科研产出
单季晚稻区应用生态工程技术控制水稻主要害虫的实践
《植物保护学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：以大量化肥和农药投入为特征的高度集约化生产方式导致我国稻田(尤其是单季晚稻)生态系统失衡、害虫猖獗、环境污染和农药残留超标等一系列问题。自2009年起,本课题组在浙江省宁波市单季晚稻区开展应用生态工程技术修复稻田生态服务功能、降低害虫种群、减少化肥农药使用的研究与实践。技术措施主要包括:一是调节生物多样性保护土著天敌数量;二是种植蜜源植物增强天敌控害功能;三是生物诱集减少害虫虫源基数;四是调整农药使用策略减少天敌杀伤;五是控肥降低害虫自然增长速率;六是集成简便、高效、省本生态控害技术。2013—2014年连续2年的调查结果表明,应用生态工程丰富了单季晚稻稻田生态系统中节肢动物生物多样性、增加了天敌种群数量,稻田生态功能得到良好修复,害虫被持续控制在较低的水平,杀虫剂的使用减少93.75%,比农民自防区平均减少12.42%氮肥量的情况下水稻产量增产9.99%,实现社会、经济、生态效益的有机统一。该技术体系对环境友好、简单易行,已成为国家主推技术,应用推广前景广阔。
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白背飞虱酵母双杂交cDNA文库的构建
《浙江农业学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：白背飞虱(Sogatella furcifera Horváth)作为一种迁飞性害虫,不仅自身危害水稻,而且以持久性方式传播南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)。为了研究白背飞虱与SRBSDV之间的相互作用,需要构建一个高质量的酵母筛选文库,试验利用Gateway技术构建了白背飞虱cDNA酵母表达文库,检测分析显示,白背飞虱初级文库库容量约为1.72×10~7CFU,cDNA插入片段主要分布在500~2 000 bp,重组率约为95.8%;次级文库库容量约为1.73×10~7CFU,cDNA插入片段主要分布在400~2 000bp,重组率为100%;Y187酵母菌株的白背飞虱酵母双杂交cDNA文库库容量约5.09×10~7CFU,插入片段大小在750~2 000 bp,重组率100%,再随机挑选36个单克隆进行测序分析,所得结果与Gen Bank数据库比对显示36个克隆中含有22个不同的基因,长度在750~2 000 bp,这些分析表明,该文库可以用于酵母双杂交的后续筛选,为研究白背飞虱与SRBSDV之间的互作奠定了基础。
关键词： 白背飞虱 南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV) Gateway技术 酵母双杂交 cDNA文库
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鸽PPARγ基因的克隆、序列分析及组织表达特征
《农业生物技术学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)是一种由配体激活的核转录因子,在脂类代谢调控中发挥重要作用。本研究旨在克隆鸽(Columba livia)PPARγ基因的全长cDNA序列,并分析该基因编码的蛋白质理化性质和结构特征,揭示其组织表达特征。以鸽脾脏组织总RNA为模板,采用快速扩增cDNA末端(rapid amplification cDNA ends,RACE)方法,克隆到PPARγ基因的cDNA序列,并运用生物信息学的方法对其进行分析,运用实时荧光定量PCR检测PPARγ基因在鸽心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏和肌肉组织中的表达情况。研究结果表明,鸽PPARγ基因(Gen Bank No.KU166859.2)cDNA全长1 846 bp,包含1 428 bp的开放阅读框,63 bp的5'端非编码区和355 bp的3'端非编码区,共编码475个氨基酸。经预测,鸽PPARγ基因编码的蛋白质由7 661个原子组成,分子式为C2436H3840N644O714S27,等电点为6.19,相对分子质量为54.438 79 k D,平均亲水性为-0.287。结构预测表明,鸽PPARγ蛋白具有2个锌指结构以及配体结合域。鸽PPARγ氨基酸序列与杜鹃(Cuculus canorus)、鸭(Anas platyrhynchos)、鹦鹉(Melopsittacus undulates)、斑胸草雀(Taeniopygia guttata)、火鸡(Meleagris gallopavo)、鸡(Gallus gallus)、鹌鹑(Coturnix japonica)、猪(Sus scrofa)、人(Homo sapien)、小鼠(Mus musculus)和斑马鱼(Danio rerio)的同源性分别为97%、97%、96%、96%、96%、96%、96%、92%、91%、90%和64%。构建的系统发生树显示,鸟类和哺乳动物各形成一个大的分支,斑马鱼形成一个独立分支,与鸽的聚类顺序较近的物种为杜鹃和鸭,该结果与这些物种在生物学上的分类是基本一致的。荧光定量PCR结果显示,PPARγ基因在肺组织中的表达量最高,较高表达于肾脏、肝脏、脾脏和心脏,而在肌肉组织中的表达量最低。本研究获得了鸽PPARγ基因的cDNA序列、分子的结构特点及组织表达特征,提示可能与其在不同组织中的功能有关,该结果为进一步研究PPARγ结构和功能提供了理论依据。
关键词： 鸽 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ) 克隆 序列分析 组织表达
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醋栗番茄耐低磷胁迫的遗传规律分析
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了研究野生醋栗番茄耐低磷胁迫的遗传规律,以耐低磷胁迫野生醋栗番茄和低磷胁迫敏感栽培番茄003为材料,通过杂交自交构建6世代(P1,P2,F1,B1,B2和F2)群体,采用植物数量性状主基因+多基因混合遗传模型方法,分析番茄缺磷症状叶遗传规律。结果表明:野生醋栗番茄LA722耐低磷胁迫遗传符合MX2-ADI-AD模型,即2对加性-显性-上位性主基因+加性-显性多基因控制。2对主基因加性效应相等且为负,显性效应均为正,且第2对主基因的显性效应大于第1对主基因,2对主基因的遗传以负向的加性效应为主,多基因的遗传以显性效应为主。B1、B2和F2群体中主基因的遗传率分别为31.44%、81.47%和78.35%,多基因遗传率均为0,环境因素为18.53%~68.56%。利用本研究结果不仅为耐低磷胁迫的育种设计奠定理论基础,同时也为耐低磷胁迫资源的挖掘和筛选提供理论依据。
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鸡肉源沙门氏菌血清型、药敏性及部分耐药基因研究
《食品科学 》 2017 EI 北大核心 CSCD
摘要：目的:研究432株分离于陕西省杨凌及周边城市零售鸡肉中沙门氏菌的血清型分布、药敏性及其与(氟)喹诺酮类抗菌药物抗性相关耐药基因的流行状况。方法:按照玻片凝集法鉴定血清型,使用临床和实验室标准协会推荐的琼脂稀释法测定沙门氏菌的药敏性,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法确定沙门氏菌中与(氟)喹诺酮类抗生素耐药相关基因。结果:432株沙门氏菌中除36株血清型未定外,其余396株沙门氏菌共涵盖37个血清型,其中鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium,检出率17.93%)、汤普森沙门氏菌(Salmonella thompsons,检出率12.88%)、埃森沙门氏菌(Salmonella essen,检出率8.84%)和婴儿沙门氏菌(Salmonellainfants,检出率6.57%)等血清型比较常见。沙门氏菌对磺胺异噁唑(耐药率89.81%)耐药最为普遍,对磺胺甲噁唑、萘啶酮酸、四环素、氨苄西林、氯霉素和阿莫西林-克拉维酸等抗生素的耐药率均在50%以上。aac(6’)-Ib-cr基因检出率(16.67%)最高,qnr B、qnr S和qnr A的检出率分别为10.19%、6.71%和1.62%,且该4种基因在不同血清型菌株中分布不同。菌株携带qnr和aac(6’)-Ib-cr基因越多,对(氟)喹诺酮类和氨基糖苷类协同耐药性越强。结论:陕西省杨凌及周边城市零售鸡肉源沙门氏菌的血清型种类繁多,耐药比较普遍。
关键词： 沙门氏菌 血清型 (氟)喹诺酮类抗生素 耐药基因
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液相色谱-串联质谱法测定蜂产品中吡虫啉及其3种代谢物
《分析化学 》 2017 SCI 北大核心 CSCD
摘要：建立了蜂蜜和蜂花粉中吡虫啉及其代谢物吡虫啉烯烃、吡虫啉脲、6-氯烟酸的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。在Qu ECh ERS方法基础上,针对目标物化学性质和样品杂质情况,对提取溶液的p H值、提取次数、净化材料等参数进行了优化。最终以5%甲酸-乙腈溶液提取两次,无水Mg SO_4、NaCl盐析分层,提取液经增强型脂类去除材料(EMR)净化,以LC-MS/MS进行测定,基质外标法进行定量分析。结果表明,蜂蜜和蜂花粉中吡虫啉、吡虫啉烯烃、吡虫啉脲、6-氯烟酸的平均加标回收率为86.0%~111.5%,相对标准偏差在1.7%~9.6%之间,检出限分别为0.20、3.50、0.40和14.00μg/kg,定量限分别为0.60、11.64、1.20和45.00μg/kg。本方法分析速度快、灵敏度高、重现性好,适用于蜂蜜和蜂花粉中吡虫啉及其3种代谢物的快速测定。
种植密度、氮施用量及打顶时间对棉花产量及产量因子影响的研究
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：获得高产是棉花育种家最重要的目标之一。棉花产量因子较多且受多种因素影响。本研究以转基因抗虫杂交棉品种慈抗杂3号为实验材料,研究种植密度(A)、氮肥施用量(B)及打顶时间(C)三因素对棉花产量及产量因子的影响。通过三因素四水平的正交实验设计,考察7个性状指标:小区籽棉产量(SY)、50铃籽棉重(50SCW),50铃皮棉重(50LW),衣份(LP),单株铃数(BN),单株节数(NN)和株高(PH),对所获数据分别用直观分析法和方差分析法两种方法分析,以期确定打顶时间、种植密度及氮肥施用量三因素对棉花产量及产量构成因素影响的主次关系及最优组合。结果表明,(1)氮肥施用量对SY产量影响最大,其次是种植密度,最后是打顶时间,即B>A>C;获得高产的最优因素组合为氮肥施用37.5 kg/667m~2,种植密度1 400株/667 m~2,打顶时间比正常延迟10 d;(2)产量构成因素不同,对应最优因素组合亦不同,影响因素的主次顺序亦不同。对于50SCW,B>C>A;对于50LW,B>A>C;对于LP,A>B>C;对于BN,A>B>C;对于NN,B>A>C;对于PH,B>C>A。(3)SY、50SCW、50LW、BN、NN和PH性状表现与氮肥施用量正相关;BN和NN性状表现与种植密度负相关;SY、NN、PH和BN性状表现和打顶时间正相关。本研究所获结果不仅为指导棉花高产种植提供参考材料,同时对长江流域棉区及相似生态棉区提高棉花经济收益奠定基础。
关键词： 棉花 种植密度 氮肥施用量 打顶时间 产量及产量构成因素
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乐果及其代谢物氧乐果在不同生育期豇豆中的残留消解动态
《农药学学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为明确不同生育期豇豆上施用乐果可能产生的残留风险,以40%乐果乳油按有效成分设低(540 g/hm~2)、中(600 g/hm~2)和高(900 g/hm~2)3个施药剂量,开展了苗期、结荚期2次施药和结荚期3次施药3种场景下的田间模拟试验,按照一定的时间间隔采集成熟豇豆样品,采用乙腈提取,C_(18)分散净化,超高效液相色谱-串联质谱检测。结果表明:乐果和氧乐果在豇豆中的定量限均为0.01 mg/kg,在0.01~2 mg/kg添加水平下,乐果和氧乐果的平均回收率在77%~101%,相对标准偏差为3.1%~17%。距苗期最后一次施药后10 d,乐果在豇豆中的残留量各处理均低于中国国家标准中规定的最大允许残留限量(MRL)值0.5 mg/kg,最高为0.043 mg/kg;但其代谢物氧乐果残留量在施药后14 d,仅540 g/hm~2的处理低于其MRL值0.02 mg/kg,施药后18 d仍有检出,最高为0.013 mg/kg。于结荚期2次和3次施药条件下,豇豆中乐果的残留量分别于施药后3 d和5 d即低于其MRL值(0.5 mg/kg);而其代谢产生的氧乐果在施药后10 d仅540 g/hm~2处理在豇豆中的残留量低于其MRL值。表明乐果使用后的残留超标风险主要源于其代谢物氧乐果。因此,建议豇豆结荚期不宜施用乐果,对其在苗期施用也应严格限制。
关键词： 乐果 代谢物 氧乐果 豇豆 残留 超高效液相色谱-串联质谱
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桑黄粗多糖和蛹虫草粗多糖协同增效诱导肺癌细胞A549 S期阻滞及凋亡的研究
《蚕业科学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：通过细胞抑制试验研究桑黄子实体粗多糖与蛹虫草子实体粗多糖混合后的粗多糖对肺癌细胞A549的抑制作用,为利用药用真菌开发抗肿瘤药物提供试验依据。采用MTT法检测0.8 mg/m L的桑黄粗多糖和蛹虫草粗多糖对肺癌细胞A549增殖均有一定的抑制作用,作用48 h后的抑制率分别为32.95%、41.93%;将0.8 mg/m L桑黄粗多糖和0.8 mg/m L蛹虫草粗多糖按1∶1体积比混合的粗多糖则表现出协同增效抑制A549细胞增殖作用,抑制率可达54.71%。用流式细胞计数法测试分析的结果是:0.8 mg/m L蛹虫草粗多糖可影响A549细胞周期各时相的分布,而0.8 mg/m L桑黄粗多糖则对细胞周期无明显作用,但0.8 mg/m L混合粗多糖对A549细胞周期各时相分布的影响显著增强,G0/G1期细胞比率从75.39%±2.49%降低至64.43%±2.12%(P<0.01),S期细胞比率从16.61%±0.87%升高至27.97%±2.82%(P<0.01);混合粗多糖作用48 h后,A549细胞的晚期凋亡率从正常组的1.92%±0.55%提高至20.75%±0.24%,坏死细胞率由正常组的1.88%±0.43%提高至9.64%±0.42%,表现出明显的协同增效诱导A549细胞凋亡的作用。荧光定量PCR检测结果表明,A549细胞分别用0.8mg/m L的桑黄粗多糖和蛹虫草粗多糖及其混合粗多糖处理后,细胞内周期调控相关蛋白基因Cyclin A、CDK4的mRNA转录水平均显著下调,Cyclin D1、CDK2的mRNA转录水平显著上调,凋亡相关基因Bid、Bak、Cyt-C、Caspase3的mRNA转录水平也显著上调。研究结果提示桑黄粗多糖和蛹虫草粗多糖混合使用,具有协同增效抑制肺癌细胞A549增殖的作用,推测其通过调控细胞周期和细胞凋亡相关基因的表达,导致Cyt-C释放及启动caspase级联反应,从而诱导细胞凋亡。
关键词： 桑黄 蛹虫草 粗多糖 肺癌细胞A549 细胞周期 凋亡
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