-MS分析精油组分及其相对含量。结论:大蒜精油的含量在0.13～0.36 mL/100 g之间,精油提取率有较大差异,贵州和江苏大蒜资源的精油含量相对较高。采用GC-MS法分析了24份大蒜精油,共得到40种物质,其共有成分二烯丙基三硫化物、二烯苯基二硫化物、甲基-2-丙烯基三硫化物和二烯丙基四硫化物的累计含量大于70.00%,不同来源的大蒜资源其精油成分差异较大,贵州大蒜资源的大蒜素含量较高、品质较好。聚类分析结果表明,在欧氏距离20.00处可将24份大蒜资源聚为4大类群,贵州大蒜资源主要聚集在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类群中,而第Ⅳ类群中主要为外省资源。大蒜精油成分相对含量变化可作为大蒜种质资源鉴定的有效途径之一。
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贵州引进甘薯种质资源形态标记聚类分析
《种子 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以引进的33份甘薯种质资源为试验材料,利用形态标记聚类分析法,研究材料间亲缘关系,为贵州甘薯新品种选育提供参考。结果表明,在欧式聚类9.71处,可将33份材料分为两大类群,类群Ⅰ包括31份材料,分成两个亚群;类群Ⅱ包括两份材料。同一类群的性状相差小,欧氏距离相近;类群间的性状差异较大,欧氏距离相差大。
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高羊茅FaGI基因克隆、表达及启动子分析
《农业生物技术学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：GI （GIGANTEA）是节律相关基因,在植物控制节律输出和开花调控中具有重要作用。为探索GI基因在高羊茅（Festuca arundinacea）中的生物学功能,本研究运用cDNA末端快速扩增法（rapid amplification of cDNA ends, RACE）克隆和染色体步移法扩增得到该基因序列和启动子序列,并对其进行生物信息学分析。序列分析表明,FaGI基因（GenBank No. MZ540915）序列全长3 869 bp,其开放阅读框为3 447 bp,编码1 149个氨基酸。启动子序列2 371 bp,有CURECORECR、GT1CONSENSUS、LTRE1HVBLT49和MYB识别位点多个顺式作用元件。系统进化树表明,FaGI基因编码的蛋白与草甸羊茅（Festuca pratensis）、黑麦草（Lolium perenne）、黑麦（Secale cereale）和小麦（Triticum aestivum）等禾本科植物同源蛋白的进化关系比较近。亚细胞定位显示其定位在细胞核,说明该蛋白可能在细胞核中发挥作用。荧光定量分析不同光照处理和不同发育阶段下的表达模式。结果显示,FaGI基因的表达受光周期和生物钟的调控,不同发育时期其表达量不同,苗期的表达量最高,进入生殖生长阶段其表达量下降。构建p1300-FaGI过表达载体转化拟南芥（Arabidopsis thaliana）,结果显示,FaGI过表达拟南芥能上调AtCCA1（CIRCADIAN CLOCK ASSOCIATED 1）和AtTOC1 （TIMING OF CAB EXPRESSION 1）表达,下调AtFT（FLOWERING LOCUS T）和AtCO （CONSTANS）表达。该研究结果为后续验证高羊茅FaGI基因功能提供理论依据。
关键词： 高羊茅 高羊茅GIGANTEA （FaGI）基因 启动子克隆 表达分析
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