科研产出
基于高通量测序的大麦InDel标记开发及应用
《作物学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：分子标记是遗传研究的基础工具,广泛应用于遗传多样性研究、种质鉴定、遗传图谱构建和基因定位等领域.本研究基于大麦的全基因组重测序数据鉴定出的二态性SNP位点,开发出遍布全基因组的118对InDel引物.以49份不同地理来源的大麦种质检测其有效性,筛选出2个等位基因的共显性InDel标记72对,进一步对288份大麦种质进行遗传距离分析及构建系统发育树.结果显示,筛选到32个有效性的核心InDel标记,覆盖大麦7条染色体上,平均PIC为0.44,平均MAF为0.34;基于InDel标记位点的供试大麦的系统发育树结果揭示供试大麦具有丰富的遗传多样性,且能够将具有相同地理来源的多数品种聚为一类.表明开发的32个二态性InDel标记可有效地用于鉴定品种间的亲缘关系,且丰富了大麦品种鉴定的分子标记.上述核心InDel标记在大麦品种鉴定、大麦资源亲缘关系分析以及群体划分方面具有一定的理论意义和应用价值.
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饲粮粗蛋白质水平对49日龄幼兔生长性能、营养物质表观消化率、血清抗氧化及脂肪代谢相关指标的影响
《动物营养学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲粮粗蛋白质水平对49日龄幼兔生长性能、营养物质表观消化率、血清抗氧化及脂肪代谢相关指标的影响.试验选择160只体重[(1528.80±9.77)g]相近的49日龄新西兰幼兔,随机分为4组,每组20个重复,每个重复2只.幼兔分别饲喂4种不同粗蛋白质水平(A组14.0%、B组15.5%、C组17.0%、D组18.5%)的饲粮,试验期28 d.结果表明:1)饲粮粗蛋白质水平对幼兔末重和平均日增重(ADG)无显著影响(P>0.05),其中A组、D组ADG稍高于B组、C组.饲粮粗蛋白质水平对肝脏发育有一定影响,其中D组肝脏重显著高于C组(P<0.05).A组~C组胃pH随着饲粮粗蛋白质水平升高而升高(P<0.05),盲肠pH无显著变化(P>0.05).2)C组、D组粗脂肪表观消化率显著高于B组(P<0.05),A组磷表观消化率显著高于B组(P<0.05),A组、D组氮表观消化率高于B组、C组,但无显著差异(P>0.05).消化代谢试验结果显示,采食量随饲粮粗蛋白质水平升高而降低,C组最低,采食氮D组最高,粪氮排泄、粪水分含量均以A组最低,A组粪水分含量显著低于B组、C组(P<0.05),与粗蛋白质表观消化率结果一致.3)各组间血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、球蛋白(Glb)、尿素氮(UN)含量均无显著差异(P>0.05);各组间血清胆碱酯酶(CHE)、碱式磷酸酶(AKP)、谷草转氨酶(ALT)、谷丙转氨酶(AST)活性无显著差异(P>0.05).A组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性高于B组、C组、D组,丙二醛(MDA)含量低于B组、C组、D组,但无显著差异(P>0.05).4)饲粮粗蛋白质水平对血清葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)含量无显著影响(P>0.05),但A组肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性显著低于B组、D组(P<0.05),糖原含量、脂肪酸合成酶(FAS)活性低于其他3组,但无显著差异(P>0.05).5)A组饲料成本与其他3组相比,分别降低了64.2、122.7、178.1元/t.由此可见,饲粮粗蛋白质水平为14%时对营养物质表观消化率、氮排泄、血清抗氧化指标有较好的效果.肉兔生产中适当降低饲粮粗蛋白质水平不会影响肉兔的生长性能,还能提高营养物质表观消化率,降低氮排泄,提高机体抗氧化能力,同时降低肝脏中脂肪的合成,促进机体健康.
关键词： 饲粮粗蛋白质 幼兔 营养物质表观消化率 抗氧化 脂肪代谢
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PEDVN蛋白单克隆抗体的制备及间接免疫荧光检测方法的建立
《华南农业大学学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：[目的]制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白单克隆抗体,并建立检测PEDV的间接免疫荧光试验方法.[方法]以重组表达的PEDV N蛋白为免疫原,免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,分离高抗体效价小鼠的脾细胞,与SP2/0细胞融合.筛选分泌抗PEDV N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株.在已经感染PEDV的Vero细胞中,以抗PEDV N蛋白的单克隆抗体为一抗,FITC?羊抗鼠IgG为二抗,建立PEDV的间接免疫荧光检测方法.[结果]制备的杂交瘤细胞株可以稳定分泌抗PEDV N蛋白抗体,细胞上清液的ELISA抗体效价在1:3200以上,而诱导的小鼠腹水抗体效价在1:1000000以上.将单克隆抗体应用在间接免疫荧光试验时,最适条件为?20℃80%(φ)丙酮溶液中固定30 min;一抗用PBS缓冲液按体积比1:1000稀释,4℃ 条件下过夜孵育;二抗用PBS缓冲液按体积比1:100稀释,37℃ 条件下孵育1 h.以建立的间接免疫荧光试验方法检测细胞中的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PPRV)、猪肠道 α 冠状病毒(PEAV)、猪轮状病毒(PoRV)和PEDV,只有PEDV显示阳性,其他病毒均为阴性.[结论]制备了抗PEDV N蛋白单克隆抗体,以该抗体为一抗建立检测PEDV的间接免疫荧光试验方法具有良好的特异性,为PEDV的实验室检测及PEDV在培养细胞中的定位和动态分布提供了有效的手段.
关键词： 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 单克隆抗体 间接免疫荧光试验
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微囊化酿酒酵母FM-S-115的高密度培养
《食品工业科技 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：在单因素实验的基础上,采用正交试验对培养基和培养条件优化,并结合微胶囊化培养方法,以实现酿酒酵母FM-S-115的高密度培养.结果表明,单因素实验对碳源和碳源含量、氮源和氮源含量、温度、pH和菌液接种量七个条件的优化确定三个影响最显著的因素为:温度、pH和碳源含量.通过三因素三水平正交试验得出最适培养条件:温度是32℃,pH为4.5,碳源为蔗糖且含量为16%,在此条件下培养计得活菌总数为1.79*108CFU/m L,是正常培养条件下1.02*108CFU/m L的1.75倍.通过计算不同质量浓度海藻酸钠和氯化钙制得的微胶囊破囊率得出,海藻酸钠质量浓度为1.2%,氯化钙质量浓度为7%时,破囊率最低.将微囊化酵母在最适条件下静置培养四代,菌落总数为8.10*108CFU/g,是正常培养的7.94倍,是在最适条件下摇床培养的4.53倍,菌体密度得到大幅提升.
关键词： 酿酒酵母FM-S-115 高密度培养 微胶囊化 培养基条件 培养条件 破囊率
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翻耕和不同泡田方式对土壤微生物生物量及其酶活性的影响
《土壤通报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了解秸秆还田与翻耕和不同泡田方式配合对耕层土壤微生物特性的影响,通过田间小区试验,研究了秸秆还田与翻耕和不同泡田方式措施配合对水稻收获期0~10 cm和10~20 cm耕层土壤基础呼吸、微生物量碳氮、酶活性及养分的影响.结果表明:秸秆还田时,翻耕和以不同方式泡田均能提高0~10 cm土层土壤基础呼吸,特别是泡田2天换水处理(FS+WR)较施麦秸施化肥处理(FS)提高102.2%;微生物量碳氮分别以翻耕(FS+PT)和FS+WR处理效果最好;与不同泡田方式比较,翻耕措施均能明显提高土壤过氧化氢酶和多酚氧化酶活性,其中,泡田7天并推迟施肥处理(FS+IP+FP)土壤的过氧化氢酶活性较FS处理提高25.9%,是不施秸秆不施化肥处理(CK)的1.3倍.多酚氧化酶活性以泡田7天处理(FS+IP)最高,较FS处理提高25.4%.不同土壤耕层中各处理间脲酶活性无显著差异.翻耕和不同泡田方式能提高土壤全氮含量,不同泡田方式中以泡田7天FS+IP处理提高幅度最大.翻耕处理(FS+PT)的水稻有效穗数比秸秆还田FS处理提高13.9%,其次为FS+WR处理,比FS处理提高9.3%.总之,泡田7天能提高土壤酶活性,翻耕能提高土壤微生物量碳含量、增加水稻有效穗数.
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低聚壳聚糖对中华绒螯蟹生长性能、体成分、非特异性免疫及抗氧化能力的影响
《水产学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为研究低聚壳聚糖对中华绒螯蟹生长性能、体成分、非特异性免疫及抗氧化能力的影响,实验选用个体均匀、初始均重为(16.20±1.30)g的中华绒螯蟹288只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复12只,分别饲喂在基础日粮中添加0(对照组)、25、50和100 mg/kg低聚壳聚糖的实验日粮,正式实验为期56 d.结果显示,与对照组相比,50和100 mg/kg低聚壳聚糖组中华绒螯蟹的饲料系数显著降低,可食内脏指数显著提高;50 mg/kg低聚壳聚糖组降低了中华绒螯蟹肌肉和可食内脏中粗脂肪含量,提高了蟹肌肉和可食内脏中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性;与对照组相比,50 mg/kg低聚壳聚糖组中华绒螯蟹碱性磷酸酶和酚氧化酶的活性显著提高.研究表明,添加低聚壳聚糖能够提高中华绒螯蟹生长性能、非特异性免疫和抗氧化能力,降低机体脂肪沉积,且添加量为50 mg/kg时效果较好.
关键词： 中华绒螯蟹 低聚壳聚糖 生长性能 非特异性免疫 抗氧化
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固相萃取净化/高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中7种大环内酯类药物含量
《分析测试学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：建立了添加剂预混合饲料、精料补充饲料、配合饲料和浓缩饲料中7种大环内酯类药物(替米考星、罗红霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、红霉素、克拉霉素和阿奇霉素)含量的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定方法.饲料样品经1%氨化乙腈提取,Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化后,采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm*100 mm,1.7μm)分离,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相梯度洗脱,电喷雾离子源正离子模式下检测,外标法定量.结果表明,替米考星、螺旋霉素和红霉素的线性范围为0.5~50μg/L(r2>0.99),罗红霉素、泰乐菌素、克拉霉素和阿奇霉素的线性范围为0.25~50μg/L(r2>0.99);7种待测物的检出限(LOD)为1.25~2.5μg/kg,定量下限为2.5~5.0μg/kg,5、10、50μg/kg 3个加标浓度下的平均回收率为61.4%~103%,批内和批间相对标准偏差为0.43%~15%.该方法简便、快速、灵敏,基质干扰小,适用于各类饲料中大环内酯类药物的常规监测和定量测定.
关键词： 大环内酯类药物 饲料 高效液相色谱-串联质谱 固相萃取
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机插秧稻田"插喷同步"控草技术在江苏示范应用
《农药 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：[目的]为了验证"插喷同步"技术对机插秧稻田杂草的应用效果.[方法]采用在插秧机上安装同步喷雾设备,进行田间示范试验.[结果]插秧后15 d左右,该技术对杂草有较高的防控效果,达97.5%以上,且对水稻幼苗安全.显著高于对照药剂40%苄嘧·丙草胺WP.插秧后30 d左右,对杂草防控效果还维持在95%以上,而对照药剂的防效只有85%左右,2者之间具有极显著性差异.[结论]利用"插喷同步"技术,一次性喷施30%苄嘧·丙草胺OD+安全解毒剂,基本上可以解决主要杂草的防控问题,省工节本.可以在江苏机插秧稻区全面推广应用.
关键词： 机插秧 插喷同步 除草剂 杂草防效 安全性 示范应用
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极端嗜热功能菌筛选及其促进堆肥腐熟效果研究
《农业环境科学学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：本研究采用富集培养方法从不同高温堆肥环境中分离筛选到9株极端嗜热菌,通过16S rDNA序列比对分析确定其分类地位,通过生长特性研究和酶活测定,优选出6株菌株复配成极端嗜热菌剂,采用模拟堆肥方法研究极端嗜热菌剂促进堆肥腐熟效果.结果表明:本研究分离得到的9株菌分别属于土芽孢杆菌属(Geobacillus sp.)、栖热菌属(Thermus sp.)、副土芽孢杆菌属(Parageobacillus sp.)和红嗜热菌属(Rhodothermus sp.).所分离菌株最适生长温度均在65~70℃;菌株NY-44、D和E的最适生长pH为9.5,属于嗜碱菌;菌株NY-44最适生长盐浓度为20 g·L-1,属于嗜盐菌.土芽孢杆菌和副土芽孢杆菌所产蛋白酶活性相对其他菌株较高,且最适反应温度均不低于80℃.在堆肥30 d时,接种极端嗜热菌剂的处理与未接种相比,种子发芽指数(GI)和胡富比(HA/FA)分别提高了35.9%和21.3%.研究结果表明,接种极端嗜热菌剂能加快堆肥腐熟进程,提高堆肥品质.
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