科研产出
穿孔艾美耳球虫浙江分离株的致病性和免疫原性
《中国兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：兔球虫病是一种严重威胁我国家兔养殖业的重要传染性寄生虫病,目前,世界公认的兔球虫种类有11种,其中,穿孔艾美耳球虫(Eimeria perforans)在我国兔群的感染率最高,为35.2%;然而,国内尚未有关于其分离株致病性和免疫性的报道.本研究通过单卵囊显微挑选和无球虫兔体内传代技术,从浙江地区分离获得了1株穿孔艾美耳球虫,在此基础上,通过分子生物学技术对其进行了分子鉴定,结果显示,浙江分离株与欧洲分离株在18S rRNA基因序列的同源性在99.2%以上,且在进化树上自成一小亚枝.最后,通过动物试验对其致病性和免疫原性进行了鉴定,致病性试验结果如下:以5*10~2(Ⅰ组),5*10~3(Ⅱ组),5*10~4(Ⅲ组)和5*10~5(Ⅳ组)个孢子化卵囊感染无球虫兔,在感染后4~6 d,各感染组均出现饮水、食料和排粪量明显减少,以及粪便形态干小的临床症状,其中,第Ⅲ组中的2只兔在接种后12 d出现腹泻,并在之后第13天死亡1只,死亡兔剖检十二指肠和空肠有弥散性出血点;在感染后6~12 d,各感染组兔平均体质量数值上略小于不感染对照组,但无显著性差异(P≥0.05);在感染后5~13 d,第Ⅰ~Ⅳ组兔的平均排卵囊总量分别为(3.65*10~7±1.86*10~6)/只、(9.92*10~7±3.60*10~6)/只、(4.89*10~7±4.49*10~6)/只和(3.93*10~7±1.56*10~6)/只,以第Ⅱ组兔的平均排卵囊量最大,排卵囊期持续2周以上,有2个排卵囊高峰,高峰值分别出现在感染后第7和10~11天;免疫原性试验结果如下:第Ⅰ~Ⅴ组兔在感染接种后第14天攻毒,攻毒剂量为1*10~6个孢子化卵囊/只,攻毒后第4~6天,第Ⅲ、Ⅳ组和攻毒对照组(Ⅴ组)出现拉稀症状,其中,第Ⅲ组兔分别在攻毒后第6和7天死亡1只,攻毒后死亡率为50%;攻毒后,除第Ⅲ组外,各组兔平均体质量无显著性差异(P≤0.05);攻毒后第5~10天,第Ⅰ~Ⅴ组兔的平均排卵囊总量分别为(3.88*10~5±2.10*10~5)/只、(8.00*10~5±2.83*10~5)/只、(1.89*10~5±2.25*10~4)/只、(3.36*10~5±7.46*10~4)/只和(1.77*10~6±6.34*10~5)/只,相对于攻毒对照组,第Ⅰ~Ⅳ组兔的卵囊减少排出比率分别为78.0%,54.7%,89.3%和81.0%.以上试验结果表明,穿孔艾美耳球虫浙江分离株为致病性毒株,可导致试验兔拉稀和死亡,但免疫原性不强.
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蝉拟青霉类枯草杆菌蛋白酶基因的克隆及其序列和蛋白质分析
《浙江农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：蝉拟青霉是一种常见的昆虫病原真菌,被广泛应用于生物防治.本研究根据GenBank中已登录的淡紫拟青霉、粉拟青霉、球孢白僵菌和金龟子绿僵菌的类枯草杆菌蛋白酶基因序列的同源性比较,以它们高度保守的核苷酸序列设计一对引物,采用RT-PCR和3′/5′-RACE相结合的方法,从蝉拟青霉中克隆出完整的类枯草杆菌蛋白酶(subtilisin-like protease)cDNA基因序列.cDNA全序列为2 031 bp,该序列5′-端和3′-端的非编码序列长度分别为170 bp和262 bp,开放阅读框为1 599 bp,编码532个氨基酸,信号肽长度为18个氨基酸,前肽长度为133个氨基酸.该基因编码的蛋白序列与虫草棒束孢(Isaria farinosa)、球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、蛹虫草(Cordyceps militaris)和哈茨木霉(Trichoderma harzianum)类枯草杆菌蛋白酶有较高的同源性,同源性分别为88%、88%、89%和71%.成熟蛋白具有典型的丝氨酸蛋白酶活性位点,同时有5个半胱氨酸,4个潜在的N-糖基化位点,位于细胞的液泡中与分泌途径相关,二级结构中以α-螺旋和无规则卷曲为主.
关键词： 虫生真菌 蝉拟青霉 类枯草杆菌蛋白酶基因 克隆
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益生菌免疫研究热点分析——基于中国知网(CNKI)期刊论文的共词分析
《中国家禽 》 2019 北大核心
摘要：将大数据分析与动物营养与饲料科学相结合,以"益生菌"并包含"免疫"为检索对象,在中国知网(CNKI)进行高级检索,CNKI包含相关文献总共1 804篇。以共词分析的研究为总体思路,并运用社会网络分析、关键词聚类分析等方法,全方位多层次分析了益生菌并包含免疫近几年的研究热点及方向。结果表现在两个方面:益生菌对畜禽肠道内营养以及体内免疫功能方面的影响,益生菌对畜禽生长性能和血液生理生化指标的影响。由此推测益生菌未来研究方向:益生菌对畜禽生长、免疫相关基因的表达调控,益生菌对畜禽体内酶活性、mRNA和蛋白表达的影响,益生菌对畜禽肠黏膜屏障功能的影响。
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“鹊山鸡”体尺、屠宰性能、肉品质测定及相关分析
《中国家禽 》 2019 北大核心
摘要：为揭示"鹊山鸡"体尺和屠宰性状的性别差异情况及体尺与屠宰指标间的相关性,试验对30只300日龄公母"鹊山鸡"的体尺和屠宰性状进行测定和分析。结果:平均活重(0.96±0.2)kg、屠体重(0.86±0.18)kg、半净膛重(0.75±0.18)kg、全净膛重(0.75±0.18)kg、胸肌重(0.11±0.03)kg、腿肌重(0.13±0.04)kg,屠宰率(89.34±2.81)%、半净膛率(76.94±3.66)%,"鹊山鸡"体尺和屠宰性状均呈性别显著、极显著差异(P<0.05;P<0.01),"鹊山鸡"各体尺性状、多数屠宰性状及多数体尺与屠宰性状间均呈正相关关系,肉质指标系水力与肉色部分指标间达到了显著或极显著水平(P<0.05;P<0.01)。
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肉桂醛熏蒸处理对香菇采后抗氧化能力及多胺的影响
《食品科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为探究肉桂醛熏蒸处理对香菇采后抗氧化能力和多胺的影响,本研究以'香菇808'品种为材料,采用不同浓度(0、8、40、80 nmol/L)的肉桂醛(溶剂为体积分数30%乙醇溶液)进行熏蒸处理.通过测定总酚含量、抗坏血酸(ascorbic acid,AsA)含量、抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)活力、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)活力、2,2'-联氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基清除能力、总抗氧化能力及游离态多胺含量指标,评价肉桂醛熏蒸处理的效果.结果表明:在4℃低温下贮藏30 d后,各浓度肉桂醛熏蒸处理组的香菇抗氧化物酶(APX、CAT、SOD、GR)活力、ABTS阳离子自由基清除能力和总抗氧化能力均高于对照组,其中,40 nmol/L的肉桂醛熏蒸处理的效果最佳,但肉桂醛处理对总酚含量无明显影响.此外,各肉桂醛熏蒸处理组的游离态腐胺含量高于对照组,而游离态亚精胺、游离态精胺含量低于对照组.由此可知,肉桂醛熏蒸处理能够很好地提高香菇的抗氧化性及抗逆性,该研究结果为肉桂醛熏蒸处理在控制果蔬褐变和保鲜方面的应用提供了一定科学依据.
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不同施肥管理下水旱轮作水稻土磷含量的演变
《浙江农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：基于12 a的定位试验研究了长期不同施肥管理下水旱轮作水稻土耕层土壤磷含量及土壤磷素盈亏的演变动态。结果表明,不供应含磷肥料的条件下,土壤全磷及有效磷(Olsen-P)含量随时间推移而缓慢下降,土壤磷素处于亏缺状态;供应含磷肥料(无机肥或有机肥)的条件下,土壤全磷及有效磷含量随时间推移呈缓慢上升趋势,且在供应有机肥的条件下,土壤全磷及有效磷含量上升较快,试验期间土壤磷素处于盈余状态。在本试验条件下,大麦季时,维持土壤有效磷(Olsen-P)平衡所需的磷(P_2O_5)投入量为13.5 kg·hm~(-2);单季稻时,维持磷平衡所需的磷投入量为42.4 kg·hm~(-2);油菜季时,维持磷平衡所需的磷投入量为31.6 kg·hm~(-2)。
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制霉菌素对褐飞虱若虫解毒酶、尿酸酶含量的影响
《中国水稻科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：【目的】为明确取食制霉菌素处理的水稻对褐飞虱[Nilaparvata lugens (St?l)]相关生理指标的影响,【方法】以不同浓度制霉菌素处理的水稻饲养褐飞虱,检测虫体内相关解毒酶含量与活性以及尿酸酶基因相对含量的变化。【结果】结果显示,取食制霉菌素处理的水稻,褐飞虱体内芳香基酰胺酶(aromatic amidase,AAD)含量前期下降,后期抑制作用逐渐消失,酶含量回升;虫体内O-脱乙基酶(O-deethyl enzyme,ODEE)含量在72 h的处理时长内显著低于对照;羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)和谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)的活性在不同浓度制霉菌素的处理下呈现不同的动态变化,高浓度制霉菌素(600U/m L)处理的褐飞虱种群体内的CarE和GST的活性在处理时间段内均呈现诱导-抑制-诱导的现象,而中(300 U/m L)、低浓度(150 U/m L)处理种群中两种酶则随着处理时间的延长呈上升趋势。取食不同浓度制霉菌素处理水稻的褐飞虱种群体内类酵母共生菌尿酸酶基因在24 h、48 h之后与对照相比均无显著差异。取食48 h后,包括对照在内的4个处理尿酸酶基因相对转录水平均有下调趋势,当处理时长达72 h时,尿酸酶基因相对转录水平呈现上调趋势,但取食不同浓度制霉菌素处理水稻的褐飞虱种群体内含量显著低于对照。【结论】取食不同浓度制霉菌素处理的水稻对褐飞虱3龄若虫的4种主要的解毒酶具有不同的影响;制霉菌素处理可通过减少类酵母共生菌数量从而降低尿酸酶的含量。
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大孔树脂纯化桑葚渣中α-淀粉酶抑制剂的工艺优化及其活性成分研究
《浙江农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：以桑葚渣为原料,研究了桑葚渣水提液中α-淀粉酶抑制剂的分离纯化方法及其成分。以α-淀粉酶抑制率为指标,对比了5种树脂(AB-8、S-8、D101、NKA-9和HZ-806)对桑葚渣水提液中α-淀粉酶抑制剂静态吸附和解吸的影响,从而筛选出适于分离α-淀粉酶抑制剂的大孔树脂;以此为基础,对桑葚渣水提液中α-淀粉酶抑制剂的分离、纯化参数,如上样流速、洗脱剂体积分数、洗脱剂流速进行优化;利用高相液相色谱分析不同体积分数(10%、30%、50%、70%、90%)乙醇洗脱液中的成分,以期探明桑葚渣中具有α-淀粉酶抑制活性的成分。结果表明:AB-8大孔树脂适于分离桑葚渣水提液中α-淀粉酶抑制剂,分离纯化最佳工艺为上样流速12 mL·min~(-1),70%体积分数乙醇溶液作为洗脱剂,洗脱剂流速24 mL·min~(-1)。通过分析不同体积分数乙醇洗脱液中的物质组成及其对α-淀粉酶的抑制活性发现,槲皮苷的质量浓度变化与洗脱液对α-淀粉酶的抑制率呈相似趋势,推测其可能是桑葚渣水提物中α-淀粉酶抑制活性的主要贡献因子。
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大豆分枝相关CYC/TB1-Like(CYL)基因鉴定及菜用大豆品种的激素表达谱分析
《分子植物育种 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：CYC/TB1-like (CYL)基因属于TCP转录因子家族CYC/TB1簇成员,在植物侧枝等发育过程中发挥重要作用.本研究从全基因组水平对大豆GmCYLs进行了基因成员鉴定、蛋白特性、保守结构域、进化关系、顺式作用元件组成、组织表达模式以及不同激素表达谱分析.结果表明,从全基因组水平共鉴定到9个GmCYLs.蛋白多序列比对显示所有GmCYLs均含有保守的特征结构域:碱性螺旋-环-螺旋结构(Basic helix loop helix)和R结构域(R-domain).进化分析显示大豆GmCYLs主要划分为2个分支;组织表达分析显示不同GmCYLs的基因表达涉及大豆不同的生长发育阶段.激素应答元件分析显示不同GmCYLs基因上游启动子区含有不同种类和数量的激素应答元件.进一步,qRT-PCR分析发现GmCYLs基因在叶和根两种不同组织中,分别受到ABA、BR、ACC、SA和Me JA激素信号不同程度的诱导表达.以上研究结果为进一步解析分枝相关GmCYLs基因的作用机理提供了理论参考.
关键词： 菜用大豆 GmCYLs 全基因组鉴定 组织表达 激素应答
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