紫心甘薯转录因子IbMYB1基因启动子的克隆及功能分析

杨少华; 惠亚可; 董薇; 黄立飞; 高峰; 《生物技术 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：[目的]获得紫心甘薯Ib MYB1基因上游启动子序列,对其进行生物信息学分析和功能验证。[方法]利用hi Tail-PCR技术克隆获得Ib MYB1基因5’端上游的一段DNA序列,命名为PIb MYB1。使用Plant CARE和PLACE在线软件对其进行生物信息学分析,并通过瞬时转化烟草叶片和稳定转化拟南芥植株进行GUS组织化学活性检测,以验证该启动子的功能。[结果]成功克隆获得了长度为2 183 bp的PIb MYB1片段,生物信息学分析结果表明该片段具有CAAT-BOX和TATA-BOX等启动子核心元件,还具有光、糖和赤霉素的响应元件以及MYB、b HLH等转录因子的结合位点。GUS组织化学活性检测结果表明,PIb MYB1（-2 183～-1 bp）和5’缺失突变体PIb MYB1F1 （-2 000～-1 bp）、PIb MYB1F2（-1 500～-1 bp）均能驱动GUS基因的表达。[结论]成功克隆获得了Ib MYB1基因的启动子序列,其驱动Ib MYB1基因表达的主要区域位于-2 183～-1 000 bp区段,该区域具有核心启动子元件、环境因子响应元件和MYB、b HLH等转录因子结合位点。

关键词： 紫心甘薯 转录因子 IbMYB1基因 启动子 活性检测

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穿心莲全长转录组测序及特性分析

孙铭阳; 徐世强; 顾艳; 梅瑜; 周芳; 李静宇; 王继华; 《中国农学通报 》 2021 CSCD

摘要：为从转录水平上解析穿心莲体内主要进行的生物进程及其分子机制,选取生长60天的福建漳州生产用穿心莲苗为材料,利用超长单分子测序技术测得其根、茎和倒三叶的全长转录组初始序列信息。对初始序列进行筛选、去冗余、校正、功能注释和基因结构分析。结果显示,穿心莲基因的功能主要富集于代谢途径、次生代谢产物合成途径及抗生素合成途径。bHLH、b ZIP、MYB和WRKY等直接参与次生代谢的转录因子含量位居前10。穿心莲内酯前体合成途径基因出现可变剪切,主要为内含子保留。其中,有1个基因产生了6个可变启动子式的内含子保留mRNA亚型。总之,次生代谢是穿心莲的主要生物活性进程,相关功能基因可通过结合丰富的转录因子和进行高频的可变剪切参与其中。

关键词： 穿心莲 全长转录组测序 次生代谢 转录因子 可变剪切 简单重复序列

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叶面喷施γ-氨基丁酸对糯玉米产量形成及光合特性的影响

李武; 涂攀峰; 李光玉; 蔡若琪; 李余良; 李坤; 祁喜涛; 卢文佳; 刘建华; 《南方农业学报 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：【目的】探明γ-氨基丁酸（GABA）对糯玉米产量形成及其光合生理的影响,为提高糯玉米产量的化控技术应用提供理论参考。【方法】以糯玉米品种粤彩糯2号、京科糯928和粤白甜糯7号为材料,以叶面喷施清水为对照（CK）,设置糯玉米孕穗期叶面喷施GABA 5 mmol/L（FS）处理,观察记载田间糯玉米生育时期及植株农艺性状,测定分析糯玉米产量及灌浆期和成熟期叶片光合参数、叶绿素含量等指标,研究糯玉米产量和光合生理指标对孕穗期叶面喷施GABA的响应。【结果】与CK相比,FS处理一定程度上提高了供试糯玉米的鲜苞产量、净穗产量和鲜苞穗叶比,鲜苞产量和净穗产量分别较CK提高5.45%～11.08%和5.66%～14.23%。供试糯玉米在FS处理下的单穗总粒数、成熟期净光合速率、气孔导度、蒸腾速率和株高均提高,提高幅度分别为6.28%～8.76%、14.01%～70.67%、14.60%～29.92%、8.94%～23.19%和3.35%～5.21%。FS处理对穗位高度、秃顶长、穗粗、灌浆期和成熟期叶片SPAD值及成熟期叶片老化指数的影响不显著（P>0.05）。FS处理下供试糯玉米的抽穗期、散粉期和吐丝期均较CK提前1 d。糯玉米净穗产量与鲜苞产量、穗粗、穗行数和成熟期叶片蒸腾速率呈极显著正相关（P<0.01,下同）,鲜苞产量与净穗产量、穗粗、成熟期叶片气孔导度和蒸腾速率呈极显著正相关。【结论】叶面喷施GABA处理下糯玉米产量的提高与提高单穗总粒数、叶片净光合速率和株高以及调控生育时期相关。

关键词： 糯玉米 产量 γ-氨基丁酸 叶面喷施 光合特性

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一测多评法同时测定两面针中5种成分

乔丽娅; 胡凤云; 沈卓; 黄宝优; 夏祥华; 张占江; 《中成药 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：目的 建立一测多评法同时测定两面针Zanthoxylum nitidum(Roxb.) DC.中木兰花碱、橙皮苷、盐酸血根碱、氯化两面针碱、白屈菜红碱的含量.方法 两面针70%甲醇提取物的分析采用Agilent Eclipse C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相20%乙腈-0.1%甲酸-三乙胺;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长273、284 nm;以氯化两面针碱为内标,计算其他4种成分的相对校正因子,测定含量.结果 5种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9996),平均加样回收率97.93%~99.98%,RSD 0.82%~1.43%.一测多评法所得结果与外标法接近.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于两面针的质量控制.

关键词： 两面针;化学成分;一测多评法

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实施荔枝文旅采摘销售平台项目助力广东荔枝产业高质量发展

广东省农业科学院农业经济与信息研究所; 《广东农业科学 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：为贯彻落实《广东荔枝产业高质量发展三年行动计划》,广东省农业科学院联合国家荔枝龙眼产业技术体系专家,承担省科技专项——"荔枝产业技术提升项目",就优质中晚熟荔枝品种克服"大小年"结果、荔枝农艺农机融合不够等问题展开技术攻关,并搭建荔枝文旅采摘销售信息平台,为广东省荔枝产业高质量发展提供全产业链科技支撑。

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不同淀粉类型饲粮对育肥猪营养物质表观消化率、血清生化指标、结肠黏膜免疫和微生物的影响

余苗; 李贞明; 崔艺燕; 容庭; 刘志昌; 田志梅; 马新燕; 李家洲; 马现永; 《动物营养学报 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：本试验旨在研究不同淀粉类型饲粮对育肥猪营养物质表观消化率、血清生化和免疫相关指标、结肠黏膜免疫状态以及食糜中主要微生物数量的影响.试验选取130日龄、健康且初始体重[(77.00±0.52)kg]相近的"杜×长×大"三元杂交阉公猪72头,按照体重随机分为3组,每组8个重复,每个重复3头猪.3组分别饲喂以木薯淀粉、玉米淀粉和豌豆淀粉为唯一淀粉源配制的饲粮,其中直链淀粉/支链淀粉值分别为0.11、0.25和0.44.试验预试期4 d,正试期42 d.结果 表明:1)与木薯淀粉组相比,豌豆淀粉组育肥猪对饲粮中粗蛋白质的表观消化率显著提高(P<0.05);2)与木薯淀粉组相比,豌豆淀粉组育肥猪血清中尿素氮、葡萄糖、甘油三酯和总胆固醇浓度显著降低(P<0.05);3)与木薯淀粉组相比,豌豆淀粉组育肥猪结肠食糜中潜在致病菌大肠杆菌的数量显著减少(P<0.05),而有益菌乳酸杆菌、双歧杆菌和普雷沃氏菌属的数量显著增加(P<0.05);4)与木薯淀粉相比,豌豆淀粉通过减弱结肠黏膜中Toll样受体4(TLR4)-髓样分化因子88(MyD88)-核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的激活,进而下调促炎细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)的mRNA相对表达量(P<0.05),上调抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)和屏障功能相关基因[闭锁小带蛋白-1(ZO-1)和封闭蛋白-2(claudin-2)]的mRNA相对表达量(P<0.05),提高结肠黏膜中IL-10、分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和免疫球蛋白G(IgG)的浓度(P<0.05),同时提高血清中IL-10和免疫球蛋白A(IgA)的浓度(P<0.05),降低血清中白细胞介素-8(IL-8)和IFN-γ的浓度(P<0.05).综上所述,在本试验条件下,给育肥猪饲喂豌豆淀粉饲粮可提高其对粗蛋白质的表观消化率,调控机体与氮代谢、糖代谢及脂代谢相关的血清生化指标,改变结肠食糜中微生物的组成,促进部分有益菌的增殖,降低潜在致病菌生长,提高结肠黏膜和系统免疫功能,提示摄食含有高直链的淀粉对维系整个机体的健康具有益生作用.

关键词： 淀粉类型;表观消化率;血清生化指标;微生物;免疫功能;育肥猪

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非洲猪瘟病毒LNA引物PCR检测方法的建立及优化

李艳; 张煜轩; 楚品品; 蒋智勇; 席振军; 蔡汝健; 勾红潮; 张昆丽; 宋帅; 卞志标; 李春玲; 《中国农学通报 》 2021 CSCD

摘要：为了建立一种便捷、快速且精准的非洲猪瘟病毒的检测方法,本研究根据GenBank中公布的ASFV p72基因序列,设计了一对特异性引物,并对引物中的适当碱基进行锁核酸修饰,通过优化退火温度、引物浓度,建立了非洲猪瘟病毒的锁核酸修饰引物PCR检测方法。结果表明,该方法具有良好的敏感性和特异性,检测灵敏度可以达到3×101copies/uL,比常规引物PCR方法的灵敏度提高了100倍,比real-time PCR方法的灵敏度提高了10倍,对猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒等病原基因组均无扩增,特异性良好。72份临床样品的检测结果与OIE推荐的qPCR方法检测结果一致,符合率为100%。本研究成功建立了非洲猪瘟病毒的LNA引物PCR检测方法,方法的特异性强、敏感性高,操作简单,为非洲猪瘟病毒的检测提供了一种新的、更加敏感的检测技术。

关键词： 非洲猪瘟病毒 p72基因 LNA引物 PCR检测方法

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降解黄曲霉毒素B₁的乳酸片球菌重组多铜氧化酶学性质

刘畅; 马现永; 马三梅; 邓盾; 《食品与发酵工业 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：主要对1株乳酸片球菌Pediococcus acidilactici 7₄中的多酮氧化酶（multicopper oxidase, MCO）基因CueO进行重组表达和降解黄曲霉毒素B₁（Alfatoxin B₁,AFB₁）的能力测定。通过基因工程的手段将CueO基因克隆连接到pET-28a（+）中,并转化到大肠杆菌（Escherichia coli）中进行异源表达,得到可溶性表达的重组蛋白。并进一步研究了温度、pH和底物浓度等因素对重组蛋白降解AFB₁的影响以及降解产物的细胞毒性。结果表明,重组多铜氧化酶降解AFB₁的最佳介体为丁香醛（syringaldehyde, SA）,最适pH为7.0,最适温度为37℃,该酶K_m=1.99×10^-3μmol,V_max=11.31 pmol/（min·mg）,重组CueO对AFB₁的降解产物对肝细胞的毒性明显降低。

关键词： 乳酸片球菌 多酮氧化酶 黄曲霉毒素B₁ 漆酶 酶学性质

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1978-2016年广东甘薯育成品种系谱与亲本利用分析

王章英; 唐朝臣; 江炳志; 张湘博; 房伯平; 《广东农业科学 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：[目的]了解广东甘薯育成品种遗传背景与品种间亲缘关系,为甘薯育种亲本选择和杂交组合有效配制提供参考.[方法]利用1978—2016年广东省育成的通过国家鉴(认)定或省审定的57个甘薯品种基本信息,分析广东省育成甘薯品种基本概况、亲本来源、系谱关系及衍生品种情况.[结果]广东甘薯育成品种主要利用品种间定向杂交(59.6%)或集团杂交(29.8%)选育而成,育成品种类型以鲜食型和鲜食兼用型为主、占86.0%;57个甘薯育成品种溯源直接亲本61个,原始亲本42个,其中禺北白、湛薯75-57、普薯3号和新竹头作为原始亲本,使用频数较高,衍生品种数14个以上;广东省甘薯育成品种系谱主要以地方品种或早期广东省本地育成种及其衍生品种为骨干组成,可划分为4个脉系:湛薯75-57脉系、广揭脉系、广普脉系和其他脉系;广东育成品种作为直接亲本已先后培育出50个甘薯新品种在生产上推广应用.[结论]广东甘薯育成品种所用亲本呈现明显的"广东特色",遗传基础较窄,为扩大甘薯品种遗传基础,在广泛引进收集国内外优异甘薯种质资源拓宽亲本的同时,亟需对甘薯种质资源尤其是地方品种资源进行精准鉴评以挖掘优异种质,培育优质亲本.

关键词： 甘薯;育成品种;系谱分析;亲本;地方品种

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长期饲喂柑橘提取物对肥育猪血液生化指标、抗氧化能力、免疫功能以及游离氨基酸的影响

崔艺燕; 田志梅; 鲁慧杰; 邓盾; 容庭; 李贞明; 王刚; 马现永; 《中国农业大学学报 》 2021 北大核心 CSCD

摘要：旨在研究长期饲喂柑橘提取物对肥育猪血液生化指标、抗氧化能力、免疫功能和游离氨基酸的影响。选取108头56日龄19.73±0.39kg杜×长×大猪,公母各半,设置3组。空白组为基础饲粮,抗生素组在基础饲粮上添加75g/t金霉素,柑橘提取物组在基础饲粮上添加柑橘提取物（56～112d添加250mL/t,113～194d添加200mL/t）。用分光光度法测定血浆总胆固醇、甘油三酯等生化指标和丙二醛、总抗氧化能力等抗氧化指标,用氨基酸分析仪测定血浆游离氨基酸含量,用酶联免疫法测定白介素和免疫球蛋白等免疫指标。结果表明:1)与空白组相比,柑橘提取物组和抗生素组血浆尿素氮含量分别显著降低了19.66%和15.53%（P<0.05）;与抗生素组相比,柑橘提取物有降低总胆固醇含量的趋势（0.05≤P<0.10）。2)与空白组相比,柑橘提取物显著提高了血浆的总抗氧化能力（P<0.05）。3)与空白组相比,抗生素和柑橘提取物组血清免疫球蛋白（Ig）A的浓度分别显著提高了13.17%和15.50%（P<0.05）,抗生素组显著降低了IgM的浓度（P<0.05）。4)与空白组和抗生素组相比,柑橘提取物组显著提高血浆亮氨酸浓度（P<0.05）,有提高脯氨酸浓度的趋势（0.05≤P<0.10）;与空白组相比,柑橘提取物显著提高了天冬酰胺、谷氨酸和丙氨酸的含量（P<0.05）,与抗生素组的功效相似。综上,长期饲喂柑橘提取物降低了肥育猪血浆尿素氮含量,提高了血液抗氧化能力、免疫功能和游离氨基酸水平。

关键词： 柑橘提取物 猪 抗氧化能力 免疫能力 游离氨基酸

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