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NAC通过调控活性氧影响脂肪间充质干细胞增殖和分化

中国农业科学 2023 北大核心 CSCD

摘要:[目的]细胞在体外培养过程中易受氧化应激,细胞内活性氧水平升高,影响细胞功能.通过探究N-乙酰-L半胱氨酸(N-Acetyl-L-cysteine,NAC)对猪脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)活性氧的调控作用,进一步明确对其增殖和分化的影响,为培养脂肪种子细胞体外大量扩增和提高分化效率提供理论基础和参考依据.[方法]为建立ADSCs体外培养氧化应激模型,在ADSCs增殖过程中加入不同浓度的H2O2(0、25、50、100 μmol·L-1),通过细胞计数结果、细胞形态、细胞活力、高通量高内涵活细胞共聚焦成像系统检测细胞内活性氧水平,确定 H2O2 的添加浓度.为了筛选NAC促进ADSCs增殖的最佳添加浓度,在ADSCs增殖过程中加入不同浓度的NAC(0、1、2、3 mmol·L-1),通过细胞计数结果和细胞形态,确定 NAC 的适宜添加浓度.通过 EdU 染色和细胞计数分析不同处理条件下(Control、1 mmol·L-1 NAC、50 μmol·L-1 H2O2、1 mmol·L-1 NAC + 50 μmol·L-1 H2O2)的细胞增殖情况,为进一步探究NAC对氧化应激的ADSCs增殖的影响.为探究不同处理条件下ADSCs内活性氧的水平,对不同处理条件下增殖 3 d后的ADSCs进行CellRox染色,通过高通量高内涵活细胞共聚焦成像系统检测细胞内活性氧水平,明确 ADSCs 增殖与细胞内活性氧水平的关系.为探究ADSCs内活性氧水平对其分化的影响,ADSCs在不同处理条件下分化 10 d,对其进行油红O染色,Image J分析染色面积评估ADSCs的分化脂质积累量并通过RT-qPCR检测ADSCs分化相关基因的相对表达量.[结果]ADSCs在增殖过程中,与对照组相比较,添加 50 μmol·L-1 H2O2 组的ADSCs呈梭形,细胞内活性氧含量显著升高(P<0.05),氧化应激模型成功建立.与对照组相比,ADSCs在增殖过程中添加 50 μmol·L-1 H2O2,ADSCs增殖数目显著降低(P<0.05),但是在ADSCs分化过程中添加 50 μmol·L-1 H2O2,ADSCs的脂质积累量显著升高(P<0.05).ADSCs在增殖过程中,与对照组相比较,添加 1 mmol·L-1 NAC组的ADSCs呈梭形,细胞内活性氧含量显著降低(P<0.05),ADSCs增殖数目显著升高(P<0.05),但是 1 mmol·L-1 NAC的添加对ADSCs的脂质积累没有显著影响(P>0.05).[结论]氧化应激的产生提高ADSCs中活性氧水平,不利于ADSCs体外大量扩增,诱导细胞分化,加速细胞衰老.在ADSCs体外扩增体系中添加1 mmol·L-1 NAC可以降低因长期培养、外源刺激等因素带来的氧化应激损伤,对氧化应激的ADSCs具有保护作用,能有效促进细胞的增殖,并且不会影响细胞的分化能力.

关键词: NAC ADSCs 活性氧 增殖 分化 培养脂肪

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新疆棉秆回收机械化现状及发展对策

华中农业大学学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:新疆是我国最大的棉花产区和优质棉生产基地,棉花种植面积和产量均居全国首位.棉秆作为棉花的主要副产物,是一种重要的农业可再生资源,其利用价值越来越受到关注.棉秆回收机械化作为棉秆收储运的首要环节,是保障棉秆离田综合利用的前提,解决棉秆回收机械化问题对提高其综合利用率、改善生态环境和提高经济效益具有重要现实意义.本文分析了新疆棉花生产与棉秆资源现状,概述了国内外典型的棉秆回收机械研究与应用现状,总结了我国棉秆回收机械的类型、关键技术、性能特点、存在问题和发展趋势,指出了现阶段我国棉秆回收机械化程度低、收储运体系不完善是制约其综合利用的瓶颈问题,提出要加强棉秆回收机械研发创新力度,突破核心关键技术;同时完善收储运体系建设,建立离田回收利用技术模式.

关键词: 棉秆 机械化回收 棉秆回收机械 棉秆打捆机 离田回收

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不同改良剂对盐碱地花生生长特性和产量的影响

西南农业学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:【目的】探究不同改良剂对盐碱地花生的影响,为提高盐碱地花生产量提供参考。【方法】以花育25号和益花1号2个花生品种为试验材料,在新疆农垦科学院试验场进行田间小区试验,通过不同类型及施用量的改良剂(生物炭、钙抑制剂、土壤再生要素原液和微生物菌剂)处理盐碱地,研究改良剂对盐碱地花生生长特性和产量的影响。【结果】施用生物炭、钙抑制剂、土壤再生要素原液和微生物菌剂均不同程度增加了花生的株高、主根长、第一侧枝长、第二侧枝长、茎叶和根干重,有效促进了花生的生长发育。在微生物菌剂T3处理中,花育25号苗期、花针期、荚果期叶片SPAD较对照分别提高35.19%、17.73%、25.64%,益花1号苗期、花针期、荚果期叶片SPAD较对照分别提高33.26%、16.42%、14.65%;苗期花育25号和益花1号的叶面积较CK分别增加80.26%和81.54%,花针期花育25号和益花1号的叶面积较CK处理分别增加33.65%和33.77%,最终使饱果率、籽仁率、百果重、百仁重和产量显著提高。微生物菌剂T3处理的花生产量最高,钙抑制剂T1的花生产量最低,微生物菌剂T3处理下,花育25号饱果率、籽仁率、百果重和百仁重较对照分别提高19.84%、2.71%、4.05%和11.94%,益花1号分别提高6.39%、4.98%、34.27%和7.34%,花育25号和益花1号产量分别高达5981.84和6048.40 kg/hm~2,较CK处理增产14.07%和10.45%。【结论】微生物菌剂T3处理对盐碱地花生生长具有较好的促进作用,增产效果显著,是盐碱地花生增产增收的有效途径。

关键词: 改良剂 花生 生长特性 产量 盐碱地

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沼液肥喷施对棉花生长及产量品质的影响

广东农业科学 2023 北大核心 CSCD

摘要:[目的]沼液肥是一种优质的有机液体肥,新疆棉田有机肥施用较少或不施,本研究以期探究叶面喷施沼液肥对新疆绿洲棉花生长及产量品质的影响.[方法]设置4个沼液肥喷施量梯度:0 kg/hm2(CK)、15 kg/hm2(OM1)、30 kg/hm2(OM2)、45 kg/hm2(OM3)进行棉花叶面喷施试验,蕾期、花期分两次喷施后,调查棉花株高、叶片数、叶宽,称量棉花各器官干物质量,测定功能叶叶绿素含量,分析产量品质指标等,研究沼液肥喷施对棉花生长及产量品质的影响.[结果](1)喷施沼液肥可促进棉花生长,显著提高棉花株高、叶片数、叶宽,OM2(30kg/hm2)处理的各项生长指标均表现较好;(2)喷施沼液肥显著增加了棉株茎、叶、蕾(铃)、根部的干物质量,蕾期喷施后棉花各器官干物质量随喷施浓度增加而增加;花期喷施后,仅叶片干物质量随喷施量增加而增加;(3)叶面喷施沼液肥可提高棉花叶片叶绿素含量.在蕾期至花期,OM2处理叶片的SPAD值在63.35~71.55之间,随时间推移其SPAD值变化幅度最小;(4)随沼液肥喷施量的增加,棉花产量先增加后降低,OM2处理下籽棉产量最高、为6 338 kg/hm2,比对照增产7.37%.喷施沼液肥整体提升了棉花纤维品质,提高了棉花纤维长度、纤维整齐度、马克隆值,随沼液肥喷施量的增加,棉花纤维长度呈下降趋势、纤维整齐度和马克隆值则先增加后降低、纤维断裂比强度先降后升,且OM2处理下纤维断裂比强度最低、为31.78cN/tex.[结论]在新疆绿洲植棉区,棉花蕾期、花期叶面喷施沼液肥,可促进棉花生长,有利于维持棉花功能叶片的叶绿素含量(SPAD值);适宜喷施沼液肥,可提高棉花产量和品质,但是过量喷施沼液肥(OM3,45 kg/hm2),反而会降低棉花产量.

关键词: 沼液肥 喷施 棉花 SPAD值 干物质量 产量 品质

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致羔羊脑炎大肠杆菌的分离鉴定、耐药性及毒力基因检测

中国兽医学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:采用细菌常规分离和PCR等方法对分离株进行分离鉴定、药敏试验,并对相关耐药基因和毒力基因进行检测。结果显示,从病死羔羊脑组织和肺脏组织共分离鉴定3株致病性大肠杆菌,3株分离菌均呈多重耐药现象,其中对青霉素、阿莫西林、头孢他啶、头孢唑啉、头孢拉定、麦迪霉素、氟苯尼考、恩诺沙星、四环素、复方新诺明、替考拉宁表现出100%耐药,3株菌均对美罗培南、亚胺培南表现出高度敏感;A1、A2分离株同时对多西环素、多黏菌素B中度敏感,对美罗培南、亚胺培南表现出高度敏感。A1、A2、A3分离株共检测出gyrA、sul3、blaTEM、blaCTX-M、aadA1、aph(3′)-Ia等6种耐药基因和fimH、crl、hlyE、pta、mota、luxs、csgA、pap、wcaM等9种毒力基因;动物试验结果显示,小鼠感染后,存在不同时间段死亡现象,剖检发现小鼠内脏出现不同程度病变,且从死亡小鼠肺脏和脑组织中均分离到接种细菌。结果表明,新疆石河子某规模化羊养殖场因神经系统感染死亡的细菌性病原是大肠杆菌;从肺脏和脑中共分离出3株致病性大肠杆菌,并且其存在多重耐药以及携带较多耐药基因和毒力基因并导致小鼠的发病死亡。

关键词: 致病性大肠杆菌 脑炎 耐药基因 毒力基因 药敏试验 致病力

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AL型三系交小麦不育相关基因dCAPs标记开发与应用

分子植物育种 2023 北大核心 CSCD

摘要:为快速、准确鉴别出不育系中混入的保持系种子数量,确保不育系种子繁殖纯度。本研究以3对育性稳定的不育系和其同型保持系为试验材料,采用Illumina wheat 90K芯片技术,对其SNP差异位点进行分析,设计了与不育基因相关的SNP引物,在此基础上开发了dCAPs标记,并采用杂交小麦杂交种和恢复系为检测材料对d CAPs分子标记的可靠性进行了验证。结果表明,从3对不育系和其同型保持系材料中获得一个共有SNP差异位点。根据差异位点开发了含有内切酶XmnⅠ的dCAPs标记,对含有不育基因材料进行dCAPs标记检测,表明该标记为AL型三系杂交小麦不育基因检测较理想的分子标记,为杂交小麦遗传基础研究及种子纯度检测提供了可靠工具。

关键词: 杂交小麦 不育基因 dCAPs标记 90K芯片

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单核细胞增生李斯特菌新型转录调节因子lmo2486的分子特征及原核表达研究

动物医学进展 2023 北大核心 CSCD

摘要:克隆目的基因LMlmo2486,分析目的基因及其编码蛋白的分子特征,并验证其编码蛋白的反应原性,为进一步研究LM lmo2486的生物学特性奠定前期的基础.通过PCR扩增单核细胞增生李斯特菌(LM)新型转录调节因子lmo2486基因,对该基因进行测序,预测分析其编码蛋白质的二、三级结构、理化特性、蛋白结构域等分子特征,并进行遗传进化分析.PCR克隆lmo2486基因的抗原集中区lmo2486K,构建重组载体pET-32a(+)-lmo2486K转化至大肠埃希氏菌感受态细胞BL21(DE3)并使用IPTG低温诱导表达,利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测重组蛋白.结果显示,LM lmo2486基因全长1212 bp,共编码403个氨基酸;lmo2486基因编码的蛋白具有亲水性和跨膜结构,无信号肽,预测发现lmo2486含有PspC和DUF4097结构域.序列同源对比发现,LM lmo2486测序所得的核苷酸序列与LM不同分离株属于同一分支,亲缘关系较近,表明lmo2486基因在LM中高度保守.SDS-PAGE检测表明,重组蛋白Lmo2486K的分子质量约为64.6 ku,Western blot分析发现,Lmo2486K蛋白具有一定的反应原性.

关键词: 单核细胞增生李斯特菌 lmo2486基因 分子特征 系统进化分析 蛋白表达

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基于临界氮浓度的南疆滴灌棉花氮营养诊断及产量估算

应用生态学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为验证临界氮浓度在南疆滴灌棉田的稳定性和适应性,明确以氮素吸收(N_(uptake))、氮营养指数(NNI)和累积氮亏缺量(N_(and))为指标评价和诊断南疆滴灌棉花适宜氮水平和氮营养状况的准确性。以‘新陆中55号’和‘新陆中78号’棉花品种为试验材料,通过2年定位田间试验,设置5个氮水平(0、75、150、300、450 kg·hm~(-2)),建立基于棉株干物质量(PDM)的南疆滴灌棉花临界氮稀释曲线(PNC_c)和基于PNC_c的N_(uptake)、NNI、N_(and)模型及NNI、N_(and)与相对籽棉产量(RY)的估算模型。结果表明:新陆中55号和新陆中78号棉花PNC_c、最高(PNC_(max))、最低(PNC_(min))边界稀释模型的相关系数(R~2)分别为0.905和0.960、0.919和0.950、0.934和0.969。新陆中55号和新陆中78号临界氮浓度基于1∶1直线的R~2、根均方差(RMSE)、相对误差(RE)分别为0.987、0.051 g·kg~(-1)、1.95%和0.984、0.044 g·kg~(-1)、1.91%,模型在年际间具有较好的稳定性和适应性。N_(uptake)、NNI和N_(and)模型对新陆中55号和新陆中78号适宜氮水平和氮营养状况的评价和诊断结果一致,均以300 kg·hm~(-2)为最佳施氮量,综合氮水平与籽棉产量拟合结果,新陆中55号和新陆中78号理论适宜施氮量分别为322.7、336.4 kg·hm~(-2)。新陆中55号和新陆中78号NNI、N_(and)与RY在不同生育期的R~2均大于0.900,NNI、N_(and)与RY的籽棉产量估算模型基于1∶1直线的R~2、RMSE、RE分别为0.899~0.989、0.05~0.13、4.1%~9.9%和0.902~0.981、0.04~0.12、5.1%~9.5%,均达到极显著水平。研究结果可为南疆滴灌棉田适宜施氮水平和氮营养状况的评价和诊断及籽棉产量的估算提供一种新路径。

关键词: 临界氮浓度 南疆 滴灌 棉花 氮稀释曲线 氮营养指数 模型

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基于模糊相似优先比法评价规模化牧场全株玉米青贮饲料品质

新疆农业科学 2023 北大核心 CSCD

摘要:[目的]研究新疆北疆地区规模化牧场全株玉米青贮饲料品质及生产水平,分析全株玉米青贮饲料品质,为推动新疆北疆地区青贮饲料高效生产提供依据.[方法]采集新疆北疆地区18个不同规模牧场中窖贮全株玉米青贮饲料,分析营养品质、发酵品质、霉菌毒素含量,运用模糊相似优先比法综合价值评定各规模化牧场全株玉米青贮饲料品质.[结果]各牧场青贮营养品质及发酵品质整体水平达到国家二级标准,所有牧场的霉菌毒素含量均符合国家限量标准.排名前三位的牧场为R>I>Q(存栏量在1 000头以上的牧场),排名后三位的牧场为N>L>H(存栏量在500头以下的牧场).[结论]新疆北疆地区规模化牧场全株玉米青贮品质整体水平良好,但不同规模牧场之间存在差距,存栏量在1 000头以上的牧场整体水平优于存栏量在500头以下的牧场;各牧场全株玉米青贮品质主要受青贮玉米品种、地区气候特性、牧场规模的影响.

关键词: 规模化牧场 全株玉米青贮饲料 发酵品质 霉菌毒素

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植物乳杆菌与酿酒酵母混合发酵对红枣酒挥发性风味物质的影响

食品工业科技 2023 北大核心 CSCD

摘要:为研究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)在混菌发酵中的应用潜力及其对红枣酒挥发性风味的影响,采用植物乳杆菌与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)以不同接种比例混合发酵红枣酒,并以酿酒酵母纯发酵为对照,监测发酵过程中菌株生物量的变化,通过气相色谱-离子迁移谱(gas chromatography-ion mobility spectrometry,GC-IMS)联用技术对挥发性风味物质进行鉴定分析。结果表明:随着植物乳杆菌接种比例的升高,其发酵过程中存活数量及时间明显增加,混合发酵处理酒样理化指标均符合国标规定;利用GC-IMS从红枣发酵酒中共鉴定出38种挥发性物质,混合发酵处理对红枣酒中酯类、醇类和醛酮类等大部分挥发性物质的形成有明显促进作用;基于偏最小二乘判别分析(partial least squares-discrimination analysis,PLS-DA)共筛选出5种特征标志物(VIP>1),而异戊醇、乙酸乙酯、乙酸和乙酸异戊酯是影响不同混合发酵红枣酒挥发性风味差异的关键物质;风味轮廓及感官评价结果表明,果香、植物味和花香是红枣酒主要的风味特征,其中植物乳杆菌与酿酒酵母以10:1接种发酵有助于增强红枣酒果香与花香的浓郁度,口感协调、余味较长,显著改善了红枣酒的挥发性风味特征和感官品质,可应用于红枣发酵酒的酿造生产。

关键词: 植物乳杆菌 混合发酵 红枣发酵酒 气相色谱-离子迁移谱 挥发性风味物质

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