对虾白斑综合症病毒重组cDNA克隆的构建与分析

宋晓玲; 黄倢; Kathy F.LTang; 杨冰; Donald V.Lightner; 《水生生物学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：取经人工注射感染了对虾白斑综合症病毒 40— 45h的凡纳对虾鳃组织 ,分离mRNA ,以mRNA为模板合成双链cDNA ,并克隆于PUC质粒的NotI/SalI位点 ,构建了 1 0 0 0余株对虾感染后期鳃细胞的重组cDNA克隆。重组质粒经PCR鉴定插入片段 ,DNA斑点杂交分析目的片段 ,测定了 2 0株对虾白斑综合症病毒的重组cDNA克隆的末端DNA序列 ,并对其进行了包含存在的开放阅读框架、启动区上游序列、编码产物的特性等分析。结果显示 :PCR产物在0 3— 1 6kb之间 ;大于 1kb的克隆中有 31 8%的克隆为白斑综合症病毒的重组cDNA克隆。已测序的不包含同源序列的 1 3株克隆中含有 1 4个开放阅读框 ,其中 1 1个上游可检出启动子基序 ,4个可检出启动子调制元件。ORF转译产物的特性基序分析显示 :有 2个ORFs可检出锌指基序 ,3个ORFs可检出亮氨酸拉链基序 ,2个ORFs可检出NTP结合基序 ,未检出核定位信号基序。

关键词： 白斑综合症病毒 cDNA克隆 构建 分析

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鱼微核试验筛检水体诱变物的应用与研究

李谷; 程晓莉; 陈丹; 余文斌; 翟良安; 《水生生物学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：对五种环境污染物的遗传毒性采用鱼微核试验技术对其进行了筛检 ,试验结果表明鱼微核试验用作筛检诱变物的遗传毒性是有效的 ,对监测水体的质量也具有潜在的价值 ;同时 ,对国内外学者将各种各样的技术应用到鱼微核试验进行了总结 ,概述了微核形成的机理 ;在此基础上 ,提出应用鱼微核试验筛检水体诱变物时应注意的问题。

关键词： 微核试验 遗传毒性 胞质受阻技术 鱼 水体 诱变物

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白斑综合症病毒的生物学特性

雷质文; 黄倢; 梁成珠; 俞开康; 战文斌; 《海洋科学 》 2002 北大核心 CSCD

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史氏菊海鞘生活史的研究进展

张继红; 方建光; 金显仕; 刘瑜; 《海洋水产研究 》 2002 CSCD

摘要：史氏菊海鞘为附着、滤食性无脊椎生物 ,为贝类筏式养殖的主要敌害生物。目前还没有找到经济、有效的防治措施。切断其生活史的某个环节 ,阻止其发展可能是一条途径。本文对史氏菊海鞘生活史的研究进展情况进行概述 ,并对其生态习性和生活史进行了详细的阐述。史氏菊海鞘具有无性出芽生殖和有性生殖两种生殖方式。出芽生殖过程中 ,一般 7d为 1个无性生殖周期 ,幼体的出芽生殖阶段至少持续 4 9d;无性出芽生殖之后 ,开始进行有性生殖

关键词： 史氏菊海鞘 生活史

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我国额尔齐斯河的鱼类及鱼类区系组成

任慕莲; 郭焱; 张人铭; 蔡林刚; 阿达克; 李红; 付雅丽; 刘昆仑; 《干旱区研究 》 2002 CSCD

摘要：1999～ 2 0 0 0年作者对中国境内额尔齐斯河水系进行了研究调查。通过调查该河 (我国境内 )现有鱼类 35(亚 )种 ,其中属于额尔齐斯河土著鱼类 2 3(亚 )种。由于发现了新疆高原鳅和小体高原鳅 ,其鱼类组成由原来的 4个复合体增至 5个。另外 ,小体鲟、西伯利亚鲟和北鲑现已濒危。

关键词： 额尔齐斯河 中国 鱼类 分布区划

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广东鲂(“非汉字符号”)×团头鲂(“非汉字符号”)杂交子一代及其双亲染色体组型的分析

叶 星; 谢 刚; 祁宝伦; 潘德博; 许淑英; 庞世勋; 《大连水产学院学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：采用活体肾细胞直接制片法制作了广东鲂(Megalobrama hoffmanni)(?)和团头鲂(Megalobrama amblycephala)(?)及其杂交子一代的染色体。广东鲂、团头鲂和其杂交子一代的染色体数目均为 2n＝48,最大的染色体对均在 SM组。广东鲂的染色体组型为26m＋18sm＋4st,总臂数NF＝92;团头鲂的染色体组型为26m＋22sm,总臂数NF=96;杂交子一代的染色体组型及总臂数与母本广东鲂的相同。广东鲂和团头鲂的染色体组型较相似,从细胞遗传学的角度解释了广东鲂与团头鲂杂交成功、杂种后代可育的原因。

关键词： 广东鲂 团头鲂 杂交子一代 染色体组型

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卷口鱼耗氧规律的研究

谢 刚; 许淑英; 祁宝崙; 叶 星; 《大连水产学院学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：卷口鱼(Ptychidio jordani)的耗氧量随着体重的增长而增加,关系式为 Y=0.3539X0.5645。耗氧率却随着体重的增长而减少,关系式为 Y=0．3519X-0．4340。水温和水流量对耗氧率都有影响。在一定水温范围内,耗氧率随着水温的上升而增加,关系式为Y=0．0038X1．2711,水温24~30℃时耗氧率变幅较小,24℃以下、30℃以上时耗氧率变幅较大。在一定的水流量范围内,耗氧率随着流量的增大而增加,关系式为 Y=0．0012X0．5086。卷口鱼的呼吸耗氧率存在较明显的昼夜变化,耗氧高峰出现在每日10:00~13:00和20:00~23:00,白天的耗氧率均大于晚上。

关键词： 卷口鱼 耗氧量 耗氧率

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南方鲇生长激素完整cDNA的克隆及其DNA序列分析

宋平; 向筑; 潘云峰; 胡隐昌; 胡珈瑞; 《水生生物学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：采用RT-PCR法和3'、5'RACE(Rapid amplification of cDNA ends)法从南方鲇脑垂体RNA克隆出生长激素(Growth hormone,GH)cDNA。此cDNA全长1087nt(含 Poly(A)》,其5'端非编码区长52nt、阅读框(Open reading frame,ORF)长603nt、3'端非编码区长415nt。其推导的GH由200个氨基酸组成,其中前24个氨基酸为信号肽部分。氨基酸序列比较表明,南方鲇GH与Pangasianodongigas、Ictaluruspunctatus和Heteropneustes fossilis三种鲇类的同源性分别为97.5%和95.0%,与鲢、鳙、草、鲤和鲫鱼的GH同源性达76.0%以上,而与人的GH(Ⅰ、Ⅱ)同源性最低为31.0%和29.5%.

关键词： 生长激素 cDNA RT-PCR 南方鲇

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鲢生长激素cDNA表达载体构建及在大肠杆菌中的表达

陈松林; M.Schartl; 《水产学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：应用RT—PCR技术从白鲢垂体mRNA中扩增出GH全长cDNA片段 ,长度 1.2kb。将 1.2kb白鲢GHcDNA克隆到载体质粒pBluescriptKSII +(pBSKSII +)中 ,构建了pBS -scGHcDNA克隆 ;通过含有NdeI酶切位点的特异引物扩增出不含信号肽序列的cDNA片段 ,将其重组到pRSET5b载体质粒中 ,构建了白鲢GHcDNA表达质粒pRSET -scGH。将此表达质粒转化BL2 1(DE3)大肠杆菌 ,经IPTG诱导后 ,在转化的大肠杆菌中检测到GH蛋白的存在。Western印迹表明该蛋白带与草鱼GH单克隆抗体具有强烈的免疫反应。

关键词： 鲢 生长激素cDNA 表达载体 大肠杆菌

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青鳉p53基因克隆、结构分析及同源重组载体构建

陈松林; HONG Yun-Han; Manfred SCHARTL; 《动物学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：应用“Long PCR”技术 ,用 6对 p5 3引物从青胚胎干细胞基因组DNA中扩增出 6个相互重叠的片段 ,其中最大的片段长达 4 5kb ,这 6个PCR片段覆盖了整个 p5 3基因。序列分析表明青p5 3基因长约 8 7kb ,由 11个外显子和 10个内含子组成。结构比较表明 ,青 p5 3基因在大小上与人和小鼠 p5 3基因存在较大差异。青p5 3基因的内含子 1仅为 0 85kb ,而人和小鼠p5 3基因的内含子 1则分别长达 10kb和 6kb ;青 p5 3基因的外显子 3(86bp)明显大于人和小鼠 p5 3基因的外显子 3(2 2bp) ;外显子 4 (170bp)比人 (2 80bp)和小鼠 (2 6 0bp)的外显子 4小 ;内含子 10 (3 5kb)则比人和小鼠内含子 10 (0 7kb和 0 9kb)大得多。用SVTK neo基因作正选择标记基因 ,用SVTK tk基因作负选择标记基因 ,用青 p5 3基因组片段作同源序列 ,构建了鱼类 p5 3基因同源重组载体。将此载体转染青胚胎干细胞 ,并经G4 18和Ganc药物选择后证明上述正、负选择标记基因在干细胞中能够有效表达 ,并提供对G4 18的抗性和对Ganc的敏感性。

关键词： 青鳉 p53基因 结构 同源重组载体 胚胎干细胞

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