科研产出
基于KASP技术开发检测水稻耐高温TT1基因型的分子标记
《分子植物育种 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：高温是对水稻产量和品质有重要影响的环境因素之一，随着全球气候逐渐变暖，高温热害对水稻生产构成了严重的威胁。研究发现非洲栽培稻CG14中的OgTT1等位基因可以显著提高水稻耐高温特性。为了更高效利用OgTT1等位基因选育耐高温水稻品种，根据OgTT1等位基因的功能性SNP位点设计了一个高通量分子标记TT1-KASP。利用该分子标记对来源于NIL （CG14）分别与申恢26、申6B杂交的F4代重组自交系进行检测，检测结果表明在F4代重组自交系的65个株系中，4个株系不含OgTT1等位基因，53个株系OgTT1等位基因纯合，而其余的8个株系为杂合基因型。对65个F4代重组自交系株系进行基因测序后发现，得到的基因序列与TT1-KASP标记所得序列完全一致。该结果表明TT1-KASP分子标记可以用于耐高温水稻新品种的标记辅助选择育种工作。
关键词： 水稻(Oryza sativa) 耐高温 TT1基因 KASP分子标记
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不同氮含量对大球盖菇菌丝生长和碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响
《食用菌学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：通过研究液体培养时不同氮含量(0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%)对菌丝生长、碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响,筛选大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)菌丝生长最适氮源.结果表明:豆粕粉是大球盖菇菌丝生长最适氮源.氮含量为0.6%时,菌丝生长速度最快.在实验范围内,对照(氮含量为0)的亚硝酸盐还原酶活性较高,1.2%氮含量的天冬酰胺合成酶活性较高,0.6%氮含量的谷氨酸合酶活性最高;0.6%氮含量的内切β-1,4-葡聚糖酶活性最高,β-1,3-葡聚糖酶活性较高;0.6%氮含量的谷氨酸合酶基因表达量最高,1.2%氮含量的谷氨酸脱氢酶基因表达量较高;对照的β-1,3-葡聚糖酶基因和半纤维素酶基因表达量均最高.研究结果可为大球盖菇液体菌种开发和应用提供参考.
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西瓜叶斑病病原菌的鉴定及室内药剂筛选
《植物保护 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：2022年在上海市浦东新区西瓜上发生一种深褐色、不规则至近圆形斑的叶部病害。采用组织分离法对病害样本进行分离，分离物SHCCC01经柯赫氏法则验证具有较强致病性。根据分离物的菌落特征、分生孢子形态、生物学特征以及基于核糖体内部转录间隔区（internal transcribed spacer, ITS）、组蛋白基因（histone,His）、真核翻译延伸因子1α（translation elongation factor 1α,TEF1-α）和肌动蛋白（actin,Act）基因联合系统发育分析等，将病原菌鉴定为瓜类尾孢Cercospora citrullina。10种杀菌剂对该病原菌的毒力测定试验结果表明：氟啶胺、己唑醇、氟环唑、戊唑醇等4种药剂对病原菌的抑菌活性较高，其EC50分别为0.375 2、0.575 4、1.472 3、1.890 2μg/mL。这些结果为西瓜尾孢叶斑病的防控和杀菌剂登记提供了重要依据。
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添加天然抗氧化剂对宠物罐头空气暴露后菌落总数及过氧化值的影响
《中国饲料 》 2024 北大核心
摘要：宠物罐头食品开盖后会在空气中长时间暴露，这一过程中食品变质会给宠物健康造成不利影响。为了比较维生素C（VC）、维生素E（VE）、茶多酚（TP）、脂溶性迷迭香提取物（REO）、水溶性迷迭香提取物（REW）5种宠物食品中常见天然抗氧化剂的耐湿热灭菌能力，及添加高（500 mg/kg）、低（100 mg/kg）剂量抗氧化剂的犬粮罐头在办公室和犬舍环境中暴露24 h内菌落总数、pH、过氧化值的变化。结果表明：VC、VE及REW耐湿热灭菌能力较好，在空气中暴露24 h内，犬粮罐头菌落总数及过氧化值均有上升，pH无变化。VC、VE、REO抑菌能力较好，VE抑制油脂抗氧化能力优于其他天然抗氧化剂（P ＜0.05）。因此综合各项指标，对于延长宠物罐头开盖后变质时间，添加一定量的维生素E是较优的选择。
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香菇中CRISPR/Cas9基因编辑体系的构建
《菌物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：香菇Lentinula edodes是世界第二大食药用菌，具有较高的食用、药用、经济和生态学研究价值，探索其本身具备优良性状的调控机制，同时对可能参与其中的功能基因进行反义遗传学研究是十分必要的。本研究对已知的功能基因利用CRISPR/Cas9基因编辑技术进行编辑，确定该技术能在香菇中工作。预测并筛选出一个香菇U6snRNA启动子，以乳清苷-5'-磷酸脱羧酶编码基因pyrG为目的基因设计CRISPR/Cas9技术的重要工作元件sgRNA，对异源cas9基因依据香菇基因组密码子偏好性进行优化，构建了一个同时携带sgRNA和cas9基因的双元表达载体。利用农杆菌介导的香菇菌丝遗传转化技术将该载体转入香菇单核体中对pyrG基因进行编辑，成功获得pyrG基因发生碱基缺失的香菇单核体突变株，经功能筛选后确定其为尿嘧啶营养缺陷型单核体菌株。本研究成功构建了一个能同时表达CRISPR/Cas9技术重要组件的双元表达载体，证明了CRISPR/Cas9能够在香菇中发挥编辑目的基因的功能，为进一步开展香菇重要功能基因的研究奠定了良好的基础。
关键词： 香菇 CRISPR/Cas9基因编辑技术 pyrG基因 尿嘧啶营养缺陷型 功能基因
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水稻耐盐性基因SKC1的KASP标记的开发与利用
《分子植物育种 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：籼稻品种'Nona Bokra'中携带的SKC1NB等位基因水稻耐盐性的主效QTL(Quantitative trait lo-cus)位点.为了提高对水稻SKC1基因型鉴定效率,根据SKC1NB基因中的功能性SNP位点开发了一个KASP分子标记SKC1NB-KASP,利用该标记对'NonaBokra'与粳稻品种'繁14'、'花B'和'武1B'的回交BC3F2群体进行SKC1等位基因的分型,发现在BC3F2群体受测的65个单株的DNA样品中,有16份样品的基因型与供体亲本'NonaBokra'相同,31份样品显示杂合基因型,18份样品与轮回亲本基因型相同.对这65份DNA样品的SKC1基因进行测序以检验KASP标记基因分型结果的准确性,发现测序结果与KASP标记分型的结果完全一致.以上结果说明SKC1NB-KASP标记可以高效、准确地鉴定SKC1位点的基因型,大大提高了耐盐性水稻分子标记辅助选择育种的效率.
关键词： 水稻(Oryza sativa) 耐盐碱 SKC1 KASP
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西红花花芽分化及其花期调控研究进展
《江苏农业科学 》 2024 北大核心
摘要：西红花(Crocus sativus)既是传统的中药材，具有凉血解毒，散郁开结的功效；又是天然香料和染剂，被广泛用作食品、化工行业原料，因其较高的食药用价值和经济价值，近年来社会需求量日益增加。然而1朵西红花仅3根柱头(常被称为“花丝”)可入药，且花期较为集中，导致人工采收压力大和花丝损耗等问题，严重影响西红花的产量，制约了西红花产业的发展。花芽分化和花期调控是影响西红花产量和品质的关键因素。了解西红花花芽分化以及花期的影响因素，对缓解花期采收压力、减少花丝损耗和提高西红花产量具有积极作用。本文概述近年来关于西红花花芽分化过程中的形态特征以及营养物质、内源激素含量和抗氧化酶活性等方面的研究进展，总结了温度、光照、植物生长调节剂等调控技术对西红花花芽分化和花期的影响，同时梳理了西红花成花诱导以及花发育相关基因，以期为实现西红花花期精准调控提供理论基础。
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高产三萜灵芝新菌株'沪农灵芝5号'的选育
《食用菌学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为选育高产三萜灵芝（Ganoderma lucidum）新品种，以抗杂菌能力强、生物学效率高的‘沪农灵芝1号’（H 1）和三萜含量高、抗杂菌能力弱的‘灵芝G 8’（G 8）为亲本，将原生质体单核菌株进行杂交，从130个杂交组合中筛选出菌丝长势较好的25个杂交菌株，并对其进行栽培试验，考察菌包成品率、生物学效率等农艺性状及子实体三萜含量，从中筛选出杂交菌株Z18。与亲本G8相比，Z18菌包成品率提高66.67%、生物学效率提高22.54%；与亲本H1相比，Z18子实体中三萜含量提高51.26%。ERIC-PCR分析结果显示，Z18与亲本存在遗传差异。Z18达到新品种审定标准，已通过上海市非主要农作物品种认定，定名为‘沪农灵芝5号’。
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大球盖菇酶解液中鲜味肽的分离鉴定及其协同增鲜效果分析
《食品科学 》 2024 EI 北大核心 CSCD
摘要：利用超滤、凝胶过滤色谱结合感官评价和电子舌分析技术，分离大球盖菇酶解液中鲜味肽组分，对鲜味最强组分F3中的鲜味肽进行反向高效液相色谱-串联质谱鉴定，并将鉴定得到的鲜味肽合成后进一步探讨其呈味特性。结果表明，大球盖菇酶解液F3组分中鉴定得到8条鲜味肽段，分别为ELWR、RLVDR、KPDNR、AHLRF、LDWDR、LAEWR、DDWWR和EGHKGW，它们均具有鲜味特征和鲜味增强作用，阈值分别为0.30～1.33 mmol/L和0.53～2.43 mmol/L；除LDWDR外，7条多肽对味精溶液均有不同程度的鲜味提升，提升幅度0.18%～61.12%,ELWR、RLVDR、KPDNR、AHLRF和EGHKGW 5条多肽在低浓度时表现出良好的鲜味提升效果。RLVDR和KPDNR协同增鲜的鲜味峰值质量浓度为5 mg/mL,LDWDR、LAEWR、DDWWR和EGHKGW在4 mg/mL时达到鲜味峰值。鲜味肽的氨基酸组成和空间结构会影响其味觉属性。本研究结果为大球盖菇鲜味肽的开发利用提供了理论依据。
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